具有改善的活性谱的多肽的杀昆虫组合及其用途.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109072249A(43)申请公布日2018.12.21(21)申请号201780021268.5(74)专利代理机构中国专利代理(香港)有限公司720(22)申请日2017.04.1901代理人翟建伟黄希贵(30)优先权数据62/3246522016.04.19US(51)Int.Cl.C12N15/82(2006.01)(85)PCT国际申请进入国家阶段日2018.09.28(86)PCT国际申请的申请数据PCT/US2017/0282582017.04.19(87)PCT国际申请的公布数据WO2017/184673EN2017.10.26(71)申请人先锋国际良种公司地址美国依阿华州申请人纳幕尔杜邦公司(72)发明人A.陆G.吴权利要求书2页说明书133页序列表174页附图16页(54)发明名称具有改善的活性谱的多肽的杀昆虫组合及其用途(57)摘要本公开提供衍生自苏云金芽孢杆菌菌株的核酸及其变体和片段，该核酸及其变体和片段编码变体多肽，该变体多肽针对包括鳞翅目和鞘翅目的昆虫有害生物具有增加的杀有害生物活性。本公开的具体实施例提供编码杀有害生物蛋白的分离的核酸、杀有害生物组合物、DNA构建体、以及包含实施例的核酸的经转化的微生物和植物。这些组合物可应用于控制有害生物特别是植物有害生物的方法中。CN109072249ACN109072249A权利要求书1/2页1.一种DNA构建体，其包含：编码多核苷酸的核酸分子，该多核苷酸编码具有杀昆虫活性的变体Cry1B多肽；以及选自包含以下各项的组的核酸分子中的一个或多个：i)编码多核苷酸的核酸分子，该多核苷酸编码具有杀昆虫活性的PtIP-50和PtIP-65多肽；以及ii)编码多核苷酸的核酸分子，该多核苷酸编码具有杀昆虫活性的PtIP-83多肽。2.如权利要求1所述的DNA构建体，其中编码变体Cry1B多肽的核酸分子、编码PtIP-50和PtIP-65多肽的核酸分子、以及编码PtIP-83多肽的核酸分子各自可操作地连接到异源调节元件。3.如权利要求1所述的DNA构建体，其中该变体Cry1B多肽包含与如SEQIDNO：3、SEQIDNO：5、SEQIDNO：7、SEQIDNO：9、SEQIDNO：11、SEQIDNO：13、SEQIDNO：15、SEQIDNO：17、SEQIDNO：19、SEQIDNO：21、SEQIDNO：23、SEQIDNO：25、SEQIDNO：27、SEQIDNO：29、SEQIDNO：31、SEQIDNO：33、SEQIDNO：35、SEQIDNO：37、SEQIDNO：39、SEQIDNO：41、SEQIDNO：43和SEQIDNO：45中列出的序列之一具有至少95％同一性的序列。4.如权利要求1所述的DNA构建体，其中该PtIP-83多肽包含与如SEQIDNO：62、SEQIDNO：64、和SEQIDNO：66中列出的序列之一具有至少95％同一性的序列。5.如权利要求1所述的DNA构建体，其中该变体PtIP-50多肽包含与如SEQIDNO：88-115中列出的序列之一具有至少95％同一性的序列。6.如权利要求1所述的DNA构建体，其中该变体PtIP-65多肽包含与如SEQIDNO：67-87中列出的序列之一具有至少95％同一性的序列。7.一种转基因植物，其包含：编码多核苷酸的核酸分子的分子堆叠物，该多核苷酸编码具有杀昆虫活性的变体Cry1B多肽；以及选自包含以下各项的组的核酸分子中的一个或多个：i)编码多核苷酸的核酸分子，该多核苷酸编码具有杀昆虫活性的PtIP-50和PtIP-65多肽；以及ii)编码多核苷酸的核酸分子，该多核苷酸编码具有杀昆虫活性的PtIP-83多肽。8.如权利要求7所述的转基因植物，其中编码变体Cry1B多肽的核酸分子、以及编码PtIP-50和PtIP-65多肽的核酸分子、和/或编码PtIP-83多肽的核酸分子各自可操作地连接到异源调节元件。9.如权利要求7所述的转基因植物，其中该PtIP-83多肽包含与如SEQIDNO：3、SEQIDNO：5、SEQIDNO：7、SEQIDNO：9、SEQIDNO：11、SEQIDNO：13、SEQIDNO：15、SEQIDNO：17、SEQIDNO：19、SEQIDNO：21、SEQIDNO：23、SEQIDNO：25、SEQIDNO：27、SEQIDNO：29、SEQIDNO：31、SEQIDNO：33、SEQIDNO：35、SEQIDNO：37、SEQIDNO：39、SEQIDNO：41、SEQIDNO：43和SEQIDNO：45中列出的序列之一具有至少95％同一性的序列。10.如权利要求7所述的转基因植物，其中该P