玉米S型胞质不育基因KASP分子标记的开发及应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115125326A(43)申请公布日2022.09.30(21)申请号202210758382.9(22)申请日2022.06.30(66)本国优先权数据202111317475.X2021.11.09CN(71)申请人青岛农业大学地址266109山东省青岛市城阳区长城路(72)发明人张恩盈程丽巧(74)专利代理机构上海怡恩专利代理事务所(普通合伙)31336专利代理师牟俊玲(51)Int.Cl.C12Q1/6895(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书2页说明书8页序列表1页附图1页(54)发明名称玉米S型胞质不育基因KASP分子标记的开发及应用(57)摘要本发明公开了玉米S型胞质不育基因KASP分子标记的开发及应用，属于生物技术领域。它采用鉴定或辅助鉴定玉米S型胞质不育的方法，此方法包括检测待测玉米的基因型，根据待测玉米的基因型鉴定或辅助鉴定玉米S型胞质不育；所述基因型为玉米基因组中KASP_S位点的基因型；所述KASP_S位点是玉米叶绿体基因组中的一个InDel位点，位于玉米叶绿体基因组第11860位，所述InDel位点是核苷酸种类为+或者‑。本发明所提及的标记KASP_S在玉米S型胞质不育植株筛选中具有较高的实用性。CN115125326ACN115125326A权利要求书1/2页1.玉米S型胞质不育基因KASP分子标记的开发，采用鉴定或辅助鉴定玉米S型胞质不育的方法，其特征在于，此方法包括检测待测玉米的基因型，根据待测玉米的基因型鉴定或辅助鉴定玉米S型胞质不育；所述基因型为玉米基因组中KASP_S位点的基因型；所述KASP_S位点是玉米叶绿体基因组中的一个InDel位点，位于玉米叶绿体基因组第11860位，所述InDel位点是核苷酸种类为+或者‑，为SEQIDNo.4的第101‑183位核苷酸；所述KASP_S位点的基因型为++基因型或+‑基因型的待测玉米为S型胞质不育或者候选为S型胞质不育，所述KASP_S位点的基因型为CC基因型的待测玉米为可育或者候选为可育；所述KASP_S位点的基因型为+‑基因型的待测玉米与所述KASP_S位点的基因型为++基因型的待测玉米在S型胞质不育性状上无显著差异；其中，所述++基因型表示玉米基因组中所述KASP_S位点的核苷酸种类为+的纯合型；所述‑‑基因型表示玉米基因组中所述KASP_S位点的核苷酸种类为‑的纯合型；所述+‑基因型表示玉米基因组中所述KASP_S位点的核苷酸种类为+和‑的杂合型。2.根据权利要求1所述的方法在玉米育种中的应用。3.根据权利要求1所述的玉米S型胞质不育基因KASP分子标记的开发而提出的一种应用，其特征在于：检测所述KASP_S位点的多态性或基因型的物质在鉴定或辅助鉴定玉米S型胞质不育中的应用。4.根据权利要求1所述的玉米S型胞质不育基因KASP分子标记的开发而提出的一种应用，其特征在于：检测所述KASP_S位点的多态性或基因型的物质在制备鉴定或辅助鉴定玉米S型胞质不育的产品中的应用。5.根据权利要求1所述的玉米S型胞质不育基因KASP分子标记的开发而提出的一种应用，其特征在于：检测所述KASP_S位点的多态性或基因型的物质在玉米辅助育种或制备玉米辅助育种产品中的应用。6.根据权利要求2所述的应用，所述应用中包括玉米育种的方法，其特征在于：包括选择所述KASP_S位点的基因型为++或者基因型为+‑的玉米作为亲本进行育种，所述++基因型表示玉米基因组中所述KASP_S位点的核苷酸种类为+的纯合型；所述+‑基因型表示玉米基因组中所述KASP_S位点的核苷酸种类为+和‑的杂合型；所述玉米育种可为S型胞质不育玉米。7.根据权利要求1所述的玉米S型胞质不育基因KASP分子标记的开发而得到的产品，其特征在于，产品为C1‑C3中任一一种产品：C1：检测与玉米S型胞质不育相关的InDel多态性或基因型的产品；C2：鉴定或辅助鉴定玉米S型胞质不育的产品；C3：用于玉米辅助育种的产品。8.根据权利要求3‑5中任一所述的应用或权利要求7所述的产品，其特征在于：检测KASP_S位点的多态性或基因型的物质为如下D1、D2或D3：D1：所述检测权利要求1中KASP_S位点的多态性或基因型的物质含有扩增包括所述KASP_S位点在内的玉米基因组DNA片段的PCR引物；D2：所述检测权利要求1中KASP_S位点的多态性或基因型的物质为含有所述PCR引物的PCR试剂；D3：含有D1所述PCR引物或D2所述PCR试剂的试剂盒。2CN115125326A权利要求书2/2页9.根据权利要求8所述的应用或产品，其特征在于：所述PCR引物为由核苷酸序列是序列表中SEQIDNo.1的第22‑52位的单链DNA、核