从红旱莲中提取异槲皮苷的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107840863A(43)申请公布日2018.03.27(21)申请号201711049887.3(22)申请日2017.10.31(71)申请人桂林纽泰生物科技有限公司地址541004广西壮族自治区桂林市七星区空明西路新建区五号小区创业大厦B座B302(72)发明人谢冬养(74)专利代理机构桂林市持衡专利商标事务所有限公司45107代理人汤凌志(51)Int.Cl.C07H17/07(2006.01)C07H1/08(2006.01)权利要求书1页说明书5页(54)发明名称从红旱莲中提取异槲皮苷的方法(57)摘要本发明公开了从红旱莲中提取异槲皮苷的方法，包括下述步骤:包括如下步骤：1)将红旱莲清洗干净，晾干，用粉碎机粉碎，过筛；2)亚临界水萃取：将处理好的原料置于萃取釜中，加入相当于原料0.001重量份的羟乙基纤维素，将脱氧去离子水注入釜中，萃取温度185-200℃，压力8-10Mpa，萃取时间0.5-1.0h，对红旱莲进行萃取，萃取结束，泄压，萃取液流入收集罐中冷却至室温，得到萃取液；3)纯化：将步骤2)得到的萃取液浓缩，通过大孔树脂进行柱层析，50％v/v的乙醇洗脱，得到洗脱液，浓缩，干燥，得到成品。CN107840863ACN107840863A权利要求书1/1页1.从红旱莲中提取异槲皮苷的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)将红旱莲清洗干净，晾干，用粉碎机粉碎，过筛；2)亚临界水萃取：将处理好的原料置于萃取釜中，加入相当于原料0.001重量份的羟乙基纤维素，将脱氧去离子水注入釜中，萃取温度185-200℃，压力8-10Mpa，萃取时间0.5-1.0h，对红旱莲进行萃取，萃取结束，泄压，萃取液流入收集罐中冷却至室温，得到萃取液；3)纯化：将步骤2)得到的萃取液浓缩，通过大孔树脂进行柱层析，50％v/v的乙醇洗脱，得到洗脱液，浓缩，干燥，得到成品。2.根据权利要求1所述的从红旱莲中提取异槲皮苷的方法，其特征在于：步骤1)所述的过筛，是过20-80目筛。3.根据权利要求1所述的从红旱莲中提取异槲皮苷的方法，其特征在于：步骤2)所述的将脱氧去离子水注入釜中，是将脱氧去离子水以小于10mL/min的流速注入釜中。4.根据权利要求1所述的从红旱莲中提取异槲皮苷的方法，其特征在于：步骤3)所述的浓缩，温度控制≤50℃，真空控制在-0.08±0.01MPa，浓缩至0.95-1.05g/ml。5.根据权利要求1所述的从红旱莲中提取异槲皮苷的方法，其特征在于：步骤3)所述的大孔树脂，树脂型号选自D101、DM130和AB-8。6.根据权利要求1所述的从红旱莲中提取异槲皮苷的方法，其特征在于：步骤3)所述的通过大孔树脂进行柱层析，是湿法装柱，上样浓度8.0mg/mL，上样量为3BV，洗脱时，先用水洗至流出液近无色，随后用6BV的50％v/v乙醇洗脱，收集洗脱液。2CN107840863A说明书1/5页从红旱莲中提取异槲皮苷的方法技术领域[0001]本发明涉及生物技术领域的提取方法，具体涉及从红旱莲中提取异槲皮苷的方法。背景技术[0002]异槲皮苷(Isoquercitrin)，别名：槲皮素-3-O-葡萄糖苷、异槲皮素，罗布麻甲素。分子式：C21H20O12，分子量：464.38。黄色针状结晶(水)，熔点225-227℃，几乎不溶于冷水，微溶于沸水，溶于碱溶液显深黄色。黄色结晶(乙醇)，熔点206-208℃和232-236℃。淡黄色针晶，熔点220-222℃(分解)。结晶(热水)，熔点230℃。动物实验具有降血压作用。毛细血管渗透性等试验表明具有抗炎作用。对棉蛉芽虫的幼虫有毒杀作用。具有降酶作用，为田基黄治疗肝炎的有效成分之一。[0003]红旱莲，又名长柱金丝桃、湖南连翘、鸡心菜等，系藤黄科金丝桃属植物黄海棠(HypericumascyronL.)的全草，具有凉血止血、平肝消肿、清热解毒之功效，可用于抗抑郁症、抗病毒、抗癌等。研究表明黄酮类化合物是红旱莲发挥药效的主要物质基础，该类物质具有抗衰老、抗抑郁、降血压、降血脂等多重生理作用。[0004]现有技术对黄酮的提取，主要采用超声波法提取黄酮类物质，它的原理是超声的空化作用对细胞膜的破坏，有助于黄酮类化合物的释放与溶出，超声波使提取液不断震荡，促进溶质扩散，超声波产生的震荡作用还可促进细胞内物质的释放、扩散及溶解，有利于提高提取物的提取率。同时超声波的热效应使水温基本在57℃，对原料有水浴作用。因此，超声波法相对于加热提取，缩短了提取时间，提高了有效成分的提出率，原料的利用率。有大量文献报道了从葛根、水芹、苦荞麦、银杏叶等中提取黄酮类物质。[0005]现有的萃取方法，在挥发油方面的应用水蒸气蒸馏法和有机溶剂萃取法