固相萃取‑液相色谱‑质谱/质谱法同时测定蜂蜜中烟碱类药物残留量的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107091896A(43)申请公布日2017.08.25(21)申请号201710384911.2(22)申请日2017.05.26(71)申请人浙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心地址310016浙江省杭州市富春路126号(72)发明人侯建波谢文洪灯张文华钱艳祝泽龙姚滨滨(74)专利代理机构杭州丰禾专利事务所有限公司33214代理人王从友(51)Int.Cl.G01N30/06(2006.01)G01N30/88(2006.01)权利要求书2页说明书9页附图7页(54)发明名称固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定蜂蜜中烟碱类药物残留量的方法(57)摘要本发明涉及蜂蜜中多种烟碱类药物残留量测定的检测方法，尤其涉及一种固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定蜂蜜中多种烟碱类药物残留量的方法。本方法经水稀释样品和提取，HLB固相萃取净化的前处理过程，采用液相色谱-质谱/质谱法测定，外标法和同位素内标稀释法定量。该方法简便快捷，消耗资源小，检测成本低，所提及的前处理过程、涉及化合物以及测定所用仪器可以与已有方法进行很好的互补，适用于蜂蜜中烟碱类药物残留量同时测定的要求，可以为维护食品安全和保障蜂蜜质量进一步提供有力的技术保障。CN107091896ACN107091896A权利要求书1/2页1.固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定蜂蜜中烟碱类药物残留量的方法，其特征在于所述的烟碱类药物为烯啶虫胺、呋虫胺、噻虫嗪、噻虫胺、吡虫啉、啶虫脒、噻虫啉、氟啶虫酰胺、氯噻啉和吡呀酮，该方法包括以下的步骤：一、样品前处理称取样品2.00g，精确到0.01g，置于50mL具塞离心试管中，加入同位素内标物溶液，加水至20mL，涡旋，混匀，高速离心，取上清液5mL转移至HLB固相萃取柱进行净化，甲醇：水＝1：9的混合溶液进行淋洗，抽干，甲醇洗脱，收集5mL洗脱溶液并用氮气吹至近干，用甲醇：0.15％甲酸＝1：9的溶液定容至10mL，过0.22μm滤膜，待液相色谱-质谱/质谱仪测定；同位素内标溶液的加入为：噻虫胺-D3、吡虫啉-D4、噻虫啉-D4、噻虫嗪-D3、啶虫脒-D3和呋虫胺-D3内标物20ng；二、测定1)标准工作液和样品溶液在设定的液相色谱串联质谱条件下进样，以质量浓度X为横坐标，峰面积的比值Y为纵坐标，外标法定量的化合物时以峰面积为纵坐标，绘制5点标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中各化合物的响应值应在仪器检测的线性范围内；设定的各化合物的母离子、子离子和碰撞能量等质谱参数如下：2CN107091896A权利要求书2/2页设定的液相色谱-质谱/质谱仪的参数如下：2)在上述色谱条件下，判断样品中是否存在相应的被测物，需要满足如下条件：样品溶液中出现的质量色谱峰保留时间与混合基质标准工作液一致，允许偏差小于±2.5％，该色谱峰所对应的化合物在设定的质谱定性离子的相对离子丰度与浓度相当的混合基质标准工作液的相对离子丰度一致，相对离子丰度偏差不超过设定的规定，则可确定含有该化合物；设定的相对离子丰度的最大允许偏差如下：相对离子丰度>50％，允许的相对偏差±20％相对离子丰度20％～50％，允许的相对偏差±25％相对离子丰度10％～20％，允许的相对偏差±30％相对离子丰度≤10％，允许的相对偏差±50％。3CN107091896A说明书1/9页固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定蜂蜜中烟碱类药物残留量的方法技术领域[0001]本发明涉及蜂蜜中多种烟碱类药物残留量测定的检测方法，尤其涉及一种固相萃取-液相色谱-质谱/质谱法同时测定蜂蜜中多种烟碱类药物残留量的方法。背景技术[0002]蜂蜜因自身富含多种维生素、矿物质和氨基酸以及人体可直接吸收的单糖(葡萄糖、果糖)等多种类营养物质，且对于便秘、胃和十二指肠溃疡病等都有良好的辅助医疗作用，同时可提高人体免疫力，因此作为一种营养丰富的食品越来越被广大消费者所接受。伴随人民生活水平的提高，对蜂蜜的需求量也不断增加，其质量安全直接关系到人体健康。[0003]烟碱类药物属于一类新型高效、低毒、内吸性强、残效期长、残留量低的广谱性杀虫剂。自20世纪80年代中期第一个烟碱类杀虫剂吡虫啉问世，到目前为止已有十几个产品商品化或即将商品化，如呋虫胺(dinotefuran)、噻虫胺(clothianidin)、吡虫啉(imidacloprid)、啶虫脒(acetamiprid，又名吡虫清)等。其广泛用于水稻、玉米、南瓜等农作物的害虫防治，市场占有率很高。[0004]研究表明烟碱类杀虫剂的作用机制主要是通过选择性控制昆虫神经系统烟碱型乙酰胆碱酯酶受体，阻断昆虫中枢神经系统的正常传导，从而导致害虫出现麻痹进而死亡。它可有