一种山东灵芝提取物的制备方法及其在制备降血糖药物中的应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115634241A(43)申请公布日2023.01.24(21)申请号202211433793.7A61P39/06(2006.01)(22)申请日2022.11.16C12N1/14(2006.01)C12R1/645(2006.01)(83)生物保藏信息CGMCCNO.402842022.08.24(71)申请人青岛农业大学地址266109山东省青岛市城阳区长城路700号(72)发明人田雪梅耿彬彬张馨元张国利候冉冉王光远张英昊(74)专利代理机构济南泉城专利商标事务所37218专利代理师王翠翠(51)Int.Cl.A61K36/074(2006.01)A61P3/10(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图2页(54)发明名称一种山东灵芝提取物的制备方法及其在制备降血糖药物中的应用(57)摘要本发明公开了一种山东灵芝提取物的制备方法及其在制备降血糖药物中的应用，包括以下步骤，取保藏编号CGMCCNO.40284山东灵芝菌种经活化后进行摇床震荡液体发酵培养，培养结束后，过滤，得到发酵液和菌丝；菌丝烘干磨成粉末，用热水提取获得胞内水提物；热水提取结束后用乙醇进行醇提获得胞内醇提物；将过滤所得发酵液加热并浓缩，加入乙醇进行醇沉，醇沉后，再将其放在离心机中离心，取沉淀，得到胞外醇沉物，醇沉物烘干后粉碎成粉末；取离心后的上清醇溶液用旋转蒸发仪旋蒸处理，得到胞外醇溶物。本研究结果将为山东灵芝提取物开发利用和降血糖等相关药品的研发提供一定的试验基础和理论依据，具有一定的理论意义和实际应用价值。CN115634241ACN115634241A权利要求书1/1页1.一种山东灵芝提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将平板活化6‑7d的山东灵芝菌种转接到液体菌种培养基中，25‑29℃、110‑150rpm摇床中震荡培养6‑7d后，作为液体菌种，以5‑10%的接种量转接到液体发酵培养基中扩大培养8‑10d；培养结束后，用200目纱网进行过滤，得到发酵液和菌丝；其中所述山东灵芝（Gandermashangdongense）的保藏编号为CGMCCNO.40284；（2）菌丝于50‑60℃烘干，烘干磨成粉末，按照1:10‑1:20的比例，用70‑95%乙醇以60‑100Hz频率进行超声醇提，每次1h，重复3‑4次，合并提取液用旋转蒸发仪进行乙醇回收后剩余液体经冷冻干燥后，即得胞内醇提样品；（3）经醇提后的菌丝残渣，以1:5‑1:10的比例，用90‑100℃热水提取3‑4次，每次1h，合并提取液后浓缩至原体积的1/10，后加入1‑4倍70‑95%乙醇进行醇沉，醇沉24‑48h后，置5000r/min离心机中离心10min，所得沉淀经冷冻干燥后，即得胞内醇沉样品；（4）将过滤的发酵液加热并浓缩至原始体积的1/10，后加入1‑4倍70‑95%乙醇进行醇沉，醇沉24‑48h后，置5000r/min离心机中离心10min，所得沉淀经冷冻干燥后，即为胞外醇沉样品；（5）取离心后的上清醇溶液用旋转蒸发仪进行乙醇回收后剩余液体经冷冻干燥后，即得胞外醇溶样品。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的山东灵芝液体菌种活化的过程为：接种量为每瓶10块0.5cm2平板菌种块，培养的前1‑3天，温度设定25‑27℃，转速110r/min，避光振荡培养；培养的第3‑7天，温度设定27‑29℃，转速130‑150r/min，避光振荡培养。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的山东灵芝液体发酵扩大培养的过程为：液体菌种接种量5‑10%，培养的第1‑5天，温度设定27‑29℃，转速130‑150r/min，避光振荡培养；培养的第5‑8天，温度设定25‑27℃，转速110‑130r/min，避光振荡培养。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，液体菌种活化培养基为：马铃薯20%，合欢木屑1%，葡萄糖2%。5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，液体发酵扩大培养的培养基为：玉米面1%，麸皮1%，蔗糖2%，酵母膏0.2%，蛋白胨0.3%，KH2PO40.1%，MgSO4·7H200.05%。6.一种权利要求1‑5任一项所述的制备方法制备的山东灵芝提取物在制备降血糖药物中的应用。2CN115634241A说明书1/7页一种山东灵芝提取物的制备方法及其在制备降血糖药物中的应用技术领域[0001]本发明属于生物技术领域，具体涉及一种山东灵芝提取物的制备方法及其在制备降血糖药物中的应用。背景技术[0002]山东灵芝Gandermashangdongense担子果一年生，有柄，木栓质或木质，无气味、味苦，干燥后质量轻。菌盖形状多变，匙形或圆形。糖尿病（DiabetesMellit