一种特异性抗体及其制备方法和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114853892A(43)申请公布日2022.08.05(21)申请号202210585467.1A61P35/00(2006.01)(22)申请日2022.05.26(71)申请人杜坤地址255100山东省淄博市淄川区双杨镇小屯村1组26号楼2单元401号(72)发明人杜坤(74)专利代理机构北京品源专利代理有限公司11332专利代理师边人洲(51)Int.Cl.C07K16/28(2006.01)C12N15/13(2006.01)C07K16/46(2006.01)C12N15/85(2006.01)A61K39/395(2006.01)权利要求书2页说明书7页序列表19页附图3页(54)发明名称一种特异性抗体及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种特异性抗体及其制备方法和应用。所述特异性抗体的重链的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别包括SEQIDNO.1、SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示的序列，所述特异性抗体的轻链的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别包括SEQIDNO.4、SEQIDNO.5和SEQIDNO.6所示的序列。本发明筛选得到具备高亲和力的特异性抗体，所述抗体能够高效结合BCMA，并进一步利用所述抗体构建双特异性抗体和三特异性抗体，均具备高效结合活性，能够针对肿瘤细胞上多个靶点，具有高效诱导杀伤肿瘤细胞活性，对于治疗肿瘤药物开发领域具有重要意义。CN114853892ACN114853892A权利要求书1/2页1.一种特异性抗体，其特征在于，所述特异性抗体的重链的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别包括SEQIDNO.1、SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示的序列；所述特异性抗体的轻链的CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别包括SEQIDNO.4、SEQIDNO.5和SEQIDNO.6所示的序列。2.根据权利要求1所述的特异性抗体，其特征在于，所述特异性抗体的重链的可变区的氨基酸序列包括SEQIDNO.7所示的序列；优选地，所述特异性抗体的轻链的可变区的氨基酸序列包括SEQIDNO.8所示的序列；优选地，所述特异性抗体的重链的恒定区的氨基酸序列包括SEQIDNO.9所示的序列；优选地，所述特异性抗体的轻链的恒定区的氨基酸序列包括SEQIDNO.10所示的序列。3.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子含有编码权利要求1或2所述特异性抗体的核酸序列。4.一种如权利要求1或2所述的特异性抗体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：将编码如权利要求1或2所述的特异性抗体的核酸序列插入表达载体，得到重组载体，将所述重组载体导入宿主细胞，进行培养，分离纯化，得到所述特异性抗体。5.一种双特异性抗体，其特征在于，所述双特异性抗体含有权利要求1或2所述的特异性抗体的Fab和scfv、结合CD3的scfv以及由第一Fc多肽和第二Fc多肽形成二聚结构的Fc；其中，权利要求1或2所述特异性抗体的scfv在其C端与结合CD3的scfv的N端融合，结合CD3的scfv在其C端与第一Fc多肽的N端融合，权利要求1或2所述特异性抗体的Fab在其C端与第二Fc多肽的N端融合。6.根据权利要求5所述的双特异性抗体，其特征在于，所述权利要求1或2所述特异性抗体的Fab的重链的可变区的氨基酸序列包括SEQIDNO.7所示的序列，轻链的可变区的氨基酸序列包括SEQIDNO.8所示的序列；优选地，所述权利要求1或2所述特异性抗体的scfv的重链的可变区的氨基酸序列包括SEQIDNO.7所示的序列，轻链的可变区的氨基酸序列包括SEQIDNO.8所示的序列；优选地，所述结合CD3的scfv的重链的可变区的氨基酸序列包括SEQIDNO.11所示的序列，轻链的可变区的氨基酸序列包括SEQIDNO.12所示的序列；优选地，所述第一Fc多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO.13所示的序列，所述第二Fc多肽的氨基酸序列包括SEQIDNO.14所示的序列。7.一种三特异性抗体，其特征在于，所述三特异性抗体含有权利要求1或2所述特异性抗体的Fab、结合CD3的scfv、结合CD38的scfv以及由第一Fc多肽和第二Fc多肽形成二聚结构的Fc；其中，结合CD38的scfv在其C端与结合CD3的scfv的N端融合，结合CD3的scfv在其C端与第一Fc多肽的N端融合，权利要求1或2所述特异性抗体的Fab在其C端与第二Fc多肽的N端融合。8.根据权利要求7所述的三特异性抗体，其特征在于，所述权利要求1或2所述特异性抗体的Fab的重链的可变区的氨基酸序列包括SEQIDNO.7所示的序列，轻链的可变区的氨基酸序列包括SEQIDNO.8所示的序列；2CN11