一种抗凝血肽的制备方法及其制备得到的小肽和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106755237A(43)申请公布日2017.05.31(21)申请号201611209148.1A61P9/00(2006.01)(22)申请日2016.12.23A61P9/10(2006.01)(71)申请人广东海洋大学地址524088广东省湛江市麻章区海大路1号(72)发明人苗艳丽李泳谷长生黄娜张兆霞邓春梅廖铭能(74)专利代理机构广州粤高专利商标代理有限公司44102代理人张月光林伟斌(51)Int.Cl.C12P21/06(2006.01)C07K14/47(2006.01)A61K38/01(2006.01)A61P7/02(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种抗凝血肽的制备方法及其制备得到的小肽和应用(57)摘要本发明公开了一种抗凝血肽的制备方法，将牛奶离心，去除脂肪层，调节pH至5.0~8.0进行酶解反应；所述酶解反应的温度为40~60℃，酶解时间为2~4h；酶解的料水比为1:（1.5~3）；所述酶解反应所需酶的种类为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶中的一种或多种。本发明提供的制备方法工艺简单，原料易得，制备得到的小肽类物质具有较好的抗凝血活性，可以用来弥补肝素类药物的缺陷，本发明以水牛奶作为制备来源，毒副作用小，同时开拓了新鲜牛奶资源加工的新途径，提高牛奶的高附加值，对医学、食品领域的研究具有重要意义。CN106755237ACN106755237A权利要求书1/1页1.一种抗凝血肽的制备方法，其特征在于，将牛奶离心，去除脂肪层，调节pH至5.0~8.0进行酶解反应；所述酶解反应的温度为40~60℃，酶解时间为2~4h；酶解的料水比为1:（1.5~3）；所述酶解反应所需酶的种类为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述木瓜蛋白酶的酶用量为5000~10000u/mL，所述中性蛋白酶的酶用量为5000~10000u/mL，所述碱性蛋白酶的酶用量为5000~10000u/mL。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述木瓜蛋白酶的酶用量为6000u/mL，所述中性蛋白酶的酶用量为6000u/mL，所述碱性蛋白酶的酶用量为6000u/mL。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，酶解反应所需酶的种类为木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，首先加入中性蛋白酶酶解，然后加入木瓜蛋白酶酶解，最后加入碱性蛋白酶酶解。6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，首先加入中性蛋白酶，加入量为6000u/mL，调节pH至6.0，在40℃下酶解反应2h；然后加入木瓜蛋白酶，加入量为6000u/mL，调节pH至5.0，在60℃下酶解反应2h；最后加入碱性蛋白酶，加入量为6000u/mL，调节pH至8.0，在50℃下酶解反应4h。7.根据权利要求1至6任一所述的制备方法，其特征在于，所述牛奶为水牛奶。8.一种权利要求1至6任一所述的制备方法制备得到的抗凝血小肽类物质。9.权利要求8所述的抗凝血小肽类物质在制备血栓性心脑血管疾病药物中的应用。2CN106755237A说明书1/4页一种抗凝血肽的制备方法及其制备得到的小肽和应用[0001]技术领域[0002]本发明属于医药、保健品技术领域，更具体地，涉及一种抗凝血肽的制备方法，及其制备得到的小肽和应用。背景技术[0003]血栓是指血液成分在流动过程中，在血管或心脏内膜表面形成一种半凝块状物质，由不溶性纤维蛋白、沉积的血小板、积聚的白细胞和陷入的红细胞组成。血栓栓塞性疾病是一种常见的心脑血管病，由血栓引起的血管腔狭窄与闭塞，使主要脏器发生缺血和梗死而引发机能障碍，常表现为心肌梗死、缺血性脑梗死和静脉血栓栓塞。[0004]血栓栓塞性疾病被称为心脑血管隐形杀手，它可累及全身各个器官及系统，每年大约有3‰人发生不同形式的血栓性疾病，我国每年死于心脑血管疾病的人数达到300万人以上，它导致的死亡人数占全球每年总死亡人数的51%。存活的患者中75％致残，其中40％以上重残，严重威胁人类健康。[0005]目前国内外该类型心血管疾病还没有理想的治疗药物，当前国内外临床上防治血栓性心脑血管疾病的药物只要有肝素和水蛭素。前者疗效低，副作用大；后者虽然疗效高，副作用小，但药价高且只能注射给药，较麻烦，经济压力大。因此急需一种高效，副作用小的，成本低的血栓性心脑血管疾病药物适应上述需求。[0006]目前研究者对各种生物活性多肽的生物活性功能进行研究。这些生物活性多肽有：抗凝血肽，酪蛋白糖胎，阿片活性肽，免疫调节肽，抗氧化肽，抑制肽等。[0007]其中，研究最为深入的是乳源性生物活性肽，已