一种荧光假单胞菌菌株及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110452862A(43)申请公布日2019.11.15(21)申请号201910659301.8C12N15/03(2006.01)(22)申请日2019.07.22C12P7/58(2006.01)A01N63/00(2006.01)(83)生物保藏信息A01P1/00(2006.01)CGMCCNo.180112019.06.21A01P3/00(2006.01)(71)申请人山东大学C12R1/39(2006.01)地址266200山东省青岛市即墨区鳌山卫街道滨海路72号山东大学青岛校区申请人德州迈科生物技术有限公司(72)发明人涂强张友明武玉侠陈汉娜徐佳莹边志龙姜彬(74)专利代理机构青岛华慧泽专利代理事务所(普通合伙)37247代理人马千会(51)Int.Cl.权利要求书1页说明书4页C12N1/21(2006.01)序列表1页附图4页(54)发明名称一种荧光假单胞菌菌株及其应用(57)摘要本发明属于微生物技术领域,涉及一株荧光假单胞菌菌株及其用。一种荧光假单胞菌菌株,该菌株为荧光假单胞菌菌株zc-C3-V,分类命名为Pseudomonasprotegenszc-C3-V,于2019年6月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏编号为：CGMCCNo.18011。本发明的荧光假单胞菌菌株zc-C3-V，不仅能够产生2-酮基葡萄糖酸，发酵后的菌体可以回收后制作成生防菌剂，一方面避免了环境污染，另一方面使资源实现废物再利用，创造新的价值，具有明显的社会效益和经济效益。CN110452862ACN110452862A权利要求书1/1页1.一种荧光假单胞菌菌株,其特征在于：该菌株为荧光假单胞菌菌株zc-C3-V，分类命名为Pseudomonasprotegenszc-C3-V，于2019年6月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏编号为：CGMCCNo.18011。2.根据权利要求1所述的荧光假单胞菌菌株,其特征在于：该菌株是荧光假单包菌V与生防假单胞菌C3的融合体。3.根据权利要求1或2所述的荧光假单胞菌菌株,其特征在于：所述菌株的基因组序列如SEQNO：1所示。4.一种荧光假单胞菌菌株的用途，其特征在于：用于生产2-酮基葡萄糖酸，发酵液离心后的菌体用于制作生防菌剂。2CN110452862A说明书1/4页一种荧光假单胞菌菌株及其应用技术领域[0001]本发明属于微生物技术领域,涉及一株荧光假单胞菌菌株及其用。背景技术[0002]GenomeShuffling技术是应用母本融合，定向筛选特定表型特征改变的突变体的技术，利用其原生质体融合技术可以跨越种属的界限，使目的性状得以提高，具有其它育种方法无法比拟的优势。这项技术是从分子定向进化向基因组水平的扩展延伸，将遗传改造与修饰从单个基因扩展到整个基因组，在更广泛、宏观的范围内对菌种的目的性状进行组合。这项技术类似于在非有性生殖的原核生物中构建一种类似于有性生殖的遗传物质交流方式，这样，通过多轮的随机重组可以快速、高效地选育出表型得到明显改进的菌种。[0003]荧光假单胞菌属革兰氏阴性杆状细菌，我国农业部已将其列为可注册登记的微生物农药和肥料品种之一，在全国范围内推广使用。对植物病害，尤其是土传病害如碎倒病、根腐病、枯萎病等均有很好的防治作用，是一类重要的有益微生物资源，在农业生产上具有非常重要的意义。利用基因重组技术将相关基因导入到荧光假单胞菌中，就形成了具有生防功能的良好微生物农用菌株。[0004]2-酮基-D-葡萄糖酸(2-keto-D-gluconicacid，2KGA)是采用细菌发酵工业化大规模生产的有机酸之一，主要用于食品抗氧化剂D-异抗坏血酸(Erythorbicacid，EA)及D-异抗坏血酸钠(Sodiumerythorbate，EN)的合成。20世纪90年代以来，国际市场对食品抗氧化剂EN及EA的需求量不断增加，对其生产过程中的中间体2KGA的需求量也越来越大。其生产菌荧光假单胞菌Pseudomonasprotagens与农业中的生防假单胞菌Pseudomonasprotagenschao亲缘关系较近，但是由于长期没有合适的处理方式，菌体只能作为工业废弃物处理，即造成资源浪费又污染了环境。发明内容[0005]本发明的目的是为了解决现有技术中的问题，提供一种荧光假单胞菌菌株，该菌株既具有农业生防作用，又可以用于工业生产2KGA，使2KGA产生菌废物利用，即提高了资源利用率，又避免了环境污染。[0006]为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种荧光假单胞菌菌株，该菌株为荧光假单胞菌菌株zc-C3-V，分类命名为Ps