一种倍半萜化合物及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109232493A(43)申请公布日2019.01.18(21)申请号201811352704.XA01N37/08(2006.01)(22)申请日2018.11.14A01P1/00(2006.01)A01P3/00(2006.01)(71)申请人中国科学院海洋研究所A61K31/343(2006.01)地址266071山东省青岛市市南区南海路7A61K31/19(2006.01)号A61P31/04(2006.01)(72)发明人王斌贵石小杉李晓明A61P31/10(2006.01)(74)专利代理机构沈阳科苑专利商标代理有限C12R1/885(2006.01)公司21002代理人李颖(51)Int.Cl.C07D307/92(2006.01)C07C61/35(2006.01)C12P7/40(2006.01)C12P17/04(2006.01)A01N43/12(2006.01)权利要求书1页说明书7页(54)发明名称一种倍半萜化合物及其制备方法和应用(57)摘要本发明涉及微生物医药技术领域，具体的说是一种从绿木霉(Trichodermavirens)的发酵产物中得到杜松烷型倍半萜类化合物及其分离纯化方法与应用。倍半萜化合物的分子式分别为C15H16O3(化合物1)和C15H22O2(化合物2)，如式I中1和2所示；本发明所得化合物1和2有较好且广谱的抗菌活性，有望进一步开发成为治疗由多种细菌或真菌引起感染的抑制药物。CN109232493ACN109232493A权利要求书1/1页1.一种倍半萜化合物，其特征在于：倍半萜化合物的分子式分别为C15H16O3(化合物1)和C15H22O2(化合物2)，如式I中1和2所示：2.一种权利要求1所述的倍半萜化合物的制备方法，其特征在于：1)将绿木霉(Trichodermavirens)接种于固体培养基中进行发酵培养，发酵产物经乙酸乙酯浸泡萃取、浓缩，获得发酵粗提物；2)粗提物进行减压硅胶柱层析，并用梯度为20:1至1:1(v/v，下同)的石油醚-乙酸乙酯和梯度为20:1至1:1的二氯甲烷-甲醇作为溶剂依次进行梯度洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯10:1洗脱得到的组分，进行RP-18反相硅胶柱层析，以10:90至100:0的甲醇-水洗脱；3)收集上述步骤2)甲醇-水50:50的组分，进行正相硅胶柱层析，以50:1至10:1的石油醚-丙酮洗脱，收集石油醚-丙酮20:1的组分，再用LH-20甲醇凝胶纯化，得到纯化目标化合物1；收集上述步骤2)甲醇-水70:30的组分，进行正相硅胶柱层析，以20:1的石油醚-丙酮洗脱，再用LH-20甲醇凝胶纯化，得到纯化目标化合物2。3.按权利要求2所述的倍半萜化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中固体培养基配方为：每100毫升蒸馏水中含大米70克，玉米浆0.2克，蛋白胨0.3克。4.一种权利要求1所述的倍半萜化合物的应用，其特征在于：所述式I中所示倍半萜化合物在抑制水产病害细菌或农业病害真菌中的应用。5.按权利要求4所述的倍半萜化合物的应用，其特征在于：所述式I中所示倍半萜化合物在制备由细菌或真菌引起感染的抑制药物中的应用。6.按权利要求5所述的倍半萜化合物的应用，其特征在于：所述细菌为大肠杆菌(Escherichiacoli)，嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophilia)，藤黄微球菌(Micrococcusluteus)，铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)，哈氏弧菌(Vibrioharveyi)，副溶血性弧菌(V.parahemolyticus)或创伤弧菌(V.vulnificus)；真菌为番茄早疫病菌(Alternariasolani)，小麦根腐病菌(Bipolarissorokiniana)，小麦纹枯病菌(Ceratobasidiumcornigerum)，苹果炭疽病菌(Colletottichumgloeosporioides)，柑橘炭疽病菌(ColletottichumgloeosporioidesPenz)，小麦赤霉病菌(Fusariumgraminearum)，辣椒根腐病菌(Fusariumsolani)，番茄枯萎病菌(Fusariumoxysporum)，黄瓜枯萎病菌(Fusariumoxysporum.sp.cucumebriumOwen)，苦瓜枯萎病菌(Fusariumoxysporumf.sp.momordicaenov.f.)，柑橘绿霉病菌(Penicilliumdigitatum)，苹果轮纹病菌(PhysalosporapiricolaNose)或苹果腐烂病菌(Valsamali)。2CN109232493A