一种日香桂抗盐相关基因及其编码蛋白和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114835786A(43)申请公布日2022.08.02(21)申请号202210388416.XA01H5/00(2018.01)(22)申请日2022.04.13A01H6/82(2018.01)(71)申请人南京林业大学地址210037江苏省南京市玄武区龙蟠路159号申请人大千生态环境集团股份有限公司(72)发明人王良桂曾贵敏朱美林刘芳伊李晓芹杨秀莲银征何方(74)专利代理机构南京智转慧移知识产权代理有限公司32649专利代理师田沛沛(51)Int.Cl.C07K14/415(2006.01)C12N15/29(2006.01)C12N15/84(2006.01)权利要求书1页说明书5页序列表9页附图4页(54)发明名称一种日香桂抗盐相关基因及其编码蛋白和应用(57)摘要本发明公开了一种日香桂抗盐相关基因及其编码蛋白和应用，属于植物分子生物学领域。本发明基于植物基因克隆技术从日香桂中分离、克隆出的三个Trihelix转录因子，分别命名为OfGT3、OfGT42和OfGT46基因，其核苷酸序列依次如SEQIDNO.1‑3所示，对应的氨基酸序列依次如SEQIDNO.4‑6所示，在此基础上构建了超表达载体并利用农杆菌花絮浸泡法将上述基因导入本氏烟草中，获得转基因植株，通过对250mMNaCl处理前后的膜脂过氧化指标分析，结果发现非转基因的植株的耐盐性明显低于转基因的植株，表明上述基因是潜在的耐盐性指示基因。CN114835786ACN114835786A权利要求书1/1页1.一种日香桂抗盐相关基因，所述基因为OfGT3、OfGT42、OfGT46中的一种，其核苷酸序列依次如SEQIDNO.1‑3所示。2.权利要求1所述的日香桂抗盐相关基因的表达蛋白，所述基因为OfGT3、OfGT42、OfGT46中的一种，其表达蛋白的氨基酸序列依次如SEQIDNO.4‑6所示。3.含有权利要求1所述的日香桂抗盐相关基因的重组表达载体或重组菌。4.权利要求1所述的日香桂抗盐相关基因在改良植物对盐的耐受性的遗传育种中的应用，其特征在于，所述植物为本氏烟草或日香桂。5.权利要求1所述的日香桂抗盐相关基因在提高植物对环境盐胁迫抗性中的应用，其特征在于，所述植物为本氏烟草或日香桂。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，构建所述日香桂抗盐相关基因的过表达载体，并将其通过稳定遗传转化的方式转化到植物中，筛选获得盐胁迫抗性提高的植物。2CN114835786A说明书1/5页一种日香桂抗盐相关基因及其编码蛋白和应用技术领域[0001]本发明属于植物分子生物学领域，具体涉及一种日香桂抗盐相关基因及其编码蛋白和应用。背景技术[0002]日香桂(Osmanthusfragranscv.′rixianggui′)，是桂花的一个园艺品种，因具有不断开花，香气浓郁的特点而得名。集绿化、美化、香化于一体的观赏与实用兼备的优良园林树种，观赏与经济价值较高，然而对盐胁迫敏感，在高纬度地区的栽培与应用受到限制。因此，在桂花中发掘抗盐基因，对于桂花抗盐性的提升具有重要的意义。Trihelix转录因子是近年来被广泛关注的一类转录因子，在调节植物胁迫响应和发育过程中发挥重要作用，但桂花中的Trihelix转录因子尚未被探索。发明内容[0003]针对现有技术存在的上述问题，本发明所要解决的第一技术问题在于提供一种日香桂抗盐相关基因；本发明所要解决的第二技术问题在于提供日香桂抗盐相关基因的表达蛋白；本发明所要解决的第三技术问题在于提供日香桂抗盐相关基因在植物抗盐遗传改良中的应用。[0004]为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案如下：[0005]一种日香桂抗盐相关基因，所述基因为OfGT3、OfGT42、OfGT46中的一种，其核苷酸序列依次如SEQIDNO.1‑3所示，其表达蛋白的氨基酸序列依次如SEQIDNO.4‑6所示。[0006]利用ExPASy软件分析，发现OfGT3、OfGr42、OfGT46基因长度分别为1587bp、1590bp、1458bp，分别编码528、530、486个氨基酸蛋白，蛋白的分子量分别为60.06kDa、60.23kDa、56.6kDa，等电点分别为5.61、5.58、7.16。[0007]含有所述的日香桂抗盐相关基因的重组表达载体或重组菌。[0008]所使用的载体为Super1300载体，将上述基因序列插入到Super1300载体的多克隆位点SmaI和SpeI之间，改造得到相应的重组表达载体。[0009]所述的日香桂抗盐相关基因在改良植物对盐的耐受性的遗传育种中的应用，所述植物为本氏烟草或日香桂。[0010]所述的日香桂抗盐相关基因在提高植物对环境盐胁迫抗性中的应用，所述植物为本