一株塔宾曲霉及其制剂和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114672423A(43)申请公布日2022.06.28(21)申请号202210441707.0(51)Int.Cl.(22)申请日2022.04.26C12N1/14(2006.01)A01G13/00(2006.01)(66)本国优先权数据A01N63/34(2020.01)202210373198.22022.04.11CNA01P5/00(2006.01)(83)生物保藏信息C12R1/66(2006.01)CCTCCNo：M20223942022.04.08(71)申请人山东滇鲁生物科技有限公司地址273400山东省临沂市费县经济开发区许由路与兴达路交汇双创产业园4号厂房(72)发明人莫明和王瑞宾杨忠艳刘鲁民(74)专利代理机构山东济南齐鲁科技专利事务所有限公司37108专利代理师赵明媚权利要求书1页说明书6页(54)发明名称一株塔宾曲霉及其制剂和应用(57)摘要本发明公开了一株塔宾曲霉及其制剂和应用，属于微生物农药技术领域。该菌为塔宾曲霉（Aspergillustubingensis）WF01菌株，WF01菌株已于2022年04月08日保藏于中国典型培养物保藏中心；湖北省武汉市洪山区八一路武汉大学；保藏号：CCTCCM：2022394。本发明的微生物菌体及其代谢产物，能与农药常规吸附载体混合制成WF01菌剂，利用WF01菌株制备的菌剂，能高效防治根结线虫病，具有使用成本低、防效高、无残留等特点。CN114672423ACN114672423A权利要求书1/1页1.一株塔宾曲霉，其特征在于，该菌为塔宾曲霉WF01菌株，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号：CCTCCM：2022394，保藏日期：2022年04月08日。2.一种塔宾曲霉菌剂的应用，其特征在于，该菌剂可用于防治根结线虫病。3.一种含有权利要求1所述的塔宾曲霉的菌剂，其特征在于，该菌剂的制备方法包括如下步骤：1）WF01菌株试管斜面种子培养：将WF01菌株接种到常规的PDA培养基斜面上，28℃下培养4天后获得斜面种子；2）WF01菌株液体种子培养：将斜面种子接种到装有PDB培养基的三角瓶中，28℃，150rpm条件下摇床培养3天获得液体种子；3）WF01菌株发酵罐大量培养：将液体种子按体积比为5％的比例接入发酵罐中的PDB培养基中，在500‑1000升发酵罐中的培养条件控制在：温度为25‑28℃，搅拌速度为150‑180rpm，发酵时间为72‑96小时；4）WF01菌株的菌剂制备：经发酵罐培养获得的菌体及其代谢物与玉米淀粉混合后干燥至水分含量小于5%，粉碎得菌剂，其中，WF01菌株的分子孢子在菌剂中的活菌数在1×1010个/克以上。4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于，所述步骤4）的干燥温度为50℃‑65℃。5.根据权利要求3~4任一项所述的菌剂在防治根结线虫病的菌剂中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述根结线虫病包括番茄、黄瓜、烟草的根结线虫病。2CN114672423A说明书1/6页一株塔宾曲霉及其制剂和应用[0001]技术领域：本发明属于微生物农药技术领域，具体涉及一株塔宾曲霉及其制剂和应用。[0002]背景技术：根结线虫在农业上危害极其严重。植物寄生线虫病每年在全球作物上造成的产量损失约8.8%–14.6%，经济损失约1000–1570亿美元(非专利文献1)；其在农林上的危害已成为仅次于真菌病害的第二大类病害(非专利文献2)。在植物寄生线虫中，根结线虫（root‑knotnematodes,RKNs）是最重要的类群，种类80余种，能侵染1000多种植物，危害面积最广、造成的损失最为严重(非专利文献3）。根结线虫属（Meloidogyne）中危害最重的种类4种：南方根结线虫（M.incognita)、花生根结线虫（M.arenaria)、北方根结线虫（M.hapla)和爪哇根结线虫(M.javanica)。[0003]长期以来，对作物病原线虫的防治主要依靠化学农药，但由于化学杀线虫剂高毒性，造成农产品和生态污染问题非常突出。根据保护臭氧层的“蒙特利尔议定书”国际条约，发达国家已于2005年全面禁用使用最广泛的化学杀线虫剂溴甲烷，发展中国家将于2015年全面禁用。目前，灭线磷、溴甲烷、涕灭威等化学杀线虫剂在国内几乎都被禁用或限制使用。由此导致可选用的化学杀线虫剂种类更少，加剧了线虫防治的困难。[0004]线虫生防微生物可通过捕食、寄生、产毒等方式致死线虫，是自然界中控制线虫种群的重要微生物类群（非专利文献4）。继利用捕食线虫真菌（Arthrobotrysrobusta）开发的全球首个商品化线虫生防制剂（Royal300）问世后（非专利文献5），利用淡紫紫孢菌（Pu