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本发明公开了一种灵芝提取物纳米乳及其制备方法和应用,由灵芝三萜、灵芝多糖、表面活性剂、助表面活性剂、油相和水组成,其中,所述表面活性剂与助表面活性剂的质量比为1:2?2:1,表面活性剂和助表面活性剂的总质量与油相的质量比为4:6?10:1。本发明通过组方中各组分的种类及用量的筛选,制备得到一种O/W型灵芝提取物纳米乳,该纳米乳呈类球型、性质稳定、分布均匀、流动性较好;本发明制备得到的灵芝提取物纳米乳显著提高了灵芝三萜、灵芝多糖的溶解度,有助于提高体系的载药量及其有效成分利用率,适用应用于化妆品领域,为后续灵芝纳米乳化妆品的工艺生产及理论研究提供了一定的实验基础。