一种驴的精液稀释液及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110583630A(43)申请公布日2019.12.20(21)申请号201911004452.6(22)申请日2019.10.22(71)申请人山东畜牧兽医职业学院地址261061山东省潍坊市胜利东街88号(72)发明人姜八一索佳佳郑艳玲王文超温华梅刘凤华梁强(74)专利代理机构北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)11350代理人谷利平(51)Int.Cl.A01N1/02(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种驴的精液稀释液及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种驴用精液稀释液及其制备方法，包括葡萄糖、乳糖、棉籽糖、五水柠檬酸钠、柠檬酸钾、HEPES、EDTA、卵黄、青链霉素、无菌蒸馏水、脱脂驴奶，还添加了BSA和A溶液，所述A溶液由牛磺酸、L-赖氨酸盐酸盐、肌醇、维生素B6、维生素B12、柠檬酸、柠檬酸钠、柠檬黄、纯净水组成。所述驴精液稀释液给驴精子提供了最优良的生存环境，保护了驴精子细胞膜的完整性，给精子充分的养分，在保持较高精子活力的前提下，能够抑制精子的代谢，延长精子寿命，便于精子的保存和运输。CN110583630ACN110583630A权利要求书1/1页1.一种驴的精液稀释液，其特征在于：包括葡萄糖25g、乳糖1.5g、棉籽糖1.5g、五水柠檬酸钠0.3g、柠檬酸钾0.41g、HEPES4.76g、EDTA0.4g、卵黄20mL、青链霉素10000U、无菌蒸馏水470mL、脱脂驴奶500mL，添加BSA2.5g、A溶液10mL。2.根据权利要求1所述的驴的精液稀释液，其特征在于：所述A溶液由牛磺酸2g、L-赖氨酸盐酸盐2g、肌醇2g、维生素B60.31g、维生素B120.23g、柠檬酸0.3g、柠檬酸钠0.2g、柠檬黄0.1、纯净水10mL组成。3.根据权利要求2所述的驴的精液稀释液，其特征在于：使用时，精液：精液稀释液的体积比为1：(1-5)的比例来进行稀释。4.一种驴精液稀释液的配制方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)将配方中的葡萄糖、乳糖、棉籽糖、五水柠檬酸钠、柠檬酸钾、HEPES、EDTA溶于470ml无菌蒸馏水中，待完全溶解后定容至470ml，然后121℃20min高压灭菌；(2)将驴奶加热10-15min，冷却到45℃，待乳脂略凝固，10层灭菌纱布过滤，去除剩余的乳脂，得到脱脂驴奶；(3)待步骤(1)所配制的溶液降到22℃时，按照比例配制A溶液，将A溶液、BSA、卵黄和青链霉素溶于步骤(1)所配制的溶液中；(4)将配方量的步骤(2)中的脱脂驴奶与步骤(3)得到的溶液混合，得到驴精液稀释液；(5)将步骤(4)得到的精液稀释液分装至50ml离心管，封口冷藏备用；所述上述配制步骤均在无菌条件下进行；所述驴的精液稀释液，包括葡萄糖25g、乳糖1.5g、棉籽糖1.5g、五水柠檬酸钠0.3g、柠檬酸钾0.41g、HEPES4.76g、EDTA0.4g、卵黄20mL、青链霉素10000U、无菌蒸馏水470mL、脱脂驴奶500mL，添加BSA2.5g、A溶液10mL；所述A溶液由牛磺酸2g、L-赖氨酸盐酸盐2g、肌醇2g、维生素B60.31g、维生素B120.23g、柠檬酸0.3g、柠檬酸钠0.2g、柠檬黄0.1、纯净水10mL组成。5.根据权利要求4所述的驴精液稀释液的配制方法，其特征在于：步骤(4)中所述脱脂驴奶与步骤(3)得到的溶液混合前，需降至22℃。2CN110583630A说明书1/4页一种驴的精液稀释液及其制备方法发明领域[0001]本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种驴的精液稀释液及其制备方法。背景技术[0002]我国驴数量大、品种多，可耕地和乘骑，由于社会的发展，驴的役用功能逐渐退出历史舞台。驴肉的蛋白质含量比猪牛肉都高，是典型的高蛋白低脂肪食物，驴皮更是珍贵的食材和药材。但是驴的繁殖力比其他家畜低，导致全国驴的数量急剧下降，许多品种都处于保种状态。近几年驴的选育工作也相对滞后，驴品种质量严重退化。因此必须要充分认识驴种质资源保护的重要性、必要性和紧迫性。[0003]目前良种驴如乌头驴利用率低，优良的种公驴数量少，饲养成本高，自然繁殖率低是制约驴产业发展的重要瓶颈。近年来由于人们对身体保健以及阿胶类保健产品的重视，使得驴产业技术包括人工授精技术研究增多。驴人工授精技术的研究可以极大的提高优良种公驴的繁殖力，对驴产业的发展可产生极大的促进作用。[0004]目前驴人工授精的精液主要有鲜精、保鲜精和冻精。无论哪种形式的精液都需要精液稀释液。目前人工受精采用的精液稀释液主要有脱脂牛奶、INRA96改进版、自配版和发明版，但精液保存时间较短、精子存活率较低、精子活力低，导致初配成功率低。发明内容[