杜仲木脂素及杜仲提取物在制备Hsp90α抑制剂和抗肿瘤药物中的应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108042600A(43)申请公布日2018.05.18(21)申请号201711443674.9(22)申请日2017.12.27(71)申请人中南大学地址410083湖南省长沙市岳麓区麓山南路932号(72)发明人周露萍欧阳冬生黄琪陈露露谭志荣周淦(74)专利代理机构长沙正奇专利事务所有限责任公司43113代理人卢宏蒋尊龙(51)Int.Cl.A61K36/46(2006.01)A61P35/00(2006.01)A61K129/00(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图2页(54)发明名称杜仲木脂素及杜仲提取物在制备Hsp90α抑制剂和抗肿瘤药物中的应用(57)摘要本发明公开一种杜仲木脂素及杜仲提取物在制备Hsp90α抑制剂和抗肿瘤药物中的应用，特别是在制备热休克蛋白90α(heatshockprotein90，Hsp90α)选择性C-端抑制剂及用于抗乳腺癌和前列腺癌中的应用。本发明发现用杜仲为原料提取制备而成的杜仲木脂素及其提取物可以抑制重组人热激蛋白90αC-端酶活性，与阳性对照药物新生霉素相比，杜仲木脂素显示出更优的抗肿瘤活性。CN108042600ACN108042600A权利要求书1/1页1.杜仲木脂素及杜仲提取物在制备抗肿瘤药物上的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为乳腺癌和前列腺癌。3.杜仲木脂素及杜仲提取物在制备热休克蛋白90α抑制剂上的应用。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述热休克蛋白90α抑制剂为热休克蛋白90αC-端抑制剂。5.如权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于，所述杜仲木脂素的制备方法为：取杜仲树皮，用体积分数为60-70％的乙醇回流提取，提取液浓缩后用大孔吸附树脂柱层析，柱层析的方法为：使用大孔吸附树脂拌样上样，先水洗2.5-4倍柱体积，再用质量分数为1％的氨水继续洗2.5-4倍柱体积，再水洗至中性，再用体积分数为15-25％的乙醇洗脱2-4倍柱体积，用体积分数为40-50％的乙醇洗2-3倍柱体积，将体积分数为40-50％的乙醇洗脱得到的洗脱液浓缩，干燥，得到杜仲木脂素。6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，大孔吸附树脂为D101大孔吸附树脂。7.如权利要求5所述的应用，其特征在于，用体积分数为60-70％的乙醇回流提取两次，将两次提取得到的提取液合并。2CN108042600A说明书1/5页杜仲木脂素及杜仲提取物在制备Hsp90α抑制剂和抗肿瘤药物中的应用技术领域[0001]本发明属于中药提取物应用技术领域，具体涉及杜仲木脂素及杜仲提取物在制备Hsp90α抑制剂和抗肿瘤药物中的应用，特别设涉及以杜仲为原料提取制备而成的杜仲木脂素及其提取物在制备选择性Hsp90αC-端抑制剂中的应用。背景技术[0002]杜仲(EucommiaulmoidesOliv.)又名木棉、思仙、思仲、思锦树，为单科单属落叶乔木，是第三世纪冰川运动遗留下来的“活化石”。杜仲是我国特有的经济树种，其野生分布中心在中国的中部地区，并广泛种植于湖南、湖北、河南、山西、四川、贵州、云南等省。杜仲在我国有2000多年的药用历史。《神农本草经》和《本草纲目》均将杜仲列为上品，并记载“杜仲色紫，味甘而辛，其性湿平，甘温能补，微辛能润，故能入肝而补肾；主治腰膝痛，补中益精气，坚筋骨，强志，除阴下痒湿，小便余沥；久服，轻身耐劳”。现代研究表明杜仲具有降血压、降血脂、降血糖、抗肿瘤、抗菌抗病毒、抗炎、抗氧化、保肝护肾、抗骨质疏松等药理作用。[0003]热休克蛋白90(heatshockprotein90，Hsp90)作为一个抗癌分子靶点已经有十几年的历史。HSP90是细胞内最活跃的伴随蛋白之一，不仅广泛参与多种蛋白的折叠、活化和重组，也调控EGFR、HER2、CDK4、C-Raf、B-Raf、AKT、MET、BCR-ABL等多种蛋白的转运，维持细胞的信号转导。抑制HSP90的表达将阻止这些下游肿瘤基因的代谢和传导，所以理论上HSP90是一个很理想的分子靶点。2008年，施贵宝以高达1.9亿美元的价格收购了Bosan生物科学，后者旗下的HSP90抑制剂是促使施贵宝这次收购的重要原因之一。[0004]Hsp90抑制剂按照结合位点的不同可大体分为N-末端抑制剂、C-末端抑制剂以及结合位点未明确的抑制剂。第一代的HSP90N-端抑制剂主要有Geldanamyvin(GM)和Radicicol(RD)两个代表性化合物。这两个来自天然产物的HSP90抑制剂都是作用于ATP与N端调控盒的结合。但是一代抑制剂有两个致命的缺点：体内稳定性差和严重的肝毒性反应。因此，药物化学家长期以来致力于第二代抑制剂的研发，尤其着重改善一代抑制剂的