一种用于抑制水环境副溶血弧菌的复合植物提取物及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112616862A(43)申请公布日2021.04.09(21)申请号202110019291.9C02F103/20(2006.01)(22)申请日2021.01.07(71)申请人清远海贝生物技术有限公司地址511500广东省清远市清新区太平镇天良林场(72)发明人黄锦炉(74)专利代理机构广州正明知识产权代理事务所(普通合伙)44572代理人张丽(51)Int.Cl.A01N65/34(2009.01)A01N65/12(2009.01)A01N65/08(2009.01)A01N63/22(2020.01)C02F1/50(2006.01)权利要求书2页说明书17页(54)发明名称一种用于抑制水环境副溶血弧菌的复合植物提取物及其制备方法和应用(57)摘要本发明属于水体环境抑菌剂技术领域，公开了一种用于水环境副溶血弧菌的复合植物提取物，该复合植物提取物主要由以下质量百分比的组分制成：大龙珠草提取物35％‑55％、岗梅提取物30％‑42％、紫背草花提取物5％‑12％、蒲公英提取物5‑12％。与传统GMP消毒剂安全性相比，本发明复合植物提取物属于环境友好型物质，对虾体的安全浓度范围大，化水泼洒使用时，其对副溶血弧菌有明显的抑制效果，且不会受水体有机物干扰，使用剂量≤5mg/L时，可有效抑制养殖水体的上层、中层和底层养殖中的副溶血弧菌的异常繁殖，且对黄颡鱼、斑点叉尾鮰和沟鲇的安全性良好。CN112616862ACN112616862A权利要求书1/2页1.一种用于抑制水环境副溶血弧菌的复合植物提取物，其特征在于，以重量百分比计，包括35‑55％大龙珠草提取物、30‑42％梅岗提取物、5‑12％紫背草花提取物、5‑12％蒲公英提取物。2.根据权利要求1所述的用于抑制水环境副溶血弧菌的复合植物提取物，其特征在于，以重量百分比计，包括45％大龙珠草提取物、38％梅岗提取物、9％紫背草花提取物、8％蒲公英提取物。3.根据权利要求2所述的用于抑制水环境副溶血弧菌的复合植物提取物，其特征在于，所述大龙珠草提取物是经过酶解后的发酵浓缩物，所述酶岗提取物为经过预处理后的发酵浓缩物，所述紫背草花提取物是经过预处理后的发酵浓缩物，所述蒲公英提取物是经过酶解后的发酵浓缩物。4.根据权利要求3所述的用于抑制水环境副溶血弧菌的复合植物提取物，其特征在于，所述大龙珠草提取物的制备方法为：S1、将大龙珠草切短，置于45‑50℃环境下烘烤6‑10h，过筛获得粉碎物，按质量百分比计，取100份大龙珠草粉碎物，与600‑1200份水充分混分，接着加入5000‑15000IU纤维素酶与木瓜蛋白酶复合物，35‑40℃环境中，密闭、间隔式搅拌，存置48‑72h；S2、开封，加水400‑600份，加芽孢菌液态培养基10‑18份，加芽孢菌(2‑6)╳105cfu，密闭、间隔式搅拌，培养液OD值为6.5‑7.5时获得培养物，将培养物离心去渣，收集上清液，接着将收集的上清液利用浓缩至原体积的10％‑30％，所获得的浓缩液即为所述大龙珠草提取物。5.根据权利要求3所述的用于抑制水环境副溶血弧菌的复合植物提取物，其特征在于，所述岗梅提取物的制备方法为：S1、岗梅在3.0‑4.5mmol/L的氢氧化钠溶液中进行一过性浸泡，浸泡持续时间为5‑10秒，取出，置于环境温度30‑35℃烘干，获得预处理岗梅薄片；S2、将预处理岗梅薄片过筛获得岗梅初微粉，将岗梅初微粉、水与芽孢液态培养基和芽孢菌混合，35‑40℃密闭培养至OD值为5.5‑6.5得到培养物，离心去渣，收集上清液，灭菌，冷却后取出，并将经高温灭菌的上清液浓缩至原体积的10％‑25％，获得浓缩液即为所述的岗梅提取物，其中，岗梅初微粉：水：芽孢菌液态培养基的重量体积比为1：(6‑12)：(2‑4)，芽孢菌的加入量为每质量份岗梅初微粉加入(3‑8)╳106cfu。6.根据权利要求3所述的用于抑制水环境副溶血弧菌的复合植物提取物，其特征在于，所述紫背草花提取物的制备方法为：S1、将经过预处理的紫背草花去杂除尘，再经速冻、预膨化、真空脱油处理，获得紫背草花脱水干燥物，干燥物过筛进行粉碎，获得紫背草花粉碎物；S2、将紫背草花粉碎物：水：芽孢液态培养基和芽孢菌混合，35‑40℃密闭培养至OD值为4.0‑6.5得到培养物，过滤收集培养物，3000‑5000rpm离心20‑30min，弃离心上清液，收集离心沉积物，并以离心沉积物的6‑10倍质量份加水充分溶解，接着分装密闭，并于121℃下高压灭菌15min，冷却后取出，800‑1200rpm离心5‑10min，去渣留离心上清液，将收集的上清液浓缩至原体积的10％‑25％，获得浓缩液即为所述的紫背草花提取物。其中，紫背草花