一种利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108689847A(43)申请公布日2018.10.23(21)申请号201810898013.3(22)申请日2018.08.08(71)申请人安徽省美极调味食品有限公司地址236500安徽省阜阳市界首市鸭王工业区(72)发明人王启标(74)专利代理机构合肥中博知信知识产权代理有限公司34142代理人肖健(51)Int.Cl.C07C67/48(2006.01)C07C67/56(2006.01)C07C69/732(2006.01)B01J20/26(2006.01)C08G81/00(2006.01)权利要求书1页说明书6页(54)发明名称一种利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法(57)摘要本发明公开了一种利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，涉及植物提取技术领域。本发明以环氧树脂和壳聚糖为原料，通过交联聚合制成纯化树脂，该树脂内部形成了一层壳聚糖吸附膜，通过树脂和吸附膜的双层吸附，可以将绿原酸中的杂质完全吸附在树脂中，同时不破坏绿原酸的结构和生理活性；聚谷氨酸、黄烷醇为原料合成的稳定剂能够增强绿原酸对外界高温、高氧的抗性，保护绿原酸不失活；本发明采用超声波辅助提取，大大缩短提取时间，提升了绿原酸提取率，操作简单、高效，适合工业化生产。CN108689847ACN108689847A权利要求书1/1页1.一种利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)选择5-8月份采摘的杜仲鲜叶经过打浆机打浆；(2)加入4-8倍量的40-60℃，pH为4-7的纯水后，采用20-40kHz频率超声波辅助提取30-60min，过滤得到杜仲绿原酸粗提液；(3)在杜仲绿原酸粗提液中加入0.1-0.3％重量的稳定剂，30℃搅拌10-20min；(4)将步骤3中的杜仲绿原酸粗提液以5.5-6.5m3/h的流速，流过纯化树脂，再用纯化树脂床容积0.5-1倍的无水乙醇淋洗树脂，将少数残留在树脂中的绿原酸淋出，收集树脂流出后的滤液；(5)将步骤4中的滤液在-0.05-0.09MPa、40-50℃下进行减压浓缩，直至溶剂完全回收，-0.05-0.09MPa、40-60℃真空干燥，即得到绿原酸成品。2.根据权利要求1所述利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，其特征在于，所述纯化树脂的制备方法为：(1)将壳聚糖固体投入到反应釜中，加入质量分数5％的醋酸溶液，制得壳聚糖醋酸溶液待用；(2)将环氧氯丙烷加入到无水乙醇中，加热至回流状态，保温搅拌10-20min，然后加入三羟甲基乙烷和引发剂，继续回流搅拌1-2h；接着加入步骤1中的壳聚糖醋酸溶液和离子交联剂，继续回流搅拌1-2h；(3)向步骤2中体系加入改性剂，降温至50-55℃，充分混合后于微波频率2450MHz、功率700W下微波处理5-10min，静置15-30min后继续微波处理5-10min，过滤，沉淀用去离子水和无水乙醇洗去杂质，送入100-110℃干燥箱中干燥至恒重，即得到纯化树脂。3.根据权利要求2所述利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，其特征在于：所述壳聚糖固体、5％的醋酸溶液的质量比为20-30：30-50。4.根据权利要求2所述利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，其特征在于：所述环氧氯丙烷、三羟甲基乙烷、引发剂、离子交联剂、改性剂的质量比为10-15：15-20：1-5：1-5：1-5。5.根据权利要求2所述利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，其特征在于：所述引发剂选自过氧化苯甲酰或过氧化月桂酰。6.根据权利要求2所述利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，其特征在于：所述离子交联剂选自焦磷酸钠、三聚磷酸钠、四聚磷酸钠中的一种。7.根据权利要求2所述利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，其特征在于：所述改性剂为茶多酚、海藻酸钠、聚乙二醇400的混合物，质量比为5-10：5-10：10-15。2CN108689847A说明书1/6页一种利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法技术领域：[0001]本发明涉及植物提取技术领域，具体涉及一种利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法。背景技术：[0002]杜仲是杜仲科杜仲属植物，落叶乔木。我国适应杜仲生长的地域十分广阔，可用于种植杜仲的土地达1000万公顷以上，目前全国杜仲栽培面积约35万公顷，占世界杜仲种植总面积的99％以上，具有独特的资源优势，我国每年可产叶400万吨。[0003]绿原酸属于苯丙素类化合物，是一类含有羧基和邻二酚基的有机酸，化学名为3-咖啡酰奎尼酸。绿原酸广泛存在于高等双子叶植物和蕨类植物中，主要存在于忍冬科忍冬属、菊科蒿属植物中，其中含量较高的植物主要有金银花、杜仲、向日葵、可可树、咖啡