一种羊乳及羊乳粉中掺有牛乳成分的检测试剂盒及其检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109374879A(43)申请公布日2019.02.22(21)申请号201811086511.4(22)申请日2018.09.18(71)申请人北京纳百生物科技有限公司地址100176北京市大兴区北京经济技术开发区科创十四街11号院3号楼(72)发明人杨春江于在江吴迪孙海霞冯海玲秦丽丽张久龙郑云鹏(51)Int.Cl.G01N33/53(2006.01)G01N33/531(2006.01)权利要求书1页说明书6页序列表1页附图1页(54)发明名称一种羊乳及羊乳粉中掺有牛乳成分的检测试剂盒及其检测方法(57)摘要提供了一种检测羊乳及羊乳粉中掺有牛乳成分的快检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括以下成分：1）阴性质控品、2）阳性质控品、3）包被有多克隆抗体的酶标板、4）酶标多肽特异性单克隆抗体溶液、5）显色底物、6）终止液、7）洗涤液。利用该试剂盒，可在较短时间内检测出羊乳及羊乳粉中牛乳成分掺假，维护市场。针对当前乳品质量监管的复杂形势，具有非常广阔的市场前景，可在基层检测和政府监管中发挥重大作用。CN109374879ACN109374879A权利要求书1/1页1.一种检测羊乳及羊乳粉中掺有牛乳成分的快速检测试剂盒，其特征在于，试剂盒包括以下成分：1）阴性质控品；2）阳性质控品；3）包被有多克隆抗体的酶标板；4）酶标多肽特异性单克隆抗体溶液；5）显色底物；6）终止液；7）洗涤液；其中所述阴性质控为不含有牛乳成分的复原羊乳，含有0.03%的叠氮钠作为防腐剂；所述阳性质控为经过亲和纯化的牛酪蛋白标准品溶液，其中酪蛋白浓度为1mg/mL，稀释液为0.01mol/LpH7.2的磷酸盐缓冲液，含有0.05%的叠氮钠作为防腐剂；所述包被有多克隆抗体的酶标板，其包被的多克隆抗体为有序列为SEQIDNo.1所示的多肽与载体蛋白偶联后免疫新西兰兔制备的；所述酶标多肽特异性单克隆抗体溶液为利用如序列SEQIDNo.1所列的多肽与载体蛋白偶联作为免疫原制备的单克隆抗体，其能特异性地与牛酪蛋白反应，而与羊酪蛋白反应较小（交叉反应<1%）；所述显色底物为单组份TMB显色底物等；所述终止液为0.5~2M硫酸溶液；所述浓缩洗液为添加有吐温-20的PBS溶液。2.根据权利要求1所述的检测羊乳及羊乳粉中掺有牛乳成分的快速检测试剂盒，其特征在于所述阳性质控中经过亲和纯化的牛酪蛋白标准品是将采购的牛酪蛋白标准品用上述SEQIDNo.1所列的多肽与载体蛋白偶联作为免疫原制备的单克隆抗体亲和纯化的，去除其中杂质和与所述单克隆抗体不发生反应的成分。3.根据权利要求1所述的检测羊乳及羊乳粉中掺有牛乳成分的快速检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒组成中还可包括经亲和纯化的牛酪蛋白系列标准品，标准品的浓度可为0、0.1、0.3、0.9、2.7、8.1mg/mL，通过酶标仪测定吸光度值，绘制试剂盒反应的标准曲线，对未知样本定量检测。4.根据权利要求1所述的检测羊乳及羊乳粉中掺有牛乳成分的快速检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒可用于检测羊乳及羊乳粉中牛乳掺假。5.根据权利要求1所述的检测羊乳及羊乳粉中掺有牛乳成分的快速检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒检测方法为：(1)将待测样本用0.01MPBS（pH7.2）按照一定比例稀释备用；(2)将准备好的样品按照检测试剂盒的操作方法进行操作；(3)利用分析软件分析数据，将检测样本与质控品对照；(4)根据数据分析结果判定样本中是否添加有牛乳成分。2CN109374879A说明书1/6页一种羊乳及羊乳粉中掺有牛乳成分的检测试剂盒及其检测方法技术领域[0001]本发明属于乳品质量检测领域，涉及一种羊乳及羊乳粉中掺有牛乳成分的检测试剂盒及其检测方法。背景技术[0002]乳及其制品已经成为重要动物源性食品。特别是近些年来，随着人们生活水平的提高和我国奶业的迅速发展，生鲜乳作为普通食品已被广泛接受。羊乳作为重要乳品，其蛋白质和维生素含量高，脂肪颗粒小，与牛乳相比较更容易吸收，市售价格也是牛乳的数倍。陕西、山东等地是我国羊奶及羊奶粉的重要产区，产品已经出口至欧盟。由于羊奶价格高、产量低，生产者为了获取更多经济利益，往往在其中掺入部分牛乳，以提高经济效益。牛乳掺入后，虽没有带来风险因子，但其降低了羊奶的营养水平及最后羊奶粉产出的质量，就有可能造成易感人群过敏反应，以及产生国际贸易争端和扰乱市场秩序。因此非常有必要建立快速方便的检测方法，对羊乳中掺有牛乳成分检测，以确保优质羊乳及羊乳粉的品质，维护市场秩序。[0003]羊乳与牛乳均为天然产品，成分近似，主要区别在于部分营养指标含量不同，以及部分蛋白质成分差异，这也是目前区分牛羊乳成分的重要参数。如西班牙ZEULab公司开发的生鲜羊乳