一种酶稀释液及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109187951A(43)申请公布日2019.01.11(21)申请号201811037099.7(22)申请日2018.09.06(71)申请人河北国高生物科技有限公司地址071000河北省保定市华光路123号1-501(72)发明人郭凤学袁大丰(74)专利代理机构石家庄德皓专利代理事务所(普通合伙)13129代理人刘磊娜杨瑞龙(51)Int.Cl.G01N33/535(2006.01)权利要求书1页说明书11页(54)发明名称一种酶稀释液及其制备方法(57)摘要本发明属于体外诊断试剂技术领域，提出了一种酶稀释液，包括以下组分：磷酸氢二钠2.5～3g，磷酸二氢钠0.25～0.35g，4-氨基安替比林0.9～1.1g，扑热息痛0.9～1.1g，氯化钠7.2～8.8g，酪蛋白钠9～11g，胭脂红0.018～0.022g，吐温209.5～10.5mL，新生牛血清49～51mL，Proclin3000.95～1.05mL，曲拉通X-1009.5～10.5mL，体外诊断试剂用纯化水，加至1000mL，本发明解决了酶联免疫试剂中酶标记抗体稳定性差、免疫活性低的技术问题。CN109187951ACN109187951A权利要求书1/1页1.一种酶稀释液，其特征在于，包括以下组分：磷酸氢二钠2.5～3g磷酸二氢钠0.25～0.35g4-氨基安替比林0.9～1.1g扑热息痛0.9～1.1g氯化钠7.2～8.8g酪蛋白钠9～11g胭脂红0.018～0.022g吐温209.5～10.5mL新生牛血清49～51mLProclin3000.95～1.05mL曲拉通X-1009.5～10.5mL体外诊断试剂用纯化水，加至1000mL。2.根据权利要求1所述的一种酶稀释液，其特征在于，包括以下组分：磷酸氢二钠2.85g磷酸二氢钠0.30g4-氨基安替比林1.00g扑热息痛1.00g氯化钠8.00g酪蛋白钠10.00g胭脂红0.02g吐温2010mL新生牛血清50mLProclin3001.0mL曲拉通X-10010mL体外诊断试剂用纯化水，加至1000mL。3.一种酶稀释液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、按照权利要求1～2任意一项所述的一种酶稀释液的配方，取各个组分备用；S2、向800mL体外诊断试剂用纯化水中依次加入磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠、4-氨基安替比林、扑热息痛、酪蛋白钠、胭脂红，匀速搅拌10min以上使其充分溶解；S3、加入Proclin300、新生牛血清、吐温20、曲拉通X-100匀速搅拌10min以上使充分混匀；S4、用体外诊断试剂用纯化水定容至1000mL，得到酶稀释液，置于2℃～8℃保存备用。2CN109187951A说明书1/11页一种酶稀释液及其制备方法技术领域[0001]本发明属于体外诊断试剂技术领域，涉及一种酶稀释液及其制备方法。背景技术[0002]酶联免疫吸附测定(ELISA)方法广泛用于测定抗体和抗原，其原理是使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性，形成固相的抗原或抗体，即免疫吸附剂。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标记抗体或抗原按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应，用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。通过加入与酶可发生化学反应的物质，酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅来判断所检物质的含量。[0003]酶标记抗体一般只能将其原液在-20℃以及更低温度条件下贮藏时，且不能经过反复冻融，其免疫活性才能在贮藏半年时间内不会大量地降低，才能有效地保证诊断方法结果的可靠性。目前经过酶标记抗体技术的不断发展，酶标记抗体免疫活性得到大大的提升，同时为了确保酶标记抗体免疫活性的稳定，市售的酶标记抗体都是制备成高纯度的浓缩液或冻干粉。市售的酶标记抗体在使用时均需进行几千倍的大体积稀释才能进行使用。但是如果将酶标记抗体放置于4℃条件下或将酶标记抗体进行大体积稀释后，在很短的时间内其免疫活性将迅速下降。对于ELISA商品化试剂盒而言，其关键技术之一是确保试剂盒内的酶标记抗体的免疫活性不发生改变，这不仅要求将酶标记抗体稀释几千倍制备成工作液，还需在2～8℃条件下进行保存及运输。因此，研究制备使酶标记抗体在在2～8℃中长期(6个月)保持稳定的稀释液是十分必要的，这将为诊断试剂的制备及实验室保持酶标记抗体的稳定提供必要的条件。发明内容[0004]本发明提出一种酶稀释液，解决了现有技术中的上述问题。[