魔芋高效快速组培繁殖方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109418159A(43)申请公布日2019.03.05(21)申请号201710746326.2(22)申请日2017.08.26(71)申请人刘琳琳地址726200陕西省商洛市丹凤县龙驹寨镇贺家村渠北180号(72)发明人刘琳琳(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书2页说明书8页(54)发明名称魔芋高效快速组培繁殖方法(57)摘要一种魔芋高效快速组培繁殖方法，是将魔芋球茎切块材料离体培养诱导产生愈伤、不定芽和不定根，进而在较短时间内大量形成魔芋组培种苗，再将组培种苗移栽于苗床中，辅以必要的药剂及肥料，正常倒苗后获得魔芋原原种。本发明提供的魔芋高效快速组培繁殖方法，克服了魔芋传统繁殖系数过低和全工厂化快繁成本过高而无法与市场接轨的缺点，繁殖系数高，繁殖量大，初代污染率低于10％，平均诱导率高于90％，集中成苗周期缩短为3个半月，可周年生产种苗，每年3～7月在自然条件下生产原原种，其它时间于人工温室条件下生产原原种，获得的原原种平均重达10克以上，大大降低了生产成本，极大提高了生产效益。CN109418159ACN109418159A权利要求书1/2页1.一种魔芋高效快速组培繁殖方法，其特征在于该方法包括以下步骤：1)培养基的制备：以MS培养基为基本培养基，附加6-苄氨基嘌呤0.05～2.5mg/L、α-萘乙酸0.6～2.0mg/L、聚乙烯吡咯烷酮0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂6.5g/L后制得pH值为5.8～6.0的愈伤组织诱导培养基，以MS培养基为基本培养基，附加6-苄氨基嘌呤0.05～3.5mg/L、α-萘乙酸0.1～1.5mg/L、聚乙烯吡咯烷酮0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂6.5g/L后制得pH值为5.8～6.0的芽分化诱导培养基，以1/2MS培养基为基本培养基，附加3-吲哚丁酸0.02mg/L、蔗糖30g/L、琼脂6.5g/L后制得pH值为5.8～6.0的生根培养基；2)魔芋外植体的采集：采集健康无病无伤的魔芋球茎作为外植体；3)魔芋外植体的消毒：将采集的魔芋球茎外植体，用自来水冲洗干净后，放入质量百分浓度为1％洗衣粉水中冲洗5分钟，并搅拌；然后用清水冲洗干净后放到75％的酒精中浸泡1分钟，之后取出再浸入0.2％升汞水浸泡15分钟，并搅拌，最后用无菌水冲洗3次，每次2～3分钟；4)魔芋愈伤组织诱导：将步骤3)中消毒好的魔芋球茎外植体，切成0.4～1㎝见方的小块，接种到愈伤组织诱导培养基上培养，先暗培养14～16天后，再置于27℃±1℃、每天光照12～14h、光照强度1000～2000lx的条件下，诱导愈伤组织产生，愈伤组织诱导周期为30～35天；5)魔芋芽分化诱导：将步骤4)中的愈伤组织转接到芽分化诱导培养基上培养，魔芋芽分化诱导周期为60～70天，不定芽大量产生，魔芋组培种苗开始形成；6)魔芋组培种苗生根培养：将步骤5)中形成的魔芋组培种苗在生根培养基上培养，生根培养时间需要7～15天；7)组培种苗移栽：将步骤6)中生根的魔芋组培种苗开瓶炼苗3～4天后移栽于自然条件下的苗床或人工温室无土栽培苗床上；经过精心栽培、肥水管理、温光控制及病虫害防治，正常倒苗后收获魔芋原原种，获得的原原种平均重达10克以上。2.根据权利要求1所述的魔芋高效快速组培繁殖方法，其特征在于步骤7)中自然条件下的苗床为：选择遮阳度在50～70％的林下有机质丰富的菜园地作苗床，在魔芋组培种苗移栽苗床前，苗床土壤要先施敌克松或生石灰进行消毒处理，用量为敌克松250g/亩，生石灰25㎏/亩，施后翻均。3.根据权利要求1所述的魔芋高效快速组培繁殖方法，其特征在于步骤7)中人工温室无土栽培苗床为：用草炭土与珍珠岩按1：1比例混配好基质，并经过集中消毒处理后分装于栽培盆钵或栽培池中铺平。4.根据权利要求1所述的魔芋高效快速组培繁殖方法，其特征在于：步骤7)中，将魔芋组培种苗移栽至自然条件下的苗床应于每年3～7月进行，移栽后浇足定根水及少量1/10MS营养液；每年其它时间将魔芋组培种苗移栽至人工温室无土栽培苗床上，温室温度宜控制在24～28℃之间，移栽后浇足定根水及少量1/10MS营养液，缓苗期温室湿度可控制在90％以上，人工遮阳度在50～70％，阴雨天或寡照天应人工补光2000lx以上。5.根据权利要求1所述的魔芋高效快速组培繁殖方法，其特征在于：步骤7)中，魔芋组培种苗移栽于苗床后的施肥方法为前1个月每7～10天浇一次1/2MS营养液，1个月后每周浇一次1/4MS营养液，至倒苗前半个月停止。6.根据权利要求4或5所述的魔芋高效快速组培繁殖方法，其特征在于MS营养液的成分2CN109418159A权利要求书2/2页为，单位是mg/L：ⅰ)