用于鉴别检测猪非洲猪瘟、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒引物组合物及应用-豆柴文库

用于鉴别检测猪非洲猪瘟、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒引物组合物及应用.pdf

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(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115287376A(43)申请公布日2022.11.04(21)申请号202211136028.9(22)申请日2022.09.19(71)申请人北京农学院地址102200北京市昌平区回龙观镇北农路7号申请人易检生物（北京）科技有限公司(72)发明人侯晓林赵振华刘凤华王蕾周双海李焕荣(74)专利代理机构北京中睿智恒知识产权代理事务所(普通合伙)16025专利代理师邓大为(51)Int.Cl.C12Q1/70(2006.01)C12N15/11(2006.01)C12Q1/6844(2018.01)权利要求书2页说明书13页附图5页(54)发明名称用于鉴别检测猪非洲猪瘟、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒引物组合物及应用(57)摘要本发明公开了一种用于检测猪非洲猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒引物组合物及应用，包括以下引物：外引物F3和B3，内引物FIP和BIP，环引物LF和LB。该引物组合物用于诊断鉴别非洲猪瘟和猪伪狂犬病毒。可用于鉴别检测样本中是否含有非洲猪瘟病毒基因或者伪狂犬病毒基因。还能区分伪狂犬病毒疫苗毒和野毒。本发明提供的引物组合物检测非洲猪瘟病毒基因和伪狂犬病毒基因具有灵敏度好、特异性高等特点；可用于非洲猪瘟病毒基因、伪狂犬病毒和猪细小病毒基因的检测。CN115287376ACN115287376A权利要求书1/2页1.一种用于检测非洲猪瘟病毒基因、猪伪狂犬病毒基因和猪细小病毒基因的引物组合物，其特征在于，包括用于检测非洲猪瘟病毒的通用型引物与引物组合物，用于检测伪狂犬病毒的通用引物与引物组合物，和用于检测细小病毒的通用引物与引物组合物；所述用于检测非洲猪瘟病毒B646L基因的引物组合物，包括以下引物：F3引物为SEQIDNo.1所示的核苷酸序列；B3引物为SEQIDNo.2所示的核苷酸序列；FIP引物为SEQIDNo.3所示的核苷酸序列；BIP引物为SEQIDNo.4所示的核苷酸序列；LF引物为SEQIDNo.5所示的核苷酸序列；LB引物为SEQIDNo.6所示的核苷酸序列；所述用于检测伪狂犬病毒gB基因的引物组合物，包括以下引物：F3引物为SEQIDNo.7所示的核苷酸序列；B3引物为SEQIDNo.8所示的核苷酸序列；FIP引物为SEQIDNo.9所示的核苷酸序列；BIP引物为SEQIDNo.10所示的核苷酸序列；LF引物为SEQIDNo.11所示的核苷酸序列；LB引物为SEQIDNo.12所示的核苷酸序列；所述用于检测伪狂犬病毒基因gD的引物组合物，包括以下引物：F3引物为SEQIDNo.13所示的核苷酸序列；B3引物为SEQIDNo.14所示的核苷酸序列；FIP引物为SEQIDNo.15所示的核苷酸序列；BIP引物为SEQIDNo.16所示的核苷酸序列；LF引物为SEQIDNo.17所示的核苷酸序列；LB引物为SEQIDNo.18所示的核苷酸序列；所述用于检测和鉴别伪狂犬病毒基因gE的引物组合物，包括以下引物：F3引物为SEQIDNo.19所示的核苷酸序列；B3引物为SEQIDNo.20所示的核苷酸序列；FIP引物为SEQIDNo.21所示的核苷酸序列；BIP引物为SEQIDNo.22所示的核苷酸序列；LF引物为SEQIDNo.23所示的核苷酸序列；LB引物为SEQIDNo.24所示的核苷酸序列；所述用于检测和鉴别细小病毒基因VP1的引物组合物，包括以下引物：F3引物为SEQIDNo.25所示的核苷酸序列；B3引物为SEQIDNo.26所示的核苷酸序列；FIP引物为SEQIDNo.27所示的核苷酸序列；BIP引物为SEQIDNo.28所示的核苷酸序列；LF引物为SEQIDNo.29所示的核苷酸序列；LB引物为SEQIDNo.30所示的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的一种用于检测非洲猪瘟病毒基因、猪伪狂犬病毒和猪细小病2CN115287376A权利要求书2/2页毒基因的引物组合物，其特征在于，所述的组合物包括将F3、B3、FIP、BIP、LF和LB引物序列经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加后具有与所描述核苷酸序列具有相同功能的DNA分子。3.根据权利要求2所述一种用于检测非洲猪瘟病毒基因、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒基因的引物组合物的应用，其特征在于，用环介导等温扩增方法中用以扩增非洲猪瘟基因、伪狂犬病毒基因和猪细小病毒。4.根据权利要求3所述的一种用于检测非洲猪瘟病毒基因、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒基因的引物组合物的应用，其特征在于，所述的引物组合物在环介导等温扩增方法中，引物组合物F3、B3、FIP、BIP、LF和LB的摩尔浓度比为1：1：4‑16：4‑16：2‑8：2‑8。5.根据权利要求3所述的一种用于检测非洲猪瘟病毒基因、猪伪狂犬

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