猪伪狂犬病毒毒株、猪圆环病毒2型毒株、四联灭活疫苗及其制备方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115851616A(43)申请公布日2023.03.28(21)申请号202211163878.8A61K39/295(2006.01)(22)申请日2022.09.23A61K39/12(2006.01)A61P31/20(2006.01)(83)生物保藏信息A61K39/187(2006.01)CCTCCNO:V2021502021.05.25A61P31/14(2006.01)CCTCCNO:V2021222021.03.20A61K39/245(2006.01)(71)申请人江西正邦科技股份有限公司A61P31/22(2006.01)地址330000江西省南昌市高新技术开发A61K39/02(2006.01)区艾溪湖一路569号A61P31/04(2006.01)申请人江西正邦农业科学院C12R1/93(2006.01)(72)发明人肖敏王闯卢昌花纪刘建(74)专利代理机构南昌华成联合知识产权代理事务所(普通合伙)36126专利代理师张建新(51)Int.Cl.权利要求书1页说明书9页C12N7/00(2006.01)序列表（电子公布）附图4页(54)发明名称猪伪狂犬病毒毒株、猪圆环病毒2型毒株、四联灭活疫苗及其制备方法(57)摘要本发明提供了猪伪狂犬病毒毒株、猪圆环病毒2型毒株、四联灭活疫苗及其制备方法。本发明提供的猪伪狂犬病毒毒株命名为PRVSD2020ΔgI‑gE株，猪圆环病毒2型毒株命名为PCV2d‑HuB/2020株，均已在中国典型培养物保藏中心保藏。本发明提供的四联灭活疫苗从安全性、免疫原性、免疫持续期及免疫保护效果方面，与单苗之间无差别；从免疫的方便性上比较，只需免疫一次，就可以预防四种疾病，减轻了免疫接种工作量，亦减少了对猪群的应激，避免了因频繁免疫造成的免疫麻痹和免疫失败，从而起到预防猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒和猪肺炎支原体的效果。CN115851616ACN115851616A权利要求书1/1页1.一株猪伪狂犬病毒毒株，其特征在于，命名为PRVSD2020ΔgI‑gE株，已在中国典型培养物保藏中心保藏，其保藏号为CCTCCNO:V202150，保藏日期为2021年5月25日，保藏地址为湖北省武汉市武昌区珞珈山路16号武汉大学的中国典型培养物保藏中心。2.一株猪圆环病毒2型毒株，其特征在于，命名为PCV2d‑HuB/2020株，已在中国典型培养物保藏中心保藏，其保藏号为CCTCCNO:V202122，保藏日期为2021年3月20日，保藏地址为湖北省武汉市武昌区珞珈山路16号武汉大学的中国典型培养物保藏中心。3.四联灭活疫苗，其特征在于，含有猪圆环病毒2型抗原、猪瘟病毒E2蛋白、猪伪狂犬病毒抗原和猪肺炎支原体抗原，其中所述猪圆环病毒2型抗原由根据权利要求2所述猪圆环病毒2型毒株繁殖得到，所述猪伪狂犬病抗原由根据权利要求1所述猪伪狂犬病毒毒株繁殖得到。4.根据权利要求3所述的四联灭活疫苗，其特征在于，所述猪瘟病毒E2蛋白为重组杆状病毒载体表达的重组蛋白，其抗原基因序列如SEQIDNo.1所示。5.根据权利要求3所述的四联灭活疫苗，其特征在于，所述猪圆环病毒2型抗原含量不6.00低于1.0×10TCID50/头份，所述猪瘟病毒E2蛋白含量不低于50μg/头份，所述猪伪狂犬8.00病毒抗原含量不低于1.0×10TCID50/头份，所述猪肺炎支原体抗原含量不低于1.0×109.00CCU/头份。6.根据权利要求3所述四联灭活疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将猪圆环病毒2型抗原、猪瘟病毒E2蛋白、猪伪狂犬病毒抗原和猪肺炎支原体抗原培养物离心，浓缩，得到浓缩液；将所述浓缩液进行灭活处理，得到灭活抗原液；将所述灭活抗原液与佐剂混合，得到所述四联灭活疫苗。7.根据权利要求6所述四联灭活疫苗的制备方法，其特征在于，所述佐剂为畜禽用水包油包水佐剂。8.根据权利要求6所述四联灭活疫苗的制备方法，其特征在于，所述灭活抗原液与佐剂的体积比例为6:4。2CN115851616A说明书1/9页猪伪狂犬病毒毒株、猪圆环病毒2型毒株、四联灭活疫苗及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及兽用疫苗制备技术，具体涉及猪伪狂犬病毒毒株、猪圆环病毒2型毒株，以及它们在疫苗中应用。背景技术[0002]猪圆环病毒2型(Porcinecircovirustype‑2,PCV2)是断奶后多系统衰竭综合征(Postweaningmultisystemicwastingsyndrome,PMWS)的病原体，在各个国家和地区都普遍存在，且各个阶段的猪群均表现出极强的易感性。PCV2感染后主要是侵害猪的免疫系统，使集体处于免疫抑制状态，从而继发感染其他病原微生物，严重影响养