一种检测梅毒螺旋体抗体试剂盒及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109541224A(43)申请公布日2019.03.29(21)申请号201811329533.9(22)申请日2018.11.09(71)申请人广州源起健康科技有限公司地址510530广东省广州市广州高新技术产业开发区瑞泰路2号(72)发明人李根平解巧丽(74)专利代理机构广州市深研专利事务所44229代理人姜若天(51)Int.Cl.G01N33/68(2006.01)G01N33/543(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图1页(54)发明名称一种检测梅毒螺旋体抗体试剂盒及其制备方法(57)摘要本发明公开了一种检测梅毒螺旋体抗体试剂盒及其制备方法，由如下组分组成：包被有TP抗原的磁性微球、阴性对照品、阳性对照品、与镧系元素结合的TP抗原标记物、分析缓冲液、清洗液、增强液和RFID卡。本方法基于磁性微球与时间分辨免疫分析法相结合，既克服了酶标板物理性吸附反应时间较长，检测结果较慢的弊端，大大缩短反应时间，同时也具备时间分辨检测技术准确性高、灵敏度高、特异性强、线性范围宽、检测稳定且方便的优点。磁性微球包被相应的抗原或抗体，因磁性微球立体的特性，大大增加免疫反应的接触表面积，从而大大缩短检测时间，30分钟内即可检出结果。CN109541224ACN109541224A权利要求书1/1页1.一种检测梅毒螺旋体抗体试剂盒，其特征在于由如下组分组成：包被有TP抗原的磁性微球、阴性对照品、阳性对照品、与镧系元素结合的TP抗原标记物、分析缓冲液、清洗液、增强液和RFID卡。2.如权利要求1所述的检测梅毒螺旋体抗体试剂盒，其特征在于，所述的与镧系元素结合的TP抗原标记物，其中的镧系元素与TP抗原是通过中间螯合剂结合，镧系元素为铕或钐,螯合剂为异硫氰酸苯基-EDTA、异硫氰酸苯甲基-DTTA、P-异硫氰基苄基-DTTA或二乙烯三胺五醋酸氨基苯基-EDTA。3.如权利要求1所述的检测梅毒螺旋体抗体试剂盒，其特征在于，所述的TP抗原是由含有TP15、TP17或TP47片断组成。4.权利要求1所述的检测梅毒螺旋体抗体试剂盒的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）包被有TP抗原的磁性微球的制备；（2）制备阴性对照品、阳性对照品；（3）TP抗原铕标记物的制备；（4）分析缓冲液、浓缩洗液和增强液的制备；（5）将各组份分别分装至相应的存储容器中；（6）RFID卡复制拷贝；（7）喷码、贴标签；（8）组装成成品试剂盒。2CN109541224A说明书1/6页一种检测梅毒螺旋体抗体试剂盒及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及一种检测梅毒螺旋体抗体试剂盒及其制备方法，具体涉及一种基于磁性微球与时间分辨免疫分析法相结合检测梅毒螺旋体抗体试剂盒的制备方法。背景技术[0002]梅毒是由梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体(Treponemapallidum，TP)感染引起的传染性强、危害较大的人类性传播疾病，自然情况下梅毒只感染人类，人是梅毒的唯一传染源。梅毒可引起神经、心血管等多系统损害，甚至威胁生命。梅毒可通过胎盘传染胎儿，导致自发性流产、死产或先天梅毒等。感染梅毒可促进艾滋病的传播。随着经济的发展，性传播疾病也随之增加。[0003]目前梅毒非特异性类脂质抗体血清学试验主要有甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)，梅毒特异性抗体血清学试验主要有梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、酶联免疫(ELISA)、胶体金法、化学发光(CLIA)、电化学发光(ECL)、时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)等。梅毒非特异性试验与病程相关，对三期梅毒和治疗后梅毒检出率较低；梅毒特异性试验中TPPA法作为梅毒的确认实验，对各期梅毒均具有较好的稳定性，但判定结果的方式为肉眼判断，结果可靠性下降并且也不能保存原始数据，同时TPPA法试剂盒造价高昂。梅毒ELISA作为半定量检测方法是现应用最广的检测方法，但其灵敏度、线性宽度范围均未达到较高水平，难以适应市场发展的需求。胶体金法与ELISA均有相同的缺点。而CLIA及ECL虽灵敏度高但均存在检测设备造价高昂，而相应的标记物研发门槛高，短时期内国内均会受制于人的缺点同样也限制了在国内的推广。时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)灵敏度能达到CLIA一致的水平，不仅检测设备造价较低，并且相关技术在国内已相当成熟。传统时间分辨检测，仍以空白酶标板的物理吸附为主，检测过程耗时较长。缩短反应时间，降低检测成本，提高检测灵敏度及线性范围，将具有不错的市场前景。发明内容[0004]基于此，本发明的目的在于克服现有技术及相关技术检测费用高昂的缺点，提供一种检测梅毒螺旋体抗体试剂盒，及所述试剂盒的制备方法。[0005]为实现上述目的，本发