一种穿王消炎胶囊HPLC指纹图谱的建立方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103969350103969350A(43)申请公布日2014.08.06(21)申请号201310035217.1(22)申请日2013.01.30(71)申请人江西普正制药有限公司地址331409江西省吉安市峡江县普正工业园区(72)发明人肖军平康兴东尹文娟杨伟庆刘立鼎(74)专利代理机构南昌佳诚专利事务所36117代理人文珊(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)权权利要求书2页利要求书2页说明书6页说明书6页附图2页附图2页(54)发明名称一种穿王消炎胶囊HPLC指纹图谱的建立方法(57)摘要一种穿王消炎胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，涉及中药制剂质量控制方法。穿王消炎胶囊用甲醇溶液超声波提取，以穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯为对照品，以了哥王及穿心莲为对照药材，照高效液相色谱法建立指纹图谱，洗脱程序为梯度洗脱程序。本发明建立的穿王消炎胶囊指纹图谱与相应的对照图谱进行相似度评价，其相似度大于0.90，能有效的表征产品质量，更有利于监控产品的质量，能更有效的保证产品质量的长期稳定性，进而保障疗效的安全性和有效性。CN103969350ACN103965ACN103969350A权利要求书1/2页1.一种穿王消炎胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于：穿王消炎胶囊用甲醇溶液超声提取，以穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯为对照品，以了哥王及穿心莲为对照药材，照高效液相色谱法建立指纹图谱；高效液相色谱法的色谱条件为：ODSC18色谱柱；流动相A为乙腈；流动相B为磷酸水溶液；检测波长220~300nm；柱温：15~40℃；流速：1.0ml.min-1；洗脱程序为梯度洗脱程序。2.根据权利要求1所述的一种穿王消炎胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于：穿王消炎胶囊内容物用甲醇溶液超声提取，滤过，取续滤液；以穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯为对照品，对照品以甲醇溶解；用了哥王及穿心莲为对照药材，了哥王对照药材用水煎煮后浓缩干燥，加甲醇溶液溶解，滤过，取续滤液；穿心莲对照药材先以浓度为20~60%，V/V的甲醇溶液浸泡，后超声波提取，滤过，取续滤液测定；照高效液相色谱法建立指纹图谱，其中梯度洗脱的程序如以下体积比浓度配置进行：洗脱时间流动相A的比例流动相B的比例0min10%90%20min20%80%55min35%65%70min44%56%。3.根据权利要求2所述的一种穿王消炎胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于：（a）供试品溶液制备：精密称取穿王消炎胶囊内容物0.2~1g，加甲醇20~50ml，称定重量，超声提取15~30分钟，冷却至室温，用甲醇补足减失的重量，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液；（b）对照品溶液制备：精密称取穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯对照品各5~15mg，分别置10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得对照品溶液；（c）对照药材溶液制备:了哥王对照药材溶液：取了哥王药材5~50g，加5~50倍量水煎煮1~3次，每次2~7小时，合并煎煮液，滤过，浓缩后减压干燥成浸膏状，取0.5~2g，加甲醇50~200ml溶解，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得了哥王对照药材溶液；穿心莲对照药材溶液：取穿心莲药材粉末0.1~1g，精密称定，至100ml锥形瓶中，精密加20~60%，V/V的甲醇20~50ml，称定重量，浸泡0.5~2h，后超声波提取10~60min，用20~60％甲醇补足减失的重量，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得穿心莲对照药材溶液；（d）色谱条件：ODSC18（4.6mm×250mm，5μm）色谱柱；流动相A为乙腈；流动相B为0.2%磷酸水溶液；检测波长250~280nm；柱温：20~30℃；流速：1.0ml.min-1；（e）测定：精密吸取供试品溶液5~20μm注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到穿王消炎胶囊的指纹图谱。4.根据权利要求3所述一种穿王消炎胶囊HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于：（a）供试品溶液制备：精密称取穿王消炎胶囊内容物0.4g，加甲醇40ml，称重，超声提取20分钟，冷却至室温，用甲醇补足减失的重量，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液；（b）对照品溶液制备：精密称取穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯对照品各10mg，分别置10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得对照品溶液；2CN103969350A权利要求书2/2页（c）药材对照溶液制备：了哥王药材对照溶液：取了哥王药材20g，加20倍量的水煎煮2次，每次5小时，合并煎煮液，滤过，浓缩后减压干燥成浸膏状，取1g，加甲醇100ml溶解，用微孔滤膜滤过，取