一种杜鹃花金踯躅的组培快繁方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103651115103651115A(43)申请公布日2014.03.26(21)申请号201310538539.8(22)申请日2013.11.05(71)申请人云南远益园林工程有限公司地址671003云南省大理白族自治州大理市大理古城玉秀路98号(72)发明人刘国强李奋勇田晓玲张长芹(74)专利代理机构昆明今威专利商标代理有限公司53115代理人赛晓刚(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页权利要求书1页说明书4页说明书4页(54)发明名称一种杜鹃花金踯躅的组培快繁方法(57)摘要本发明涉及一种杜鹃花金踯躅的组织培养快繁方法，具体地说，涉及植物生物技术中植物组织培养方法。组培快繁包括选择外植体、消毒、丛生芽诱导、继代并生根培养和试管苗移栽步骤，选取金踯躅的茎段为外植体，外植体取金踯躅的茎段，丛芽诱导培养基为改良Anderson+2.0mg/lZT+0.1mg/lNAA，pH5.1-5.2；继代培养基为改良Anderson+1.0mg/lZT+0.1mg/lNAA；生根培养基为1/2改良Anderson+0.5mg/lNAA。使用该方法可达到一个茎段诱导4-5或者更过的丛枝，45天生根率达77%，移栽成活率90%，极大地提高了金踯躅的快繁能力，为新品种金踯躅的保存和规模化生产提供了技术支撑。CN103651115ACN10365ACN103651115A权利要求书1/1页1.一种杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于组培快繁包括选择外植体、消毒、丛生芽诱导、继代并生根培养和试管苗移栽步骤，外植体取金踯躅的茎段，丛芽诱导培养基为改良Anderson+2.0mg/lZT+0.1mg/lNAA，pH5.1-5.2；继代培养基为改良Anderson+1.0mg/lZT+0.1mg/lNAA；生根培养基为1/2改良Anderson+0.5mg/lNAA。2.根据权利要求1所述的杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于所述外植体的消毒先用5%洗衣粉水浸泡清洗20min，再用无菌水冲洗至无泡沫，然后采用75%的酒精灭菌30s，无菌水冲洗3遍后再用0.1%升汞溶液进行表面消毒8min，分两次进行，第一次消毒5min，不断震荡后用无菌水清洗3-5遍，再用0.1%升汞消毒3min后用无菌水清洗3-5遍。3.根据权利要求1所述的杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于所述丛芽诱导和继代及生根培养的温度为20-23℃，湿度30-45%。4.根据权利1所述的杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于所述丛芽诱导和继代及生根培养的光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX。5.根据权利要求1所述的杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于试管苗移栽是生根组培苗在培养瓶内培养45天以后，炼苗7天，再移栽到温室大棚。6.根据权利要求1或5所述的杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于移栽基质为1份珍珠岩+1份腐殖土，pH为5.1-5.2。7.根据权利要求1所述的杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于试管苗移栽在早上8-11点以前，温度为18-25℃下进行。8.根据权利要求书1-7中任意一项所述的杜鹃花金踯躅的组培快繁方法，其特征在于组培快繁方法具体操作是：选取金踯躅茎段为外植体，用5%的洗衣粉水进行浸泡和冲洗，然后用75%酒精消毒30s，后用0.1%升汞溶液进行消毒8min，分两次进行，第一次5min，不断震荡后用无菌水清洗3-5遍，再用0.1%升汞消毒3分钟后用无菌水清洗3-5遍；将金踯躅茎段置于消毒后的滤纸上，切取一叶一段，接种至诱导培养基改良Anderson+2.0mg/lZT+0.1mg/lNAA，pH5.1-5.2，温度20-23℃，湿度30-45%，光照条件为自然光2000-2500LUX+人工辅助光1500-2000LUX下培养，长出丛芽后转接入改良Anderson+1.0mg/lZT+0.1mg/lNAA中进行增殖、继代和生根，继代3-4次，每次30天；将继代苗转入生根培养基，茎段未木质化，生根培养基为1/2改良Anderson+0.5mg/lNAA，45天生根培养后进行组培苗炼苗7天后得试管苗，将试管苗移栽到基质为1份珍珠岩+1份腐殖土，pH为5.1-5.2，湿度50-60%的大棚内，每天早晚各喷水一次。2CN103651115A说明书1/4页一种杜鹃花金踯躅的组培快繁方法技术领域[0001]本发明涉及一种杜鹃花金踯躅的组织培养快繁方法，具体地说，涉及植物生物技术中植物组织培养方法。背景技术[0002]“金踯躅”是从羊踯躅实生苗中选育出的变异品种。羊踯躅隶属于杜鹃花科(Ericaceae)