一种日香桂抗盐相关OfNAC59基因及其编码蛋白和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114891078A(43)申请公布日2022.08.12(21)申请号202210386964.9C12N1/21(2006.01)(22)申请日2022.04.13A01H5/00(2018.01)A01H5/10(2018.01)(71)申请人南京林业大学A01H6/20(2018.01)地址210037江苏省南京市玄武区龙蟠路159号申请人大千生态环境集团股份有限公司(72)发明人王良桂潘多朱美林吴豪刘芳伊岳远征李晓芹鲍雨(74)专利代理机构南京智转慧移知识产权代理有限公司32649专利代理师田沛沛(51)Int.Cl.C07K14/415(2006.01)C12N15/29(2006.01)C12N15/84(2006.01)权利要求书1页说明书4页序列表2页附图3页(54)发明名称一种日香桂抗盐相关OfNAC59基因及其编码蛋白和应用(57)摘要本发明公开了一种日香桂抗盐相关OfNAC59基因及其编码蛋白和应用，属于植物分子生物学领域。本发明基于植物基因克隆技术从日香桂中分离、克隆出的一个NAC转录因子，命名为OfNAC59基因，其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，对应的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示，在此基础上构建了超表达载体pBI121‑OfNAC59并利用农杆菌花絮浸泡法将OfNAC59基因导入拟南芥中，获得转OfNAC59基因植株，通过在250mMNaCl的MS培养基上播种后表型分析，表明非转OfNAC59基因的植株的抗盐性明显低于转OfNAC59基因的植株，表明OfNAC59基因是一个潜在的抗盐育种基因。CN114891078ACN114891078A权利要求书1/1页1.一种日香桂抗盐相关OfNAC59基因，其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.权利要求1所述的日香桂抗盐相关OfNAC59基因的表达蛋白，其氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。3.含有权利要求1所述的日香桂抗盐相关OfNAC59基因的重组表达载体或重组菌。4.权利要求1所述的日香桂抗盐相关OfNAC59基因在改良植物对盐的耐受性的遗传育种中的应用，其特征在于，所述植物为拟南芥或日香桂。5.权利要求1所述的日香桂抗盐相关OfNAC59基因在提高植物对环境盐胁迫抗性中的应用，其特征在于，所述植物为拟南芥或日香桂。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，构建所述日香桂抗盐相关OfNAC59基因的过表达载体，并将其通过稳定遗传转化的方式转化到植物中，筛选获得盐胁迫抗性增强的植物。2CN114891078A说明书1/4页一种日香桂抗盐相关OfNAC59基因及其编码蛋白和应用技术领域[0001]本发明属于植物分子生物学领域，具体涉及一种从日香桂中分离、克隆得到的转录调控因子OfNAC59，并涉及该基因在植物抗盐遗传改良中的应用，将该基因在拟南芥中超表达，获得的转基因植株抗盐性明显提高。背景技术[0002]桂花(Osmanthusfragrans)，是我国长江以南地区园林绿化中广泛应用的一种常绿木本树种，观赏与经济价值较高，然而对盐胁迫敏感，在高纬度地区的栽培与应用受到限制。因此，在桂花中发掘抗盐基因，对于桂花抗盐性的提升具有重要的意义。现有研究表明，NAC(NAM，ATAFandCUC)转录因子与植物的胁迫胁迫应答有关，但桂花中的NAC转录因子尚未被探索。发明内容[0003]针对现有技术存在的上述问题，本发明所要解决的第一技术问题在于提供一种日香桂抗盐相关OfNAC59基因；本发明所要解决的第二技术问题在于提供日香桂抗盐相关OfNAC59基因的表达蛋白；本发明所要解决的第三技术问题在于提供OfNAC59基因在植物抗盐遗传改良中的应用。[0004]为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案如下：[0005]一种日香桂抗盐相关OfNAC59基因，其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示，其对应的氨基酸序列为SEQIDNO.2所示。[0006]利用ExPASy软件分析，发现该基因长度为1192bp，编码263个氨基酸蛋白，该蛋白的分子量为30.27kDa，等电点为8.45。[0007]含有所述的日香桂抗盐相关OfNAC59基因的重组表达载体或重组菌。[0008]所述重组表达载体为pBI121‑OfNAC59，是将OfNAC59基因序列插入到pBI121载体的多克隆位点XbaI和BamH之间改造得到。[0009]所述的日香桂抗盐相关OfNAC59基因在改良植物对盐的耐受性的遗传育种中的应用，所述植物为拟南芥或日香桂。[0010]所述的日香桂抗盐相关OfNAC59基因在提高植物对环境盐胁迫抗性中的应用，所述植物为拟南芥或日香桂。[0011]进一步的，构建所述日香桂抗盐相关OfNAC59的