一种发酵中药渣有机肥菌剂的制备方法及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106609250A(43)申请公布日2017.05.03(21)申请号201510694296.6C12R1/10(2006.01)(22)申请日2015.10.22(83)生物保藏信息CGMCCNO.113802015.09.16(71)申请人中国中医科学院中药研究所地址100700北京市东直门内南小街16号(72)发明人黄璐琦陈美兰杨光陈敏李鹏英周修腾(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)C05F5/00(2006.01)C05F9/00(2006.01)C05F11/08(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图2页(54)发明名称一种发酵中药渣有机肥菌剂的制备方法及其应用(57)摘要本发明涉及“一种发酵中药渣有机肥菌剂的制备方法及其应用”，该方法以地衣芽孢杆菌为发酵菌，其制作过程如下：(1)菌种的活化：将低温保存的KCDS-1菌株接种牛肉浸膏平板培养基上进行活化，再用无菌水洗涤培养基表面，其洗脱液作为接种液，浓度为1.0～7.5×106；(2)种子液的制备：向牛肉浸膏液体培养基中接入步骤(1)制备的接种液，进行培养得种子液，浓度为1.0～7.5×106。(3)发酵培养：将步骤(2)所得种子液0.05～1％比例(体积百分比)接入玉米淀粉培养基中，再在26～32℃、摇床转速为150～200rpm的条件下培养30～40小时。采用本发明的菌剂能够将中药渣、畜生粪、秸秆、麦秆、厨余垃圾等发酵成有机肥，应用到中药材栽培以及农业生产过程中，能够提高中药材产量和质量。CN106609250ACN106609250A权利要求书1/1页1.一种地衣芽孢杆菌KCDS-1(BacilluslicheniformisKCDS-1)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.11380。2.利用权利要求1所述的地衣芽孢杆菌KCDS-1(BacilluslicheniformisKCDS-1)的微生物菌剂，其特征在于其活性成分为地衣芽孢杆菌KCDS-1(BacilluslicheniformisKCDS-1)菌体和他的胞外代谢产物。3.确立要求2所述的微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：(1)菌种的活化：将低温保存的KCDS-1菌株接种牛肉浸膏平板培养基上，并在26～30℃下培养15-20小时，然后挑取单菌落接种于LB斜面培养基上，并在26～30℃下培养15-20小时，再用无菌水洗涤培养基表面，其洗脱液作为接种液，其浓度为1.0～7.5×106；(2)种子液的制备：按照0.5～4％比例(体积百分比)向牛肉浸膏液体培养基中接入步骤(1)制备的接种液，并在26～32℃下震荡培养15～21小时，得种子液，其浓度为1.0～7.5×106。(3)发酵培养：将步骤(2)所得种子液0.05～1％比例(体积百分比)接入玉米淀粉培养基中，再在26～32℃、摇床转速为150～200rpm的条件下培养30～40小时。其中玉米淀粉培养基中各成分的比例为：玉米淀粉0.2～0.4％、大豆蛋白粉1.0～2.0％、玉米浆2～4％、MnSO40.05～0.15％、K2HPO40.2～0.4％、KH2PO40.1～0.2％、MgSO40.02～0.10％、FeSO40.01～0.02％、CaCO30.01～0.02％、pH6.0～7.0。4.按照权利要求3所述的制备方法，其特征在于步骤(3)中所述的培养温度为26～32℃。5.按照权利要求3所述的制备方法，其特征在于步骤(3)中所述的摇床转速为150～200rpm。6.按照权利要求3所述的制备方法，其特征在于步骤(3)中所述的培养时间为30～40小时。7.权利要求1所述的地衣芽孢杆菌KCDS-1(BacilluslicheniformisKCDS-1)应用在发酵中药渣有机肥。8.权利要求1所述的地衣芽孢杆菌KCDS-1(BacilluslicheniformisKCDS-1)应用在发酵以牲畜粪便、秸秆、厨余垃圾等材料发酵有机肥。2CN106609250A说明书1/5页一种发酵中药渣有机肥菌剂的制备方法及其应用技术领域[0001]本发明属于生物有机肥料生产技术领域，特别涉及一种有机肥发酵菌剂的制备及其应用。背景技术[0002]我国农业由于化肥的长期使用，已造成肥效下降，利用率不高，土壤板结、连作障碍严重等弊端，同时由于化肥的利用率只有35--40％，其余部分被土壤固定，或淋溶造成水体污染等环境问题。为了解决上述问题，专家们迫切呼吁减少化肥使用量，多使用新型生物肥，多施有机肥，广大农民也迫切需要一种新型肥料来满足农业生产的需要。欧洲一些国家生物肥料的施用量已占农业用肥总量的45％～60％，美国的施用量更高