一种测定土壤中邻苯二甲酸酯的高效液相色谱检测方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115932109A(43)申请公布日2023.04.07(21)申请号202211706788.9(22)申请日2022.12.29(71)申请人南京农业大学地址210095江苏省南京市玄武区卫岗1号(72)发明人王建高彦征林家宝张帅(74)专利代理机构北京彦开专利代理事务所(普通合伙)16149专利代理师刘婷(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/16(2006.01)G01N30/34(2006.01)G01N30/74(2006.01)权利要求书2页说明书9页附图2页(54)发明名称一种测定土壤中邻苯二甲酸酯的高效液相色谱检测方法(57)摘要本发明公开了一种测定土壤中邻苯二甲酸酯的高效液相色谱检测方法，涉及环境污染治理技术领域，包括以下步骤：S1、土壤样品筛分；S2、土壤样品提取；S3、土壤样品净化；S4、土壤样品浓缩；S5、HPLC分析：将步骤S4中装有土壤浓缩液的液相小瓶放入液相色谱仪的进样板上，设置进样量为20μL，采取梯度洗脱和双波长紫外检测器串联的方式分离检测土壤浓缩液中6种邻苯二甲酸酯PAEs，检测时间为30min，流动相为乙腈‑UP水，流动相流过色谱柱的流速为1mL/min。本发明实现了对6种PAEs较好的分离，且出峰峰形对称、尖锐，分离效果好，具有较好的应用性。CN115932109ACN115932109A权利要求书1/2页1.一种测定土壤中邻苯二甲酸酯的高效液相色谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、土壤样品筛分：将采集的土壤样品预处理去除杂质并过筛，得到土壤样品粉末；S2、土壤样品提取：取2g步骤S1中得到的土壤样品粉末于容器中，加入15mL由体积比为1:1的正己烷和丙酮组成的正己烷‑丙酮溶液，得到混合物，将容器密封后置于涡旋振荡仪上涡旋混合0.5～1min，随后将容器内混合物转移至超声波清洗仪中，在常温条件下以超声频率100Hz水浴超声萃取40～50min，随后将混合溶液放置于离心机中，以2000rpm的离心转速离心10～15min，取上清液；S3、土壤样品净化：将步骤S2中得到的上清液倒入已活化的层析柱中进行洗脱，层析柱上层为2g无水硫酸钠粉末，下层为2g硅胶粉末，并在层析柱下方放置旋转蒸发瓶用于收集洗脱液，洗脱结束后再使用15mL由体积比为9:1的正己烷和丙酮组成的正己烷‑丙酮溶液进行萃取，并收集萃取液；S4、土壤样品浓缩：将旋转蒸发瓶中收集到的洗脱液和萃取液置于旋转蒸发仪中，在40℃、100rpm条件下浓缩至干，移取2mL甲醇溶液润洗定容，随后倒入带有有机相滤头的玻璃注射器，过滤至液相小瓶中，得到土壤浓缩液；S5、HPLC分析：将步骤S4中装有土壤浓缩液的液相小瓶放入液相色谱仪的进样板上，设置进样量为20μL，采取梯度洗脱和双波长紫外检测器串联的方式分离检测土壤浓缩液中6种邻苯二甲酸酯PAEs，检测时间为30min，流动相为乙腈‑UP水，流动相流过色谱柱的流速为1mL/min；在一个检测周期中，流动相中乙腈‑UP水的比例为：0～11.5min内，乙腈/UP水＝75％/25％；11.5～13min内，乙腈/UP水＝85％/15％；13～27min内，乙腈/UP水＝95％/5％；27～30min内，乙腈/UP水＝75％/25％；在一个检测周期中，紫外线波长随时间的变化为：0～2.75min内，紫外线波长为290nm；2.75～5min内，紫外线波长为205nm；5～7min内，紫外线波长为290nm；7～10.5min内，紫外线波长为205nm；10.5～23min内，紫外线波长为290nm；23～26min内，紫外线波长为205nm；26～30min内，紫外线波长为290nm。2.根据权利要求1所述的一种测定土壤中邻苯二甲酸酯的高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述步骤S1中预处理的步骤为：将采集的土壤样品剔除砾石和动植物残体，置于阴凉处风干2～3周，将风干后的土壤样品再次剔除砾石和动植物残体并研磨，并过筛使用的筛网目数为20目。3.根据权利要求1所述的一种测定土壤中邻苯二甲酸酯的高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述步骤S3中层析柱的活化方法为：将总体积10mL的正己烷溶液分成二等份后，对层析柱先后进行两次淋洗，两次淋洗的时间间隔为10～15min。4.根据权利要求1所述的一种测定土壤中邻苯二甲酸酯的高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述步骤S3中无水硫酸钠粉末和硅胶粉末的粒径大小为200～300目，萃取时将正己烷‑丙酮溶液分成三等份，先后进行三次萃取，每次萃取的时间间隔为5～10min。5.根据权利要求1所述的一种测定土壤中邻苯二甲酸酯的高效液相色谱检