美洲大蠊PRP蛋白表达抑制剂及其编码基因与应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114853861A(43)申请公布日2022.08.05(21)申请号202210355750.5C12N15/87(2006.01)(22)申请日2022.04.06A01K67/033(2006.01)A01N47/44(2006.01)(71)申请人岭南现代农业科学与技术广东省实A01N37/46(2006.01)验室A01P7/04(2006.01)地址510631广东省广州市天河区五山路483号教学一区自编15号楼101房申请人华南师范大学(72)发明人都二霞李昭昕李胜(74)专利代理机构广州嘉权专利商标事务所有限公司44205专利代理师肖云(51)Int.Cl.C07K14/435(2006.01)C12N15/12(2006.01)C12N15/113(2010.01)权利要求书1页说明书5页序列表4页附图1页(54)发明名称美洲大蠊PRP蛋白表达抑制剂及其编码基因与应用(57)摘要本发明公开了美洲大蠊PRP蛋白表达抑制剂及其编码基因与应用。本发明从美洲大蠊中克隆得到美洲大蠊卵鞘保水性相关的基因PRP基因，通过设计合成了靶向沉默PRP基因的dsRNA序列，将该dsRNA导入美洲大蠊体内，能够显著抑制PRP基因的表达，进而影响保水率和孵化率，从而实现防治害虫的最终目的，为害虫防治提供了新的分子靶标。CN114853861ACN114853861A权利要求书1/1页1.蛋白质，是如下a)或b)或c)或d)的蛋白质：a)氨基酸序列如SEQIDNO.2所示的蛋白质；b)氨基酸序列如SEQIDNO.2所示的蛋白质的N端和/或C端连接标签得到的融合蛋白质；c)将SEQIDNO.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白质；d)与SEQIDNO.2所示的氨基酸序列具有75％或75％以上的同源性且具有相同功能的蛋白质。2.与权利要求1所述的蛋白质相关的生物材料，为下述1)至8)中的任一种：1)编码如权利要求1所述的蛋白质的核酸分子；2)含有1)所述核酸分子的表达盒；3)含有1)所述核酸分子的重组载体；4)含有2)所述表达盒的重组载体；5)含有1)所述核酸分子的重组微生物；6)含有2)所述表达盒的重组微生物；7)含有3)所述重组载体的重组微生物；8)含有4)所述重组载体的重组微生物。3.根据权利要求2所述的生物材料，其特征在于，所述核酸分子的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。4.权利要求1所述的蛋白质或权利要求2或3所述的生物材料在如下a1)或a2)或a3)中任一种中的应用：a1)降低美洲大蠊卵鞘保水性；a2)制备用于降低美洲大蠊卵的孵化率的产品中的应用；a3)制备防治美洲大蠊的产品。5.一种PRP抑制剂，其特征在于，PRP抑制剂用于抑制权利要求1所述的蛋白质的编码基因表达、或降解权利要求1所述的蛋白质、或降低权利要求1所述的蛋白质表达水平。6.根据权利要求5所述的PRP抑制剂，其特征在于，所述PRP抑制剂为靶向权利要求1所述蛋白质的dsRNA、miRNA、核酶或shRNA。7.一种dsRNA，其特征在于，所述dsRNA为由如SEQIDNO.5所示的核苷酸序列作为正义链及由与SEQIDNO.5所示的核苷酸序列反向互补的核苷酸序列作为反义链组成的双链RNA。8.权利要求5或6所述PRP抑制剂、权利要求7所述的dsRNA在制备防治美洲大蠊的产品中的应用。9.权利要求5或6所述PRP抑制剂、权利要求7所述的dsRNA在制备降低美洲大蠊卵鞘保水性的产品或制备用于降低美洲大蠊卵的孵化率的产品中的应用。10.一种防治美洲大蠊的方法，其特征在于，包括以下步骤：将权利要求5或6所述PRP抑制剂、权利要求7所述的dsRNA导入到美洲大蠊体内。2CN114853861A说明书1/5页美洲大蠊PRP蛋白表达抑制剂及其编码基因与应用技术领域[0001]本发明属于基因工程领域，具体涉及美洲大蠊PRP蛋白表达抑制剂及其编码基因与应用。背景技术[0002]根据化石证据显示，原始蟑螂约在4亿年前的志留纪出现于地球上，是这个星球上最古老的昆虫之一。亿万年来美洲大蠊的外貌和形态大小并没发生很大，它们有着棕褐色的体色，扁平的身体和头部，又长又细的触角以及发达的附肢，这些身体构造有利于它们快速的移动和寻找食物。美洲大蠊具有极强生命力和适应力以及繁殖力，在缺少食物和水源的情况还能正常存活15‑30天。美洲大蠊总共有十四个龄期，从幼虫羽化到成虫后的寿命还有一年以上。一只成熟的雌蟑螂一生中可以多次产卵，每颗卵鞘可以孵化出大约16只幼虫。除此之外，美洲大蠊还可以在未受精的情况下进行孤雌生殖。美洲大蠊从亿万年前繁衍至今，经历了许多恶劣的环境变迁，仍没有灭绝并且还能