【精选】酶促反应动力学多底物动力学.ppt

第二节多底物反应及其动力学酶反应中间物：分为两类(1)稳态中间物：指酶和底物以共价键结合形成的较为稳定的中间物。可以发生双分子反应而不能自身解离。例如：某些Ser蛋白酶在催化过程中形成的酰化酶中间物包括：共价结合的ES中间物；自由酶(2)过渡态复合物：非稳定的酶中间物本身可以单分子解离或异构化之后再解离出产物或底物。分为:非中心复合物：酶未完全被底物饱和中心复合物：酶已经完全被底物饱和(EABEPQ);(EAEP)(二)反应机制的分类和命名(以双底物双产物反应为例）：1.序列(sequential)反应机制:酶必需与所有底物都结合之后才有产物放出。对于双底物双产物反应必有酶-底物三元复合物形成。根据底物及产物与酶的结合及释放是否有序分为:(1)有序双双双底物双产物反应(orderedBiBi)：ABPQEEA(EAB≒EPQ)EQEEA、EQ:非中心复合物；(EAB≒EPQ):中心复合物A：领先底物；B：随后底物例如：许多以NAD+或NADP+为辅酶的脱氢酶类乳酸脱氢酶（LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)等NAD+苹果酸(MA)草酰乙酸(OAA)NADHMAOAAEENAD+(ENAD+≒ENADH)ENADHENAD+/NADH形成外底物对机制：由于底物A与酶结合后改变了酶的构象使原来隐蔽的B结合位点暴露B才能结合上去。暗示：A与B可能结合在酶的不同部位。(2)Theorell-Chance(T-C机制)：ABPQEEAEQE第二个底物B结合及释放非常快没有明显的三元复合物变构过程。可看作是三元复合物浓度极低的序列有序机制。例如：马肝醇脱氢酶：NAD+乙醇乙醛NADHEENAD+ENADHE(3)随机双双(randomBiBi)：ABPQEAEQE（EAB≒EPQ）EBAQP产物从酶上的释放及底物和酶的结合无一定顺序。少数脱氢酶和一些磷酸激酶属于该类例如肌酸激酶:肌酸+ATP磷酸肌酸+ADP机制：酶蛋白上的A、B结合位均处于暴露状态两者与底物的结合即互不干扰也不互相依赖。2乒乓机制(Ping-PangBiBi)：各种底物全部和酶结合以前已经有一种或多种底物放出不形成三元复合物。APBQE(EA≒FP)F(FB≒EQ)E属于该机制的酶大多数具有辅酶如转氨酶、黄素酶等。谷草转氨酶属于典型的乒乓机制：