负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系与其构建方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109224128A(43)申请公布日2019.01.18(21)申请号201710558780.5(22)申请日2017.07.11(71)申请人中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所地址215123江苏省苏州市苏州工业园区独墅湖高教区若水路398号(72)发明人戴建武陈艳艳韩洁(74)专利代理机构南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙)32256代理人王锋(51)Int.Cl.A61L27/24(2006.01)A61L27/34(2006.01)A61L27/54(2006.01)A61L27/50(2006.01)权利要求书2页说明书8页附图5页(54)发明名称负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系与其构建方法(57)摘要本发明公开了一种负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系及其构建方法。所述的构建方法包括：将胶原支架于包含一种以上融合有胶原特异性结合肽的生物活性因子溶液中浸渍后清洗，除去未结合在所述胶原支架上的生物活性因子；以及，将胶原支架置入高分子溶液中并反应；对胶原支架进行清洗后，再置入胶原溶液中浸渍，之后再进行清洗。本发明提供的负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系生物相容性良好，可实现生物活性因子的长期缓慢并可控的释放，释放量和释放速率稳定可控，可杜绝“突释”现象，同时其构建方法简单，可控性好，反应条件温和，在生物组织损伤修复、药物的缓控释等方面具有巨大的应用潜力。CN109224128ACN109224128A权利要求书1/2页1.一种负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系的构建方法，其特征在于包括：(1)将胶原支架于包含一种以上融合有胶原特异性结合肽的生物活性因子溶液中浸渍；(2)清洗除去未结合在所述胶原支架上的生物活性因子；(3)将经步骤(2)处理后的胶原支架置入至少含有能与胶原结合的可降解的高分子的溶液中并反应；(4)对经步骤(3)处理后的胶原支架进行清洗；(5)将经步骤(4)处理后的胶原支架于胶原溶液中浸渍；(6)对经步骤(5)处理后的胶原支架进行清洗。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：所述胶原支架包括胶原海绵支架、胶原束或胶原膜，优选为胶原束。3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：所述融合有胶原特异性结合肽的生物活性因子至少选自CBD-BDNF，CBD-bFGF和CBD-VEGF中的任意一种或多种的组合；优选的，所述生物活性因子选自CBD-BDNF，CBD-bFGF和CBD-VEGF中的两种以上的组合；优选的，步骤(1)中所述生物活性因子溶液中生物活性因子的浓度在1ug/ml以上，优选为10ug/ml～100ug/ml，尤其优选为20ug/ml～50ug/ml。4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：所述高分子包括PEG、海藻酸钠、肝素中的任意一种或多种的组合；优选的，步骤(3)中所述的高分子的溶液所含PEG的浓度为0.1mg/ml～10mg/ml，优选为1mg/ml～5mg/ml，尤其优选为1mg/ml～3mg/ml；优选的，步骤(3)中所述的高分子的溶液所含海藻酸钠的浓度为0.1mg/ml～10mg/ml，优选为1mg/ml～5mg/ml，尤其优选为1mg/ml～3mg/ml；优选的，步骤(3)中所述的高分子的溶液所含肝素的浓度为0.1mg/ml～10mg/ml，优选为1mg/ml～5mg/ml，尤其优选为1mg/ml～3mg/ml。5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在：所述的构建方法还包括步骤(7)：重复步骤(1)～步骤(6)的操作n次，n为自然数，优选的2≤n≤50；优选的，所述的构建方法还包括步骤(8)：重复步骤(1)～步骤(2)的操作或重复步骤(1)～步骤(4)的操作。6.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)包括：将胶原支架于所述生物活性因子溶液中浸渍10min～100min，优选为20min～50min；和/或，步骤(3)包括：将经步骤(2)处理后的胶原支架置入所述高分子溶液中并反应10min～100min，优选为20min～50min；和/或，步骤(5)包括：将经步骤(4)处理后的胶原支架于胶原溶液中浸渍10min～100min，优选为20min～50min；和/或，所述步骤(5)中胶原溶液的浓度为0.5mg/ml-5mg/ml，优选为1mg/ml-3mg/ml。7.由权利要求1-6中任一项所述方法构建的负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系。8.一种负载生物活性因子的胶原支架的缓释体系，其特征在于包括：胶原支架，直接结合于胶原支架上的一种以上融合有胶原特异性结合肽的生物活性因子，以及依次于胶原支架上自组装形成的至少一高分子材料层和至少一胶原层，且至少部分的所述生物