高蛋白、高DHA裂殖壶菌诱变株及其作为饲料添加剂的应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114437947A(43)申请公布日2022.05.06(21)申请号202210365338.1C12P7/6434(2022.01)(22)申请日2022.04.08A23K10/16(2016.01)A23L31/00(2016.01)(83)生物保藏信息A23L33/00(2016.01)CGMCCNo.400822022.02.18C12R1/645(2006.01)(71)申请人中国农业科学院北京畜牧兽医研究所地址100193北京市海淀区圆明园西路2号(72)发明人马露卜登攀和俊豪许建初(74)专利代理机构北京思元知识产权代理事务所(普通合伙)11598专利代理师余光军(51)Int.Cl.C12N1/14(2006.01)C12N13/00(2006.01)C12N15/01(2006.01)权利要求书1页说明书15页附图1页(54)发明名称高蛋白、高DHA裂殖壶菌诱变株及其作为饲料添加剂的应用(57)摘要本发明公开了高蛋白、高DHA裂殖壶菌诱变株及其作为饲料添加剂的应用。本发明提供了一株高蛋白质含量的裂殖壶藻诱变株B3，其蛋白质含量达到45.37%，DHA产量达到16.21g/L，其微生物保藏编号是：CGMCCNo.40082。本发明还公开了一种高DHA裂殖壶菌诱变株的筛选方法，包括采用常压室温等离子体（ARTP）诱变裂殖壶藻细胞，将诱变株进行平板初步筛选和摇瓶复筛，其中，将诱变株进行平板初步筛选时，平板是丙二酸和2,2’‑联吡啶的复合筛选平板。采用本发明建立的筛选方法所筛选得到的裂殖壶菌诱变株的DHA产量及含量较原始藻株显著升高，说明本发明建立的筛选方法可以实现高DHA藻株的定向筛选。CN114437947ACN114437947A权利要求书1/1页1.一株高蛋白、高DHA的裂殖壶菌（Schizochytriumsp.）诱变株，其特征在于，其微生物保藏编号是：CGMCCNo.40082。2.权利要求1所述的裂殖壶菌诱变株作为畜禽饲料添加剂的用途。3.权利要求1所述的裂殖壶菌诱变株在提取DHA中的用途。4.权利要求1所述的裂殖壶菌诱变株在制备富含DHA保健品中的用途。5.权利要求1所述的裂殖壶菌诱变株在制备富含DHA食品中的用途。6.权利要求1所述的裂殖壶菌诱变株在制备富含蛋白质保健品中的用途。7.权利要求1所述的裂殖壶菌诱变株在制备富含蛋白质食品中的用途。2CN114437947A说明书1/15页高蛋白、高DHA裂殖壶菌诱变株及其作为饲料添加剂的应用技术领域[0001]本发明涉及裂殖壶菌诱变株以及筛选方法，尤其涉及一株高蛋白以及高DHA含量的裂殖壶菌诱变株及其应用，本发明进一步涉及富DHA殖壶菌诱变株的筛选方法，属于裂殖壶菌诱变株及其应用领域。背景技术[0002]裂殖壶菌(Schizochytriumsp.)，又称裂壶藻，是一种海洋真菌，属于真菌中的卵囊菌纲、水霉目、脆霉壶菌科、裂殖壶菌属。该菌种由于DHA含量高、几乎不含EPA、质量稳定、脂肪酸组成易被人体利用、不含鱼腥味、不受重金属污染等优点，拥有替代鱼油DHA的绝对优势。其中裂殖壶菌是由于其生长迅速、DHA(二十二碳六烯酸，C22:6，ω‑3)含量高、易于扩大培养等优势成为目前发酵法生产DHA研究最多的一种海洋真菌。[0003]裂殖壶菌营养丰富，不仅含有大量的DHA，还含有蛋白质，脂肪，糖类等常规营养物质，可作为饲料添加剂直接在饲料中添加，或替代部分蛋白源和油脂在鱼类、虾类等水生动物以及蛋鸡中广泛应用，具有提高存活率，提高产品DHA含量，增强体色，促进脂肪代谢，提高非特异性免疫能力等功效，在动物生产中具有非常好的应用前景。[0004]裂殖壶菌作为饲料添加剂使用，不仅要考虑到DHA含量的高低，作为动物营养的最重要成分之一的蛋白质，其含量的高低也应是重要的考虑因素。[0005]现有技术中对于裂殖壶菌的诱变均是注重于获得DHA产量提升的突变株，没有注重考虑获得蛋白质含量显著提升的诱变株，导致现有的裂殖壶菌及其突变株均存在蛋白质含量偏低的缺陷，在作为饲料添加剂使用时会大大降低其营养价值。发明内容[0006]本发明的目的之一是提供一株高蛋白质含量、高DHA产量的裂殖壶菌（Schizochytriumsp.）诱变株；本发明的目的之二是提供一种高蛋白质含量、高DHA产量的裂殖壶菌诱变株的筛选方法；本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：本发明首先提供了一株高蛋白质含量、高DHA产量的裂殖壶菌（Schizochytriumsp.）诱变株B3，其蛋白质含量达到45.37%，DHA产量达到16.21g/L。[0007]本发明将高蛋白质含量和高DHA产量的裂殖壶菌诱变株B3提交到专利认可的机构进行保藏，其微