一株冠菌素高产菌株、发酵方法及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN116004473A(43)申请公布日2023.04.25(21)申请号202310111703.0A01G7/06(2006.01)(22)申请日2023.02.14A01N37/46(2006.01)A01P21/00(2006.01)(83)生物保藏信息A01P1/00(2006.01)CGMCCNO.262772022.12.26A01P3/00(2006.01)(71)申请人成都新朝阳作物科学股份有限公司A01P7/00(2006.01)地址611631四川省成都市蒲江县鹤山镇C12R1/38(2006.01)工业五路35号(72)发明人李云龙王艳玲孙劲松任丹何其明(74)专利代理机构成都华风专利事务所(普通合伙)51223专利代理师杜朗宇(51)Int.Cl.C12N1/20(2006.01)C12P13/02(2006.01)权利要求书1页说明书7页附图5页(54)发明名称一株冠菌素高产菌株、发酵方法及其应用(57)摘要本发明公开了一株冠菌素高产菌株、发酵方法及其应用。本发明通过对野生菌株进行诱变选育，并对发酵工艺进行优化，使冠菌素的发酵产量大幅提升，适于工业推广应用；本发明菌株得到的冠菌素可有效提升作物品质和产量，能够缩短农产品上市的生产周期，有效的提高了生产效率。CN116004473ACN116004473A权利要求书1/1页1.丁香假单胞菌(Pseudomonassyringae)XZY01，该菌株保藏编号为CGMCCNo.26277。2.一种冠菌素高产的发酵方法，其特征在于，利用权利要求1所述的菌株进行发酵，得到冠菌素。3.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，所述菌株经平板培养基培养，摇瓶种子培养及通气发酵，获得含有冠菌素的发酵液。4.根据权利要求3所述的发酵方法，其特征在于，所述平板培养基为YPG培养基。5.根据权利要求3所述的发酵方法，其特征在于，所述平板培养基培养的条件为23～30℃培养0.5～2天。6.根据权利要求3所述的发酵方法，其特征在于，使用YPG培养液进行种子培养；所述培养条件为23～30℃振荡培养0.5～2天。7.根据权利要求3所述的发酵方法，其特征在于，将摇瓶种子培养液里的菌株接种到GC培养液里进行通气发酵。8.根据权利要求7所述的发酵方法，其特征在于，所述通气发酵的条件为：在16～25℃，转速500～1000rpm，通气量12～18L/min，罐压0.03～0.07Mpa条件下发酵培养。9.权利要求2～8任一项所述发酵方法得到的冠菌素在植物抗逆、抗病虫害、生长调节、提高农产品品质中的应用。10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述冠菌素在促进果实转色或增加果实糖度中的应用。2CN116004473A说明书1/7页一株冠菌素高产菌株、发酵方法及其应用技术领域[0001]本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一株冠菌素高产菌株、发酵方法及其应用。背景技术[0002]冠菌素(coronatine，COR)是茉莉酸(JA)的结构类似物，是全球第一个实现产业化的茉莉酸类分子信号调控剂，它是由一个含聚酮的冠菌酸(2‑甲酸基,4‑乙基,7‑羰基二环[4.3.0]壬烷，coronafacicacid，CFA)和一个含α‑氨基酸的冠烷酸(1‑氨基,1‑甲酸基,3‑乙基环丙烷，coronamicacid，CMA)通过酰胺键连接而成的新型植物生长调节物质，其分子式为C18H25NO4，分子量为319，具有以下结构式：[0003][0004]1971年Ichihara发现杂草经常发生黄化枯萎。1976年Ichihara发现，杂草发黄枯萎是由一种微生物导致的，并从这种微生物中提取了一种物质，其是导致杂草黄化的主要物质。该物质由成都新朝阳作物科学股份有限公司牵头，经全国农药标准化技术委员会审定，于2013年5月3日首次命名为‘冠菌素’，至此，正式获得冠菌素的全球通用名。研究表明，冠菌素信号分子参与植物生长发育众多生理过程的调控，尤其是作为环境信号分子能有效地诱导植物对病原菌、食草动物及非生物胁迫等的防御反应，促进一系列防御基因的表达和防御反应化学物质的合成，并调节植物的“免疫”和“应激”反应。[0005]目前，关于冠菌素的生理作用研究已经取得了一定的研究进展，它具有促进细胞分化，提高叶绿素含量，调控植物生长，抑制细胞衰老等生理功能。冠菌素是茉莉酸的结构模拟物，但在某些功能上比茉莉酸效果更显著，活性可高达茉莉酸类物质的100～10000倍，用量少且效果显著，使用后无残留，对环境和农产品更安全，广泛适用于有机和绿色农业生产，是一种潜力极大的环境友好型植物生长调节剂。[0006]冠菌素合成有两种方法，一种是化学合成法，但目前费用较高，且产量始