一种复合乳酸菌菌剂及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108085282A(43)申请公布日2018.05.29(21)申请号201810015412.0C12R1/23(2006.01)(22)申请日2018.01.08(71)申请人金华银河生物科技有限公司地址321000浙江省金华市金华山旅游经济区罗店镇工业区(72)发明人高鹏飞贺润晶陈升富(74)专利代理机构北京弘权知识产权代理事务所(普通合伙)11363代理人逯长明许伟群(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)A01G18/00(2018.01)C05F11/02(2006.01)C05F11/08(2006.01)C12R1/25(2006.01)权利要求书2页说明书7页附图1页(54)发明名称一种复合乳酸菌菌剂及其制备方法和应用(57)摘要本申请公开了一种复合乳酸菌菌剂，包括所述复合乳酸菌菌剂的菌肥，所述乳酸菌菌剂以及菌肥用于缩短蘑菇出菇时间以及提高蘑菇产量的用途。所述复合乳酸菌菌剂包括植物乳杆菌P-8，嗜酸乳杆菌KT-La9以及植物乳杆菌KT-Lp9，将所述复合乳酸菌菌剂或者菌肥掺拌于用于发菇的培养基中，即使双孢菇的出菇时间缩短4天，产量提高10％以上。本申请还提供了一种制备所述复合乳酸菌菌剂的方法，所述方法简便易行，制得的复合乳酸菌菌剂中活菌数高。CN108085282ACN108085282A权利要求书1/2页1.一种复合乳酸菌菌剂，其特征在于，所述复合乳酸菌菌剂包括：植物乳杆菌P-8，嗜酸乳杆菌KT-La9以及植物乳杆菌KT-Lp9，其中，植物乳杆菌P-8的保藏编号为CGMCCNo.6312；嗜酸乳杆菌KT-La9的保藏编号为CGMCCNo.12949；植物乳杆菌KT-Lp9的保藏编号为CGMCCNo.12950。2.根据权利要求1所述的复合乳酸菌菌剂，其特征在于，所述复合乳酸菌菌剂由包括以下步骤的方法制备：步骤1，将植物乳杆菌P-8，嗜酸乳杆菌KT-La9以及植物乳杆菌KT-Lp9种子液混合，制得复合菌种子液；步骤2，将步骤1制备的复合菌种子液接种于MRS培养液中，加入生长因子，培养；步骤3，调节体系中活菌量为2.0×109CFU/ml～4.0×109CFU/ml，pH为5.0～7.0。3.根据权利要求1或2所述的复合乳酸菌菌剂，其特征在于，所述植物乳杆菌P-8，嗜酸乳杆菌KT-La9以及植物乳杆菌KT-Lp9种子液根据包括以下步骤的方法制备：步骤1-1，将植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的冷冻保藏菌种分别接种于MRS液体培养基中，在37±1℃条件下培养20～35小时，按此方式活化三代后分别用无菌生理盐水离心洗涤3次，获得菌体沉淀物；步骤1-2，在各菌体沉淀物上分别加入5wt％～15wt％灭菌脱脂乳液后，将三种乳酸菌体系中菌体的浓度分别调整为1×108～1×109CFU/mL。4.根据权利要求1至3任一项所述的复合乳酸菌菌剂，其特征在于，步骤1-1中，所述植物乳杆菌P-8，嗜酸乳杆菌KT-La9以及植物乳杆菌KT-Lp9种子液按照植物乳杆菌P-8中活菌数:嗜酸乳杆菌KT-La9中活菌数:植物乳杆菌KT-Lp9中活菌数＝(2-4):(0.5-1):1进行配合，优选为2:1:1。5.根据权利要求1至4任一项所述的复合乳酸菌菌剂，其特征在于，步骤2中，所述复合菌种子液在MRS液体培养基中的接种比例为2％～15％(V/V)，优选为4％～10％(V/V)。6.根据权利要求1至5任一项所述的复合乳酸菌菌剂，其特征在于，步骤2中，将接种有复合菌种子液的体系置于37±1℃条件下培养12小时～24小时。7.一种制备权利要求1所述乳酸菌菌剂的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤2-1，将植物乳杆菌P-8，嗜酸乳杆菌KT-La9以及植物乳杆菌KT-Lp9种子液混合，制得复合菌种子液；步骤2-2，将步骤1制备的复合菌种子液接种于MRS培养液中，加入生长因子，培养；步骤2-3，调节体系中活菌量为2.0×109CFU/ml～4.0×109CFU/ml，pH为5.0～7.0。8.权利要求1至6任一项所述乳酸菌菌剂用于提高蘑菇产量，缩短出菇时间的用途，尤其是用于提高双孢菇产量，缩短出菇时间的用途。9.一种乳酸菌菌肥，其特征在于，所述菌肥包括以下重量配比的组分：复合乳酸菌菌剂0.5～1重量份基质100～200重量份，其中，基于1kg计为1重量份，所述复合乳酸菌菌剂为权利要求1至6任一项所述乳酸菌菌剂，所述基质为腐植酸类物质，优选为黄腐酸钾。10.权利要求9所述乳酸菌菌肥用于提高蘑菇产量，缩短出菇时间的用途，尤其是用于2CN108085282A权利要求书2/2页提高双孢菇产量，缩短双孢菇出菇时间的用途。3CN1