一种EB病毒的lgG抗体检测试纸条及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107247147A(43)申请公布日2017.10.13(21)申请号201610703037.X(22)申请日2016.08.22(71)申请人王秀梅地址261000山东省潍坊市东风东街7959号4号楼2单元301号(72)发明人王秀梅(74)专利代理机构贵阳派腾阳光知识产权代理事务所(普通合伙)52110代理人管宝伟(51)Int.Cl.G01N33/68(2006.01)G01N33/569(2006.01)G01N33/558(2006.01)G01N33/543(2006.01)G01N33/532(2006.01)权利要求书1页说明书6页(54)发明名称一种EB病毒的lgG抗体检测试纸条及其制备方法(57)摘要本发明提供一种EB病毒的lgG抗体检测试纸条及其制备方法，所述的EB病毒的lgG抗体检测试纸条包括塑料底板、样品垫、金标结合垫、带有检测线和质控线的硝酸纤维素膜、吸水垫，其中金标结合垫上包被有EB病毒特异性重组抗原与胶体金的偶联标记物，硝酸纤维素膜上包被有EB病毒单克隆抗体的检测线和包被有兔抗鼠IgM的质控线。本发明的试纸条采用胶体金标记技术，检测成本低，检测时间短，特异性好，试纸条稳定性好，灵敏度高，而且结果易于判定，显色明显，具有一定的应用前景。CN107247147ACN107247147A权利要求书1/1页1.一种EB病毒的lgG抗体检测试纸条，其特征在于，该试纸条包括：塑料底板、样品垫、吸水垫、包被有胶体金标记的EB病毒特异性重组抗原的金标垫聚酯膜、包被有EB病毒单克隆抗体的检测线和包被有二抗IgM的质控线的硝酸纤维素膜。2.如权利要求1所述的一种EB病毒的lgG抗体检测试纸条，其特征在于，所述样品垫的处理方法是将其浸于硼酸缓冲液中，均匀浸湿，然后在45℃烘干备用。3.如权利要求1所述的一种EB病毒的lgG抗体检测试纸条，其特征在于，所述的二抗IgM为兔抗鼠IgM多克隆抗体。4.如权利要求1所述的一种EB病毒的lgG抗体检测试纸条，其特征在于，所述的小鼠IgM的浓度为3mg/ml，所述的EB病毒单克隆抗体的浓度为4mg/ml，所述的二抗IgM浓度为2mg/ml。5.如权利要求1～4任意一项所述的一种EB病毒的lgG抗体检测试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)胶体溶液的制备：取消过毒的三角烧瓶1个，容量为500ml，加入超纯水清洗干净后，加入超纯水248mL，而后加入质量浓度为1％的氯金酸HAuCl4·3H2O溶液2mL，配制成250mL0.01％氯金酸水溶液，加热煮沸并持续搅拌，在搅拌的同时加入质量浓度为1％柠檬酸三钠Na3C6H5O7·2H2O溶液3～5mL，继续搅拌加热，当溶液的颜色完全变为透明的紫红色时，继续加热并搅拌5～10min后停止加热，冷却至室温后加入纯水至250ml，得到紫红色胶体金溶液，在2～8℃保存备用；(2)金标EB病毒特异性重组抗原的制备：取步骤(1)中的胶体金溶液140mL，用0.25mol/LNa2CO3调节胶体金溶液的PH至8.5～9.0，用电磁搅拌器以250r/min搅拌，搅拌的同时逐滴加入5mL含0.1mg的EB病毒特异性重组抗原溶液，加入后持续搅拌10min；然后逐滴加入1mL质量浓度为10％的亚硫酸铋琼脂作为稳定剂，继续搅拌10min，然后在2～6℃、2500～2700r/min离心处理30～40min，弃去沉淀；然后将红色上清溶液继续在上述离心条件下离心10～20min，弃上清液，收集沉淀，然后加入缓释剂重悬定容至5ml，即得到金标EB病毒特异性重组抗原；(3)金标垫聚酯膜的制备：将步骤(2)所制备的金标EB病毒特异性重组抗原稀释至浓度为2mg/ml，然后用划膜仪以5μL/cm的浓度均匀喷在载体聚酯膜上，在37℃的恒温烘箱中烘干；(4)包被有EB病毒单克隆抗体的检测线和包被有二抗IgM的质控线的硝酸纤维素膜的制备：EB病毒单克隆抗体稀释成4mg/ml，然后用划膜仪以5μL/cm的浓度均匀喷在载体玻璃纤维素膜上，得到检测线；然后将二抗IgM稀释成2mg/ml，用三维平面点膜喷金仪仪器HM3055，将稀释好的二抗IgM均匀喷在硝酸纤维素膜上，得到质控线；(5)制备试纸条：将样品垫、金标垫聚酯膜、硝酸纤维素膜和吸水垫自上而下依次粘贴在塑料底板上，组装成试纸条，然后再切割成一定宽度的长条，再将试纸条安装在长条扁平壳状的检测卡外壳中，即得本发明产品EB病毒的lgG抗体检测试纸条。2CN107247147A说明书1/6页一种EB病毒的lgG抗体检测试纸条及其制备方法技术领域[0001]本发明设计医学检验测试领域，具体涉及一种EB病毒的lgG抗体检测试纸条及其制备方法。背景技术[0