一种茶树WRKY转录因子基因及其抗寒应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115960916A(43)申请公布日2023.04.14(21)申请号202211253209.XA01H6/20(2018.01)(22)申请日2022.10.13(71)申请人安徽农业大学地址230000安徽省合肥市蜀山区长江西路130号(72)发明人童伟伊亮辉李方东夏恩华赵慧娟(74)专利代理机构合肥云道尔知识产权代理事务所(特殊普通合伙)34230专利代理师司楠(51)Int.Cl.C12N15/29(2006.01)C07K14/415(2006.01)C12N15/84(2006.01)A01H5/00(2018.01)权利要求书1页说明书6页序列表（电子公布）附图1页(54)发明名称一种茶树WRKY转录因子基因及其抗寒应用(57)摘要本发明公开了一种茶树WRKY转录因子基因及其抗寒应用，所述基因为茶树TEA031948基因，所述茶树TEA031948基因的核苷酸序列如序列表Seq_1所示。所述茶树TEA031948基因编码的蛋白序列如序列表Seq_2所示。通过反义寡核苷酸技术抑制TEA031948的表达加重了茶树叶片在低温下损伤程度，而将该基因超量表达并转化拟南芥能够显著提高拟南芥的耐寒性，说明该基因可提高茶树抗寒性。该基因的克隆分析将有利于探究WRKY转录因子在茶树抗寒过程中的作用，推动茶树抗寒遗传改良进程，促进茶产业的可持续发展，本发明具有很大的应用价值。CN115960916ACN115960916A权利要求书1/1页1.一种茶树WRKY转录因子基因，其特征在于：所述基因为茶树TEA031948基因，所述茶树TEA031948基因的核苷酸序列如序列表Seq_1所示。2.根据权利要求1所述的一种茶树WRKY转录因子基因，其特征在于：所述茶树TEA031948基因编码的蛋白序列如序列表Seq_2所示。3.茶树表达载体TEA031948‑pB2GW7，其特征在于：所述表达载体通过将Seq_1所示的片段酶切至载体pB2GW7获得。4.茶树WRKY转录因子基因用于提升植物的低温耐受性。2CN115960916A说明书1/6页一种茶树WRKY转录因子基因及其抗寒应用技术领域[0001]本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种茶树WRKY转录因子基因及其抗寒应用。背景技术[0002]茶树(Camelliasinensis(L.)O.Kuntze)是我国重要的经济作物，其叶片制成的茶叶在我们乃至世界人民的日常生活、经济和文化交流方面扮演着重要的作用。近年来，受越冬期及初春“霜冻”和“倒春寒”等恶劣天气影响，茶树极易受到低温伤害，严重时甚至导致死亡，制约了茶叶产量和品质的提高。低温已逐渐成为限制茶树南种北移、茶叶产能增效的主要因素之一，极大地影响着茶树的产量和经济价值，影响了茶产业的健康可持续发展。近年来的研究表明，WRKY转录因子在植物生长发育，次级代谢以及产物合成和植物抗逆调控中扮演重要角色。特别地，前期研究发现WRKY在植物抗逆以及防御反应中发挥了积极的作用，广泛参与植物生物与非生物胁迫响应。然而，WRKY转录因子在茶树抗寒过程中的作用，鲜有报道。茶树作为一种喜温畏寒植物，低温严重制约了茶叶的品质以及茶产业的发展。随着茶树基因组数据的公布，为我们从分子水平解析茶树WRKY转录因子夯实了数据基础。利用生物信息学以及分子生物学对茶树WRKY转录因子进行分析验证，揭示茶树WRKY转录因子在茶树低温胁迫响应中的作用，为茶树的抗逆工程育种提供更好的基础与证据。发明内容[0003]本发明的目的在于提供一种茶树WRKY转录因子基因及其抗寒应用，其丰富了茶树中转录因子的研究，为茶树抗寒机制提供了新思路，为实现茶树抗性性状育种提供了理论和实际参考基础。[0004]在本发明的一个方面，本发明提出了一种茶树WRKY转录因子基因。根据本发明的实施例，所述基因为茶树TEA031948基因，所述茶树TEA031948基因的核苷酸序列如序列表Seq_1所示。[0005]另外，根据本发明上述实施例的一种茶树WRKY转录因子基因，还可以具有如下附加的技术特征：[0006]在本发明的一些实施例中，所述茶树TEA031948基因编码的蛋白序列如序列表Seq_2所示。[0007]在本发明的另一方面，本发明提出了茶树表达载体TEA031948‑pB2GW7，根据本发明的实施例，所述表达载体通过将Seq_1所示的片段酶切至载体pB2GW7获得。[0008]在本发明的另一方面，本发明提出了茶树WRKY转录因子基因用于提升植物低温耐受性。[0009]与现有技术相比，本发明的有益效果是：[0010]本发明中，首次克隆并验证了一个调控茶树响应低温胁迫的WRKY类转录因子基因TEA031948，该转录因子在