一种分离制备高纯度芒柄花苷的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115819476A(43)申请公布日2023.03.21(21)申请号202211321340.5(22)申请日2022.10.26(71)申请人中国科学院兰州化学物理研究所地址730030甘肃省兰州市城关区天水中路18号申请人青岛市资源化学与新材料研究中心(72)发明人王宁丽裴栋邸多隆(74)专利代理机构北京识然知识产权代理事务所(普通合伙)11975专利代理师曾庆国(51)Int.Cl.C07H1/08(2006.01)C07H17/07(2006.01)权利要求书1页说明书3页附图2页(54)发明名称一种分离制备高纯度芒柄花苷的方法(57)摘要本发明提供一种高纯度芒柄花苷的分离制备方法，包括如下的步骤：S1：将黄芪粉碎，再加入水进行回流提取；S2：弃去上清液，在残渣中加入乙醇溶液，加热回流提取，得到黄芪提取物浸膏；S3:取黄芪提取物浸膏过大孔吸附树脂，得到纯度大于50％的芒柄花苷样品；S4:取上述纯度大于50％的芒柄花苷样品进行逆流色谱分离纯化，得到纯度大于95％的芒柄花苷样品；S5：取上述芒柄花苷样品进行重结晶，得到纯度大于98.5％的芒柄花苷标准样品。本发明方法中所用的提取溶剂为乙醇、无毒，逆流色谱分离过程无死吸附、制备量大，且可以通过重复重叠进样节约制备溶剂及时间。本发明的方法步骤简单、制备成本低，且可实现芒柄花苷标准样品的规模化制备。CN115819476ACN115819476A权利要求书1/1页1.一种高纯度芒柄花苷分离的制备方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：S1：将黄芪粉碎，再加入水进行回流提取；S2：弃去上清液，在残渣中加入乙醇溶液，加热回流提取，得到黄芪提取物浸膏；S3:取黄芪提取物浸膏过大孔吸附树脂，得到纯度大于50％的芒柄花苷样品；S4:取上述纯度大于50％的芒柄花苷样品进行逆流色谱分离纯化，得到纯度大于95％的芒柄花苷样品；S5：取上述纯度大于95％的芒柄花苷样品进行重结晶，得到纯度大于98.5％的芒柄花苷标准样品。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在S1中黄芪和水的料液比为1:8～1:12。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在S1中的水回流提取时间为0.5～1h。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在S2中残渣和乙醇的料液比为1:8～1:12，乙醇浓度为60％～90％，回流提取时间为1～5h。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在S3中所述大孔吸附树脂为苯乙烯基质交联的中等极性的共聚体，解析溶剂为60％～85％的乙醇溶液。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在S4中所述逆流色谱溶剂系统中正丁醇:乙酸乙酯:甲醇:水的体积比为2:8:1‑9:1‑9，检测波长为254nm。7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在S4中所述逆流色谱溶剂系统中正丁醇:乙酸乙酯:甲醇:水的体积比为2:8:3:7。8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在S5中所述重结晶中使用的试剂为80％～95％甲醇或乙醇。2CN115819476A说明书1/3页一种分离制备高纯度芒柄花苷的方法技术领域[0001]本发明属于天然产物分离技术领域，具体涉及一种高纯度芒柄花苷的分离制备方法。背景技术[0002]黄芪(Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bunge.)为豆科黄芪属多年生草本，产于内蒙古、山西、甘肃、黑龙江等地，生于林缘、灌丛或疏林下，亦见于山坡草地或草甸中。黄芪具有补中益气、止汗、利水消肿、除毒生肌等作用。药理学研究表明，芒柄花苷是黄芪中重要活性成分，具有神经保护和抗氧化等作用。虽然目前国内外市场已有芒柄花苷对照品的生产和销售公司，但市场缺乏芒柄花苷标准样品，产品质量良莠不齐。因此，亟待研制芒柄花苷标准样品，保证以此为原料的食品、功能食品、保健品及化妆品的质量。同时，黄芪相关检测标准的制定也是基于其指标成分的标准样品的研制，因此，芒柄花苷标准样品的研制意义重大。[0003]公开号为CN109180759A的中国发明专利“一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法”(CN201811241989.X)中公开了一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法，主要涉及的方法是溶剂回流提取、硅胶柱分离及重结晶的方法，得到纯度大于92％的芒柄花苷样品。但在该方法中使用了四氢呋喃试剂，该试剂具有刺激和麻醉作用，人体吸入后会引起上呼吸道刺激、恶心、头晕、头疼和中枢神经系统抑制，能引起肝、肾损害。因此，对于长期从事分离制备的工人而言，该提取工艺有待进一步改善。另外，作为标准的建立，92％纯度的芒柄花苷样品远远达不到要求，亟需研制更高纯度的芒柄花苷样品以建立相关检测标准。[0004]此外，标准样品的提取原料也格外重要。芒柄花苷作为黄芪