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北京协和医院检验科寿玮龄理论基础出血性疾病的实验室诊断分析前质量控制理论基础42纤溶系统血管壁血小板血液流变学凝血系统3抗凝系统1理论基础出血性疾病的实验室诊断分析前质量控制出血性疾病的实验室诊断病史体征•出血史•出血部位•血栓史•皮肤/黏膜•诱因•肌肉•手术史•关节•药物史•内脏•家族史•特点•相关病史•并发症实验室检查•血栓与出血性疾病的诊断•抗凝治疗/溶栓治疗监测•DIC诊断与分期•术前筛查等出血性疾病的实验室诊断一期止血•血管壁•血小板一二凝血系统•PT/APTT/Fbg/TT•凝血因子及抑制物纤溶系统•纠正试验•DDimer三•FDP四抗凝系统•PC/PS/AT/APCR出血性疾病的实验室诊断一、血管壁《血栓与止血基础理论与临床》第三版出血性疾病的实验室诊断二、血小板出血性疾病的实验室诊断(一)血小板计数血小板计数假性降低•标本采集•抗凝剂(EDTA)诱导血小板聚集•大血小板•血小板卫星现象出血性疾病的实验室诊断•抗凝剂(EDTA)诱导血小板聚集患者血液中存在自身抗体(主要为IgG)时,抗凝剂EDTA能与血液中Ca2+结合形成螯合物,使血小板表面GPIIb-IIIa等隐蔽抗原暴露,与自身抗体结合发生PLT聚集。改用枸橼酸钠抗凝采血管抽取患者血液重新测定。PLT数/L=枸橼酸钠抗凝血PLT数/L×1.10。出血性疾病的实验室诊断•大血小板•血小板卫星现象出血性疾病的实验室诊断血小板计数假性增高•红细胞碎片干扰•小红细胞干扰•冷球蛋白出血性疾病的实验室诊断•红细胞碎片干扰/小红细胞出血性疾病的实验室诊断•冷球蛋白数值/图形异常报警à复检37°预温后的检测结果流式细胞仪检测结果为5×109/L临床检验杂志.2014,32(10):799-800出血性疾病的实验室诊断(二)血小板聚集试验(光学法/电阻抗法)PRPPPP出血性疾病的实验室诊断出血性疾病的实验室诊断等一下!备注信息出血性疾病的实验室诊断标记免疫分析与临床,2012,19(2):94-96.出血性疾病的实验室诊断一期止血•血管壁•血小板一二凝血系统•PT/APTT/Fbg/TT•凝血因子及抑制物纤溶系统•纠正试验•DDimer三•FDP四抗凝系统•PC/PS/AT/APCR出血性疾病的实验室诊断凝固法—光学法出血性疾病的实验室诊断凝固法—磁珠法检测线圈发射线圈出血性疾病的实验室诊断(一)凝血酶原时间(Prothrombintime,PT)检测原理:外源性途径+共同途径HMWKPKFVIIFXIIFXIFIXFVIIIFXFVFIIFI出血性疾病的实验室诊断•PT-INR系统校准(1)计算MNPT和ISI值(2)不同试剂和仪器作INR的定标曲线,直接得到INR预先ISI赋值的促凝血酶原PT(sec)活酶试剂,LocalISI校准。4030=1/ISIPTISI20INR=MNPTMNPT101,02,03,04,05,0INR用户预先测定MNPT给每个批号试剂校准INR美国临床实验室标准化协会(CLSI)出血性疾病的实验室诊断(二)活化部分凝血活酶时间(APTT)检测原理:内源性途径+共同途径HMWKPK硅藻FVII土等FXIIFXIFIXFVIIIFXFVFIIFI出血性疾病的实验室诊断Ø各种APTT试剂对凝血因子、肝素、LA的反应差异性大激活剂对肝素敏感性对因子敏感性对狼疮抗凝物敏感性白陶土+++++++ACTINACTINFSACTINFSLPathromtinSL硅藻土++++++++磷脂兔脑粉大豆粉兔脑粉和大豆粉植物(大豆粉)鞣华酸++++++激活剂鞣花酸鞣花酸鞣花酸微粒化二氧化硅用于筛选+++++++++对肝素敏感性++++++++++对因子敏感性++++++++++参考范围24.0-36.8sec24.8-36.2sec24.2-32.2sec24.2–32.2sec对狼疮样抗凝物+++++++++主要用途筛查监测肝素治疗检测狼疮抗凝物常规用,需混匀出血性疾病的实验室诊断(三)纤维蛋白原(Fbg)出血性疾病的实验室诊断(四)凝血酶时间(Thrombintime,TT)出血性疾病的实验室诊断(五)纠正试验(mixingstudy)出血性疾病的实验室诊断纠正试验判断标准?出血性疾病的实验室诊断纠正试验判断标准?•实验室应建立基于自己不同仪器/试剂(筛选试验、凝血因子/LA)和NPP的localCut-off值出血性疾病的实验室诊断********************************出血性疾病的实验室诊断******************************•NPP要求:至少20例表观健康人混合血浆•1:1MIX(即刻)10分钟内检测•1:4MIX出血性疾病的实验诊断(六)凝血因子•病人血浆和乏因子血浆按照一定比例混合一期法(one-sta