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(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115073578A(43)申请公布日2022.09.20(21)申请号202210671524.8A23L33/17(2016.01)(22)申请日2022.06.14(71)申请人青岛农业大学地址266109山东省青岛市城阳区长城路700号(72)发明人吕良涛杨庆利王一婷历铭徐悦(74)专利代理机构山东三邦知识产权代理事务所(普通合伙)37308专利代理师张立得(51)Int.Cl.C07K14/47(2006.01)C07K1/02(2006.01)C07K1/107(2006.01)C07K1/14(2006.01)权利要求书1页说明书7页序列表2页附图2页(54)发明名称一种降低原肌球蛋白致敏性的方法(57)摘要本发明公开一种降低原肌球蛋白致敏性的方法,属于生物技术领域。所述降低原肌球蛋白致敏性的方法为:将原肌球蛋白加水稀释至浓度为2mg/mL,加入丙酮醛,水浴加热15min,进行修饰,然后将反应体系迅速降温至4℃以下,以降低原肌球蛋白的致敏性。上述方法可使原肌球蛋白中的赖氨酸、精氨酸、天冬氨酸和谷氨酰胺等氨基酸被丙酮醛修饰,并在加热条件下促使原肌球蛋白发生交联,生成蛋白分子聚集体,α‑螺旋和β‑折叠结构减少,从而最终导致原肌球蛋白的致敏性降低。CN115073578ACN115073578A权利要求书1/1页1.一种降低原肌球蛋白致敏性的方法,其特征在于,步骤如下:将原肌球蛋白加水稀释至浓度为1~4mg/mL,加入丙酮醛,水浴加热5~30min,进行修饰,然后将反应体系迅速降温至4℃以下,以降低原肌球蛋白的致敏性。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,原肌球蛋白选自虾原肌球蛋白。3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,原肌球蛋白的浓度为2mg/mL。4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,原肌球蛋白与丙酮醛的摩尔比选自1:4~1:16。5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,水浴加热的温度选自60~100℃。6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,水浴加热的温度选自80~100℃。7.权利要求1~6任一项所述方法制备的被丙酮醛修饰过的具有低致敏性的原肌球蛋白。8.权利要求1~6任一项所述方法在降低含原肌球蛋白的产品的致敏性中的应用。2CN115073578A说明书1/7页一种降低原肌球蛋白致敏性的方法技术领域[0001]本发明属于生物技术领域,具体涉及一种降低原肌球蛋白致敏性的方法。背景技术[0002]虾及其制品是美味且营养丰富的食物,但虾也是常见的八大类食物过敏原之一。随着人们对虾类需求量的增加,越来越多的人出现过敏反应症状。其中,虾原肌球蛋白(tropomyosin,TM)被认为是引起过敏反应的主要过敏原,其分子量在35‑41kDa之间,含有284个氨基酸,是由两个a‑螺旋的亚基相互缠绕构成的超螺旋结构。虾原肌球蛋白致敏性主要由抗原表位决定的。目前降低虾TM致敏性的方法有热处理、超高压、糖基化、发酵等加工方式,以糖基化为例,其利用糖类虽然可以改变蛋白质的功能性质,降低蛋白质的致敏性,但整个反应过程体系复杂,耗时且成本高。发明内容[0003]本发明提供了一种降低原肌球蛋白致敏性的方法,与现有技术不同的是,该方法利用丙酮醛对原肌球蛋白进行修饰,通过改变原肌球蛋白的结构,从而最终降低原肌球蛋白的致敏性。上述方法步骤如下:[0004]将原肌球蛋白加水稀释至浓度为1~4mg/mL,加入丙酮醛,水浴加热5~30min,进行修饰,然后将反应体系迅速降温至4℃以下,以降低原肌球蛋白的致敏性。[0005]在本发明中,原肌球蛋白选自虾原肌球蛋白,进一步选自刀额新对虾原肌球蛋白。[0006]在本发明中,原肌球蛋白的浓度优选为2mg/mL。[0007]在本发明中,原肌球蛋白与丙酮醛的摩尔比选自1:4~1:16。[0008]在本发明中,水浴加热的温度选自60~100℃,优选为80~100℃。[0009]在本发明中,在降低原肌球蛋白的致敏性后,可采用4℃去离子水透析去除未参加反应的丙酮醛。[0010]上述方法可使原肌球蛋白被丙酮醛修饰,并在加热条件下发生交联,生成蛋白分子聚集体,α‑螺旋和β‑折叠结构减少,从而最终导致原肌球蛋白的致敏性降低。基于上述内容,本发明还提供了一种被丙酮醛修饰过的具有低致敏性的原肌球蛋白。[0011]本发明同时提供了一种上述方法在降低含原肌球蛋白的产品的致敏性中的应用。[0012]本发明的有益效果为:[0013]本发明通过丙酮醛对原肌球蛋白进行修饰,在加热条件下引发蛋白质交联,改变了蛋白本身的结构,使抗原表位被破坏或者隐藏,从而最终导致原肌球蛋白的致敏性降低。整个修饰过程简单易操作,而且致敏性降低效果显著。附图说明[0014]图1为MGO