一种鹿角杜鹃的快繁方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102090337A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102090337A(43)申请公布日2011.06.15(21)申请号201010584915.3(22)申请日2010.12.13(71)申请人江苏省农业科学院地址210014江苏省南京市玄武区钟灵街50号(72)发明人刘晓青刘晓宏苏家乐李畅(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页说明书3页(54)发明名称一种鹿角杜鹃的快繁方法(57)摘要本发明涉及一种鹿角杜鹃的组织培养快速繁殖方法。以WPM为基本培养基，通过对鹿角杜鹃的离体培养，利用不同激素配比调控，建立起鹿角杜鹃的组织培养快速繁殖体系。具体步骤依次为外植体的选择、消毒、初代培养、增殖培养、壮苗生根培养和移栽。获得能保持原植株基因型、优良观赏特性，且分化良好的试管苗。其中，外植体初代诱导培养基为WPM+IBA0.15mg/L+TDZ0.3mg/L+蔗糖30g/L，pH5.6；不定芽增殖培养基为WPM+IBA0.15mg/L+TDZ0.3mg/L+蔗糖30g/L，pH5.6；壮苗生根培养培养基为1/2WPM+IBA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+活性炭0.3g/L，pH5.6。本发明大大提高了鹿角杜鹃繁殖速度，适用于鹿角杜鹃的工厂化商业生产。CN102937ACCNN110209033702090342A权利要求书1/1页1.一种鹿角杜鹃的快繁方法，其特征在于通过对鹿角杜鹃的离体培养，利用不同激素配比调控，建立起鹿角杜鹃的组织培养快速繁殖体系，所述方法包括以下4个培养阶段：(1)取消毒干净的鹿角杜鹃外植体除去茎尖和茎段上变黑的部分，放入装有滤纸的无菌培养皿中吸干表面水分，斜插于外植体初代诱导培养基(WPM+IBA0.15mg/L+TDZ0.3mg/L+蔗糖30g/L)上，每瓶接种1～2个外植体；(2)将诱导出的不定芽转入丛生芽增殖培养基中进行增殖培养，丛生芽增殖培养基与外植体启动培养的培养基相同，为WPM+IBA0.15mg/L+TDZ0.3mg/L+蔗糖30g/L；不定芽的基部先长出愈伤组织，从愈伤组织分化出丛生苗，将小丛生苗团再转接到增殖培养基中继代增殖，每瓶接10个左右，每个芽可增殖5倍以上，如此反复，可获得大量的丛生苗；(3)增殖后生长健壮的丛生芽剪成单株，转入生根培养基(1/2WPM+IBA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+活性炭0.3g/L)进行生根培养，培养40d左右长出长短不等的不定根，生根率为85.4％；(4)具有4条以上根的生根小苗，移入温室，常温、自然光下松口炼苗1～2d后开瓶出苗移栽，洗去附着在根部的培养基，定植在珍珠岩和草炭土按体积比1∶1配制的基质中，基质预先用0.1％的多菌灵消毒处理，浇透水，覆盖农用膜保湿，光照过强时适当遮荫，培养1周左右后逐渐揭开薄膜，通风透气。2.根据权利要求1所述的鹿角杜鹃组织培养快速繁殖方法，其特征是取生长健壮、无病虫害的鹿角杜鹃嫩枝做外植体，用软毛刷蘸洗洁精仔细刷洗，尤其是叶腋处，再用自来水淋洗10～12h。3.根据权利要求1所述的鹿角杜鹃组织培养快速繁殖方法，其特征是在无菌室超净台上，用70％酒精处理淋洗过的外植体30s，无菌水冲洗一次；再用0.1％的HgCl2(氯化汞)浸泡茎尖5min、茎段8min，期间不停地摇动瓶子，使外植体充分与杀菌液接触，之后无菌水冲洗5～6次。4.根据权利要求1所述的鹿角杜鹃组织培养快速繁殖方法，其特征是初代培养、增殖培养、生根培养的培养基均加入琼脂5g/L，pH5.6，每个三角瓶分装30mL，于121℃高温高压灭菌20min，培养室温度为(24±1)℃，光照时间12h/d，光照强度为2000LX。2CCNN110209033702090342A说明书1/3页一种鹿角杜鹃的快繁方法技术领域[0001]本发明涉及一种鹿角杜鹃的组织培养快速繁殖方法，属于生物技术领域。背景技术[0002]杜鹃花属是杜鹃花科最大的属，含物种约960种，广泛分布于欧洲、亚洲、北美洲，主产东亚和东南亚。中国是世界野生杜鹃花种质资源现代分布分化的中心和种群量最大的国家，约542种，主产西南、华南地区，花色艳丽多姿，是著名的观赏植物，鹿角杜鹃就是其中之一。[0003]鹿角杜鹃(Rhododendronlatoucheae)，别名岩杜鹃，因其枝干曲折，状如鹿角，而得名。常绿灌木或小乔木，喜温和气候，喜酸性土；3～4月开花，花大色艳，花期较长，有香味。自然垂直分布范围广，从100～1200m的山地松林下、灌丛都可生长，与其它杜鹃属的其它种相比，鹿角杜鹃是杜鹃属中垂直分布最宽的种类之一。随着花木市场蓬勃发展，有部分采挖、移植野生鹿角杜鹃时直接从山上