一种负载鸡血藤的Ⅰ型/Ⅲ型胶原复合支架.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109289088A(43)申请公布日2019.02.01(21)申请号201811258469.XA61L27/54(2006.01)(22)申请日2018.10.26A61L27/36(2006.01)(71)申请人福州大学地址350002福建省福州市鼓楼区工业路523号(72)发明人王建华王营营黄晨光孙晓敏张其清(74)专利代理机构福州元创专利商标代理有限公司35100代理人蔡学俊(51)Int.Cl.A61L27/24(2006.01)A61L27/56(2006.01)A61L27/58(2006.01)A61L27/50(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图3页(54)发明名称一种负载鸡血藤的Ⅰ型/Ⅲ型胶原复合支架(57)摘要本发明公开一种负载鸡血藤的Ⅰ型/Ⅲ型胶原复合支架。该支架以牛源型胶原蛋白、重组人源型胶原蛋白、鸡血藤和PLGA为原料制成，制备过程包括包载鸡血藤的PLGA微球制备、Ⅰ型/Ⅲ型胶原复合支架的制备以及包载鸡血藤PLGA微球的负载等步骤。本发明制备的复合支架综合了Ⅰ型胶原带状纤维结构和Ⅲ型胶原网状纤维结构特点，制备的复合支架具有适宜的三维网络结构、良好的生物相容性、无毒性、可降解性和免疫原性低的特点，并结合了鸡血藤对骨性关节炎的治疗作用，是一种较好的适于骨关节炎软骨缺损修复及治疗的医用材料。CN109289088ACN109289088A权利要求书1/1页1.一种用于骨关节炎软骨缺损修复的负载鸡血藤的Ⅰ型/Ⅲ型胶原复合支架，其特征在于：以牛源型胶原蛋白和重组人源型胶原蛋白为原料制得，上述0.8wt.%的牛源型胶原蛋白溶液、0.8wt.%的重组人源型胶原蛋白溶液质量比分别为1-3:3-1。2.根据权利要求1所述的负载鸡血藤的Ⅰ型/Ⅲ型胶原复合支架，其特征在于：所述型胶原蛋白源于牛腱，所述型胶原蛋白源于利用基因工程经过酵母菌发酵得出的产物。3.一种如权利要求1所述的负载鸡血藤的Ⅰ型/Ⅲ型胶原复合支架的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）分别将型胶原蛋白、型胶原蛋白溶于丙二酸中制备成一定浓度的型胶原蛋白溶液和型胶原蛋白溶液；（2）将步骤（1）所得的型胶原蛋白溶液和型胶原蛋白溶液混合，搅拌均匀，冷冻干燥后浸泡在交联剂中进行交联；（3）交联后反复用去离子水清洗，二次冷冻干燥后得到未负载鸡血藤的Ⅰ型/Ⅲ型胶原复合支架；（4）制备包载鸡血藤的PLGA微球；（5）将步骤（4）制备的包载鸡血藤的PLGA微球按1.5mg/cm2的负载量用1mL注射器均匀注射至步骤（3）制备的支架内部，再次冷冻干燥后即得到负载鸡血藤的Ⅰ型/Ⅲ型胶原复合支架。4.根据权利要求3所述的一种负载鸡血藤的Ⅰ型/Ⅲ型胶原复合支架制备方法，其特征在于：所述包载鸡血藤的PLGA微球制备方法如下：（1）准确称取0.06gPLGA，溶于1.2mL二氯甲烷中，置于4℃冰箱密封保存备用；（2）准确称量0.5mg鸡血藤置于10mL超纯水中，在37℃下使其完全溶解；（3）再准确称取0.09gPVA置于9mL超纯水中，在60℃水浴中使其完全溶解；（4）取步骤（2）所述鸡血藤溶液600uL缓慢注入步骤（1）所述PLGA溶液中；（5）将步骤（4）所述混合液体用探头振幅为35%、3mm锥形探头的细胞破碎仪于冰水浴中乳化2min，形成初乳；（6）将步骤（5）中形成的初乳立即倒入步骤（3）PVA溶液中，然后用步骤（5）中的细胞破碎仪于冰水浴中乳化2min，形成复乳；（7）将步骤（6）所述复乳充分离心，弃上清液，再用超纯水反复冲洗离心4次，冷冻干燥，于-20℃下避光保存。5.根据权利要求3所述的一种负载鸡血藤的Ⅰ型/Ⅲ型胶原复合支架制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述交联剂由1-乙基-3（3-二甲基氨丙基）碳化二亚胺（EDC）、N-羟基丁二酰（NHS）溶于90%乙醇溶液中制得，其中EDC和NHS的最终浓度分别为20mmol/L、50mmol/L。2CN109289088A说明书1/4页一种负载鸡血藤的Ⅰ型/Ⅲ型胶原复合支架技术领域[0001]本发明属于生物医用领域，具体涉及一种负载鸡血藤的Ⅰ型/Ⅲ型胶原复合支架及其制备方法。背景技术[0002]近年来，我国关节疾病的发病人数不断攀升。关节软骨是一种极复杂的表面光滑且富有光泽的透明样软骨结缔组织，其在关节活动中主要起负重和运动作用。当软骨发生损伤后，其营养汲取受限，组织缺乏血供，会导致损伤部位病情逐渐恶化，最终可发展为膝骨性关节炎（Kneeosteoarthritis，KOA），其临床主要表现为膝骨关节持续性疼痛、肿胀、活动障碍、膝关节畸形严重甚至致残，严重影响了患者的生活和健康。虽然KOA发病原因很多，但软骨以及软骨下骨的缺损和退行性