一种核酸释放剂以及核酸现场释放方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109306350A(43)申请公布日2019.02.05(21)申请号201811286832.9(22)申请日2018.10.31(71)申请人宁波奇天基因科技有限公司地址315000浙江省宁波市高新区院士路66号创业大厦2号楼458室(72)发明人周冬根应清界郭利川汤赛君王智宏(74)专利代理机构北京高沃律师事务所11569代理人刘奇(51)Int.Cl.C12N15/10(2006.01)C12Q1/6806(2018.01)权利要求书1页说明书6页附图2页(54)发明名称一种核酸释放剂以及核酸现场释放方法(57)摘要本发明提供了一种核酸释放剂，属于核酸提取技术领域，所述核酸释放剂为液体制剂，所述核酸释放剂中，非离子型表面活性剂的体积百分含量为0.2～2％；海藻糖的质量体积百分含量为0.01～2％；蛋白酶K的质量体积浓度为0.1～5mg/ml；氯化钾的浓度为50～200mmol/L；异硫氰酸胍的浓度为20～100mmol/L；牛血清白蛋白的浓度为0.5～10mmol/L；乙二胺四乙酸的浓度为1～10mmol/L；Tris-HCl的浓度为0.2～5mmol/L，所述核酸释放剂还包括余量的水。所述试剂可以免去核酸的回收步骤，避免核酸丢失或污染，应用所述试剂能够实现现场核酸的释放和检测。CN109306350ACN109306350A权利要求书1/1页1.一种核酸释放剂，其特征在于，所述核酸释放剂为液体制剂，所述核酸释放剂中，非离子型表面活性剂的体积百分含量为0.2～2％；海藻糖的质量体积百分含量为0.01～2％；蛋白酶K的质量体积浓度为0.1～5mg/ml；氯化钾的浓度为50～200mmol/L；异硫氰酸胍的浓度为20～100mmol/L；牛血清白蛋白的浓度为0.5～10mmol/L；乙二胺四乙酸的浓度为1～10mmol/L；Tris-HCl的浓度为0.2～5mmol/L；所述核酸释放剂还包括余量的无菌水。2.根据权利要求1所述的核酸释放剂，其特征在于，所述核酸释放剂中，所述非离子型表面活性剂的体积百分含量为0.5～1％；所述海藻糖的质量体积百分含量为0.02～0.5％；所述蛋白酶K的质量体积浓度为0.5～4.5mg/ml；所述氯化钾的浓度为55～100mmol/L；所述异硫氰酸胍的浓度为25～60mmol/L；所述牛血清白蛋白的浓度为1～9mmol/L；所述乙二胺四乙酸的浓度为2～6mmol/L；所述Tris-HCl的浓度为0.3～3mmol/L。3.根据权利要求1所述的核酸释放剂，其特征在于，所述核酸释放剂中，所述非离子型表面活性剂的体积百分含量为0.3～1.5％；所述海藻糖的质量体积百分含量为0.1～1％；所述蛋白酶K的质量体积浓度为0.6～4mg/ml；所述氯化钾的浓度为60～80mmol/L；所述异硫氰酸胍的浓度为40～60mmol/L；所述牛血清白蛋白的浓度为3～10mmol/L；所述乙二胺四乙酸的浓度为2～5mmol/L；所述Tris-HCl的浓度为0.5～4mmol/L。4.根据权利要求1所述的核酸释放剂，其特征在于，所述核酸释放剂中，所述非离子型表面活性剂的体积百分含量为0.5～1.4％；所述海藻糖的质量体积百分含量为0.01～0.3％；所述蛋白酶K的质量体积浓度为1～5mg/ml；所述氯化钾的浓度为100～150mmol/L；所述异硫氰酸胍的浓度为60～100mmol/L；所述牛血清白蛋白的浓度为5～10mmol/L；所述乙二胺四乙酸的浓度为2～6mmol/L；所述Tris-HCl的浓度为0.2～5mmol/L。5.根据权利要求1～4任意一项所述的核酸释放剂，其特征在于，所述Tris-HCl的pH值为7.2～7.7。6.根据权利要求1所述的核酸释放剂，其特征在于，所述的非离子型表面活性剂为CA-630类非离子表面活性剂。7.根据权利要求6所述的核酸释放剂，其特征在于，所述的非离子型表面活性剂为辛基苯基-聚乙烯二醇。8.利用权利要求1～7任意一项所述核酸释放剂进行核酸现场释放方法，包括以下步骤：1)将所述核酸释放剂与样本混合获得混合液；2)将步骤1)所述的混合液静置3～10min后，固液分离，收集固相组分获得目的核酸。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述核酸释放剂与样本的体积比为1：(1～3)。10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于，步骤2)所述的固液分离的方法为离心，所述离心的转速为1500～2500rpm，所述离心的时间为5～10s。2CN109306350A说明书1/6页一种核酸释放剂以及核酸现场释放方法技术领域[0001]本发明属于核酸提取技术领域，尤其涉及一种核酸释放剂以及核酸现场释放方法。