一种液质联用检测牧草中磺胺类药物残留的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115902023A(43)申请公布日2023.04.04(21)申请号202211497053.XG01N30/14(2006.01)(22)申请日2022.11.25G01N30/72(2006.01)(71)申请人江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所地址330200江西省南昌市青云谱区南莲路602号(72)发明人谢敏徐俊王梦芝周瑶敏侯玉洁费丹广业兰黄恒康邬磊(74)专利代理机构北京三聚阳光知识产权代理有限公司11250专利代理师廖慧敏(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)权利要求书1页说明书10页附图3页(54)发明名称一种液质联用检测牧草中磺胺类药物残留的方法(57)摘要本发明公开了一种液质联用检测牧草中磺胺类药物残留的方法，本发明以牧草为检测对象，通过对牧草进行预处理，加入内标工作液和缓冲液，再经过提取剂提取、萃取盐萃取、净化柱分散净化、吹干、复溶、过滤多个步骤处理制备得到供试品溶液，最后将供试品溶液在一定的测定条件下进行超高效液相色谱与质谱联用的测定。本方法检测16种磺胺类药物在0.5～50μg/L范围内线性关系良好(R2>0.9960)，方法检出限为0.05～0.3μg/kg，定量限为0.05～0.5μg/kg。本方法可以同时定量检测牧草中16种磺胺类药物残留，而且操作简单、选择性好、灵敏度高，可满足牧草中磺胺类药物残留检测的需要。CN115902023ACN115902023A权利要求书1/1页1.一种牧草中磺胺类药物残留检测用供试品溶液的制备方法，其特征在于，包括：对牧草进行预处理，加入内标工作液和Na2EDTA‑Mcllvaine缓冲液，再加入乙腈超声提取，然后加入无水硫酸钠和氯化钠离心获取提取液，经AnavoQue超滤净化柱分散净化，吹干，用甲酸水溶液‑乙腈混合液溶解，经滤膜过滤，获得供试品溶液。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述内标工作液为氘代磺胺邻二甲氧嘧啶、氘代磺胺间二甲苯嘧啶的混合内标工作液；所述内标工作液的溶剂为甲醇；以所述牧草质量为基准，所述内标工作液中氘代磺胺邻二甲氧嘧啶、氘代磺胺间二甲苯嘧啶的用量均为400～1000μL/g，质量浓度均为0.6～1.5mg/L。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述Na2EDTA‑Mcllvaine缓冲液的物质的量浓度为0.05‑0.1mol/L；以所述牧草质量为基准，所述Na2EDTA‑Mcllvaine缓冲液用量为10‑20mL/g。4.根据权利要求1‑3任一项所述的制备方法，其特征在于，以所述牧草质量为基准，所述乙腈的用量为20‑40mL/g。5.根据权利要求1‑4任一项所述的制备方法，其特征在于，以所述牧草质量为0.5g计，所述无水硫酸钠的用量为3‑5g；所述氯化钠的用量为1‑2g。6.根据权利要求1‑5任一项所述的制备方法，其特征在于，所述甲酸水溶液‑乙腈混合液中，甲酸水溶液中甲酸的体积分数为0.05‑0.1％，甲酸水溶液与乙腈的体积比为9:1。7.根据权利要求1‑6任一项所述的制备方法，其特征在于，所述预处理为剪碎、冷冻干燥、研磨成粉；和/或，所述超声的频率为50～100Hz，超声的时长为15‑30min；和/或，所述离心的转速为5000‑10000r/min，离心的时长为5‑10min；和/或，所述吹干为在30‑40℃下氮气吹干。8.根据权利要求1‑7任一项所述的制备方法，其特征在于，所述磺胺类兽药为磺胺醋酰、磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺甲噻二唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺异恶唑、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺苯吡唑、磺胺对甲氧嘧啶中的至少一种。9.一种液质联用检测牧草中磺胺类药物残留的方法，其特征在于，包括：获取权利要求1‑8任一项所述的一种牧草中磺胺类药物残留检测用供试品溶液的制备方法获得的供试品溶液，采用超高效液相色谱‑质谱联用的方法对供试品溶液进行检测。10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的检测条件为：色谱柱为ZORBAXEclipsePlusC18，2.1mm×100mm，1.8μm；流动相A为含有5mmol/L乙酸铵的甲酸水溶液；流动相B为甲醇；流速为0.3mL/min；进样量为5μL；柱温为35℃；梯度洗脱程序为：0‑4min，5％B线性变化至20％B；4‑6min，20％B线性变化至40％B；6‑7min，40％B线性变化至100％B；7‑8min，100％B线性变化至98％B；8‑9min，98％B线性变化至5％B；9‑10min，保持5％B；和/或，所述质谱的检测条件