一种适合荧光假单胞菌的制剂化载体及其菌剂.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114875016A(43)申请公布日2022.08.09(21)申请号202210491642.0(51)Int.Cl.(22)申请日2022.04.29C12N11/04(2006.01)C12N1/20(2006.01)(83)生物保藏信息A01N25/08(2006.01)CGMCCNo.246682022.04.11A01N63/27(2020.01)(71)申请人重庆西农植物保护科技开发有限公A01P1/00(2006.01)司A01G13/00(2006.01)地址400711重庆市北碚区双柏路199号附C12R1/39(2006.01)15号2-7申请人西南大学(72)发明人丁伟王珍珍厉阗冉渝澳吴晓敏(74)专利代理机构北京中政联科专利代理事务所(普通合伙)11489专利代理师邓楠权利要求书1页说明书12页附图7页(54)发明名称一种适合荧光假单胞菌的制剂化载体及其菌剂(57)摘要本发明在分离得到具有抗烟草青枯菌荧光假单胞菌LSW‑4的基础上，进一步研究开发了适用于该荧光假单胞菌的制剂化载体，所述载体为谷糠、秸秆粉或硅藻土。利用该载体复配得到的菌剂培养基，可将荧光假单胞菌LSW‑4制成活菌数高，存放时间长的固体微生物菌剂，解决荧光假单胞菌LSW‑4运输和储存的问题，本发明制备固体微生物菌剂方法简单，便于将分离得到的具有生防作用的荧光假单胞菌LSW‑4进一步产业化应用于田间防治烟草青枯病，充分发挥其实际作用和效果。CN114875016ACN114875016A权利要求书1/1页1.一种适合荧光假单胞菌的制剂化载体，其特征在于，所述载体为谷糠、秸秆粉或硅藻土。2.根据权利要求1所述的制剂化载体，其特征在于，所述荧光假单胞菌为荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)LSW‑4，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2022年4月11日，保藏编号：CGMCC24668。3.一种防治烟草青枯病的微生物菌剂，其特征在于，包括荧光假单胞菌LSW‑4和载体，荧光假单胞菌LSW‑4保藏编号为：CGMCC24668。4.根据权利要求3所述的防治烟草青枯病的微生物菌剂，其特征在于，还包括菌剂培养基：胰蛋白胨1％，酵母膏0.5％，氯化钠1％，羧甲基纤维素钠0.01％～0.02％，糊精0.5％‑1.5％，酪蛋白酸钠2％～3％。5.根据权利要求3所述的防治烟草青枯病的微生物菌剂，其特征在于，荧光假单胞菌LSW‑4菌液和载体的比例为0.5～3ml：1g。6.权利要求3‑5任一项防治烟草青枯病的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，具体步骤包括：(1)、将荧光假单胞菌LSW‑4接种至LB液体培养基中，置于28‑30℃恒温摇床培养24h‑48h，培养好的细菌发酵液离心，离心后的菌体用菌剂培养基悬浮，轻轻振荡混匀；(2)、将悬浮好的菌液加入载体，于28‑30℃恒温摇床培养30‑40min，最后干燥至恒重即可。7.根据权利要求6所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述载体为谷糠、秸秆粉或硅藻土；所述菌剂培养基为胰蛋白胨1％，酵母膏0.5％，氯化钠1％，羧甲基纤维素钠0.01％～0.02％，糊精0.5％‑1.5％，酪蛋白酸钠2％～3％。8.根据权利要求6所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中菌液和载体的比例为0.5～3ml：1g。9.根据权利要求6所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，菌液中荧光假单胞菌LSW‑4的浓度为1×1010cfu/ml～1×1012cfu/ml。10.权利要求3‑5任一项微生物菌剂在防治烟草青枯病中的应用。2CN114875016A说明书1/12页一种适合荧光假单胞菌的制剂化载体及其菌剂技术领域[0001]本发明属于农业微生物防治技术领域，涉及一种适合荧光假单胞菌的制剂化载体及其菌剂。背景技术[0002]烟草青枯病是由青枯雷尔氏菌(Ralstoniasolanacearum)引起的毁灭性土传病害。严重时，造成较高的经济损失。针对烟草青枯病的防治技术，国内外学者研究从化学、生物、农业措施等方面防控，虽然在一定程度上可以减轻烟草青枯病的发生，但是仍然存在一定的局限性。近几年，利用生防菌防治烟草青枯病是一种有效的防治措施，具有环境友好，长效等优点，具有广阔的应用前景。目前已经从土壤中分离到的可用于防治烟草青枯病的生防菌主要有枯草芽孢杆菌、丛枝菌根真菌、链霉菌、假单胞杆菌等。这些分离到的菌株都可以进一步开发为微生物农药的潜力。[0003]但由于荧光假单胞菌为营专性好氧生活，可在pH5‑8和7％NaCl的环境中生长，最适生长温度约25‑30℃，大多数菌株能在4℃或4℃以下低温