一株假单胞菌、包括假单胞菌的菌剂及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113957013A(43)申请公布日2022.01.21(21)申请号202111371438.7(22)申请日2021.11.18(83)生物保藏信息CGMCCNO.187392019.10.25(71)申请人云南大学地址650091云南省昆明市翠湖北路2号(72)发明人陈金全梁琪叶敬旴李涵宇于利浩文宇倩杨若渺(74)专利代理机构北京高沃律师事务所11569代理人张梦泽(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)B09C1/10(2006.01)C12R1/38(2006.01)权利要求书1页说明书6页序列表2页附图3页(54)发明名称一株假单胞菌、包括假单胞菌的菌剂及其制备方法和应用(57)摘要本发明提供了一株假单胞菌、包括假单胞菌的菌剂及其制备方法和应用，属于微生物菌剂技术领域；所述假单胞菌的保藏编号为：CGMCCNO.18739。本发明从重金属污染的农田土壤中选育获得一株假单胞菌属植物促生细菌。本发明的菌株具有良好的抗汞性能，能通过生物挥发作用，降低土壤总汞含量，通过生物钝化作用降低土壤汞有效态含量，具有较强的实际应用潜力。CN113957013ACN113957013A权利要求书1/1页1.一株假单胞菌(Pseudomonassp.)AN‑15，保藏编号为：CGMCCNO.18739。2.一种包括权利要求1所述假单胞菌的菌剂。3.权利要求2所述菌剂的制备方法，包括以下步骤：将所述假单胞菌接种于LB培养基，进行培养，得到菌剂。4.权利要求1所述假单胞菌或者权利要求2所述菌剂或者权利要求3所述制备方法制备得到的菌剂在改良汞污染土壤中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述改良重金属污染土壤包括降低土壤中的汞含量和/或有效态汞含量。6.权利要求1所述假单胞菌或者权利要求2所述菌剂在挥发除汞和/或钝化除汞中的应用。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述汞为Hg2+。2CN113957013A说明书1/6页一株假单胞菌、包括假单胞菌的菌剂及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及微生物菌剂技术领域，尤其涉及一株假单胞菌、包括假单胞菌的菌剂及其制备方法和应用。背景技术[0002]由于工业、采矿业等的快速发展，土壤汞污染日趋严重。汞污染不仅减少了可利用耕地面积，而且降低耕地质量，且大多数中轻度汞污染土壤依然承载着农业生产的功能，农产品安全形势严峻。[0003]土壤中的汞主要以结合形态和化学形态存在，吸附、解吸、氧化、还原及络合等作用是影响土壤中含汞化合物迁移、残留、形态分异和生物有效性的主要过程。土壤汞污染的修复途径主要有两种：(1)一种是将汞固定在土壤中，通过吸附或改变汞的化学形态，降低汞的生物有效性，使其不易被植物吸收，抑制其进入生物链，称为钝化修复；(2)另一种是将土壤中的汞提取出来，降低汞在土壤中的浓度，称为提取修复。总体上，土壤汞污染修复技术可分为物理化学法和生物法，生物法包括植物修复和微生物修复。[0004]物理化学修复方法，主要有化学淋洗、热解吸、电动修复等，能够有效且快速的修复受汞污染的土壤，具修复效果良好，但由于其成本高，消耗高，易产生二次污染等局限，故主要适用于污染严重、面积小的场地污染。对于污染面积较大的土壤则要消耗大量的人力和财力，且容易造成土壤结构破坏和土壤肥力下降等危害土壤健康的负面影响，尤其是当采用不恰当的修复方式时，修复所带来的环境负面影响可能会超过土壤中污染物暴露的危害，其发展与应用受到了严重制约。[0005]植物修复即利用某些植物能忍耐和超量积累某种汞的特性来清除土壤中的汞。它具有良好的经济、生态效益，且被认为是一种新兴高效、绿色廉价的生物修复途径。国内外通过大量的研究，陆续发现了一些能够富集汞的植物，如苎麻、加拿大杨、小叶黄杨等，但目前尚未发现可有效用于修复汞污染土壤的超富集植物。尽管植物修复技术在汞污染土壤恢复中得到了广泛的应用，但用于修复土壤汞污染的植物生物量大，导致其后处理繁琐、耗资大等问题未能得到很好解决，且植物修复技术耗时过长，修复过程中污染土地必须闲置出来，治理目的地的经济价值几乎为零。[0006]土壤中存在的汞主要以溶液或者吸附态的Hg2+为主，不能像有机污染物那样被微生物降解，但可以借助微生物对汞的还原、吸附、沉淀等作用，改变土壤中汞的赋存形态，影响其生物有效性；同时微生物也能调节植物的养分供应，促进植物生长发育，从而达到降低环境中的汞毒害和修复汞污染环境的目的。目前基于微生物的挥发和钝化的原位修复技术，因其环境的协调性，修复成本经济性，表现出了很大的发展潜力。目前，生物还原挥发脱Hg技术已经成功应用于含Hg废水的处理。但迄今为止，抗Hg细菌应用于土壤Hg污染