一种梅毒螺旋体IgM抗体快速检测试剂条及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN103163298A*(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103163298103163298A(43)申请公布日2013.06.19(21)申请号201110427014.8(22)申请日2011.12.19(71)申请人天津中新科炬生物制药有限公司地址300457天津市开发区第六大街65号(72)发明人李洲许俊艳(51)Int.Cl.G01N33/577(2006.01)权权利要求书1页利要求书1页说明书4页说明书4页附图1页附图1页(54)发明名称一种梅毒螺旋体IgM抗体快速检测试剂条及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种梅毒螺旋体IgM抗体快速检测试剂条，包括上样垫(1)、胶体金垫(2)、NC膜(3)、吸样垫(4)和塑料板(7)，胶体金垫上标记有T1抗体和TP融合蛋白，NC膜上包被抗人IgMμ链单克隆抗体构成T线(5)和羊抗鼠IgG抗体构成C线(6)，所述上样垫、胶体金垫、NC膜和吸样垫粘贴到塑料板上形成检测试剂条。本发明与现有技术相比具有灵敏度高、特异性强、操作简便快捷的特点，可为临床早期诊断、早期治疗及驱梅治疗后的疗效观察提供确切的实验依据。CN103163298ACN1036298ACN103163298A权利要求书1/1页1.一种梅毒螺旋体IgM抗体快速检测试剂条，包括上样垫(1)、胶体金垫(2)、NC膜(3)、吸样垫(4)和塑料板(7)，其特征在于，胶体金垫上标记有T1抗体和TP融合蛋白，NC膜上包被抗人IgMμ链单克隆抗体构成T线(5)和羊抗鼠IgG抗体构成C线(6)，所述上样垫、胶体金垫、NC膜和吸样垫粘贴到塑料板上形成检测试剂条；或胶体金垫上标记抗人IgMμ链单克隆抗体，NC膜上包被TP重组抗原构成T线(5)和羊抗鼠IgG抗体构成C线(6)，同时包被标示加样位置的加样指示线(8)，所述上样垫、胶体金垫、NC膜和吸样垫粘贴到塑料板上形成检测试剂条。2.根据权利要求1所述的检测试剂条，其特征在于，所述的TP抗原为TP15KD、TP17KD、TP47KD抗原中的一种或几种。3.根据权利要求1所述的检测试剂条，其特征在于，所述试剂条的制备方法包括以下步骤：1)胶体金垫的制备以氯金酸-柠檬酸三钠还原法制备直径为30-50nm的胶体金溶液，用0.2MK2CO3调节胶体金溶液的pH为8.5-9.5，然后置于磁力搅拌器上缓慢搅拌，按每100ml溶液含0.5mg-3mgT1抗体缓慢滴加所述单抗至胶体金溶液中，室温搅拌1小时，加入BSA和PEG20000封闭，12000rpm离心，弃上清，沉淀加入保存液浓缩至原体积的1/10，按每毫升1ug、2.5ug、5ug加入TP融合抗原，室温搅拌1小时左右，用金标稀释液将浓缩胶体金稀释至浓度为5％、10％、15％、20％，按每毫升金标稀释液铺22cm2的比例分别均匀地铺在无纺布上，再置干燥室干燥2-4小时，切成6mm胶体金条，为胶体金垫；标记抗人IgMμ链单克隆抗体的胶体金垫的方法同上操作；2)NC膜的制备用0.01MpH7.2的PBS将抗人IgMμ链单克隆抗体稀释成0.4-0.6mg/ml进行包被构成T线；同时包被羊抗鼠IgG抗体作为质控线C线，包被完成后干燥NC膜3～4小时；NC膜上包被TP重组抗原的方法同上操作。2CN103163298A说明书1/4页一种梅毒螺旋体IgM抗体快速检测试剂条及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及一种梅毒螺旋体IgM抗体检测试剂，具体是涉及一种梅毒螺旋体IgM抗体快速检测试剂条及其制备方法。背景技术[0002]梅毒是由梅毒螺旋体(Treponemapallidum，TP)引起的一种性传播疾病，其主要通过性行为和血液传播，也可通过胎盘母婴垂直传播。近年来我国的梅毒发病率有逐年上升的趋势，2009年在全国法定传染病疫情报告中，梅毒的发病率位居第三位，与2008年同比增长了18.39％。梅毒患者是梅毒的惟一传播源，对梅毒进行早诊断、早治疗是控制其蔓延至关重要的一个环节。梅毒螺旋体可侵犯全身各脏器，造成多器官病变、功能失常、组织破坏，甚至死亡，对人们的健康构成了严重的威胁。由于梅毒螺旋体具有较强的传染性和病程的复杂性，且梅毒在早、中期临床表现不显著，常常造成病人对病情的忽视，给病人身体健康带来极大的危害，也使梅毒的传播更为加快。[0003]血清学检测是诊断梅毒的重要实验室检测方法。目前梅毒的血清学检测方法主要有两种：一类是非梅毒螺旋体抗原血清试验，如快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)等，此类试验检测的是心磷脂抗体，为非特异性抗体检测试验，常用作梅毒的筛查试验，亦可用于梅毒的疗效观察、复发及再感染。由于此类实验受多种因素影响，常出现生物学假阴性