一种雄蜂蛹小分子抗氧化肽的制备方法及其雄蜂蛹小分子抗氧化肽的应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108034683A(43)申请公布日2018.05.15(21)申请号201711370239.8(22)申请日2017.12.19(71)申请人华中农业大学地址430000湖北省武汉市洪山区狮子山街1号(72)发明人刘睿盛金旺鲁群张久亮蔡昭龙(74)专利代理机构北京高沃律师事务所11569代理人刘奇(51)Int.Cl.C12P21/06(2006.01)C07K1/34(2006.01)A61K38/01(2006.01)A61P39/06(2006.01)A23L33/18(2016.01)权利要求书1页说明书5页附图1页(54)发明名称一种雄蜂蛹小分子抗氧化肽的制备方法及其雄蜂蛹小分子抗氧化肽的应用(57)摘要本发明提供了一种雄蜂蛹小分子抗氧化肽的制备方法，属于功能性食品技术领域，将雄蜂蛹粉与水混合、匀浆，调节匀浆液的pH值后，与复合酶混合后酶解，复合酶包括内切蛋白酶和外切蛋白酶；将酶解液离心分离、过滤，得到滤液，将滤液进行第一步超滤分离肽段；再进行第二步超滤脱盐；经减压浓缩后冷冻干燥，得到雄蜂蛹小分子抗氧化肽。采用本发明的方法能够减少酶解液中苦味肽的形成，并且能够增加酶解液中的小分子肽的含量，得到的雄蜂蛹小分子抗氧化肽的分子量小于1ku，并且具有高活性的抗氧化性能。CN108034683ACN108034683A权利要求书1/1页1.一种雄蜂蛹小分子抗氧化肽的制备方法，包括以下步骤：1)将雄蜂蛹粉与水混合、匀浆，调节匀浆液的pH值为6～7后，与复合酶混合，在50～60℃下酶解1～3h，得到酶解液，所述复合酶包括内切蛋白酶和外切蛋白酶；2)将所述步骤1)得到的酶解液进行离心分离，将得到的上清液进行过滤，得到滤液，所述离心分离的速度为4000～5000rpm，所述过滤使用滤布进行，所述滤布的孔径为1～5μm；3)将所述步骤2)得到的滤液进行第一步超滤分离肽段，得到肽段分子量＜1ku的超滤液，所述第一步超滤依次使用的超滤膜的截留分子量为10ku、5ku、3ku和1ku；4)将所述步骤3)得到的肽段分子量＜1ku的超滤液进行第二步超滤脱盐，得到截留液，所述第二步超滤使用的超滤膜的截留分子量为0.15～0.3ku；5)将所述步骤4)得到的截留液减压浓缩后冷冻干燥，得到雄蜂蛹小分子抗氧化肽。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)复合酶的总酶活与雄蜂蛹粉的质量比为(1000～2000)U:1g，所述内切蛋白酶和外切蛋白酶的酶活比为(1～3):(1～3)。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)内切蛋白酶包括碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶中的一种或几种。4.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述外切蛋白酶包括风味蛋白酶、羧肽酶和氨肽酶中的一种或几种。5.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)雄蜂蛹粉的粒度为10～100μm。6.根据权利要求1或5所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)雄蜂蛹粉的质量与水的体积比为1g:(10～15)mL。7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)离心分离的时间为10～15min。8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)第一步超滤的条件包括：所述第一步超滤过程中滤液流速为0.5～10L/H，所述第一步超滤的膜元件压力为0～0.8MPa，在第一步超滤结束前加入纯水进行洗涤，直至流出的透过液为无色；所述第二步超滤的条件包括：所述第二步超滤的流速为0.5～10L/H，第二步超滤的膜元件压力为0～1.2MPa，在第二步超滤结束前加入纯水进行洗涤，直至流出的透过液为无色。9.权利要求1～8任意一项所述的制备方法制备得到的雄蜂蛹小分子抗氧化肽，所述雄蜂蛹小分子抗氧化肽的分子量为0.15～1ku。10.权利要求1～8任意一项所述的制备方法制备得到的雄蜂蛹小分子抗氧化肽或权利要求9所述的雄蜂蛹小分子抗氧化肽在制备抗氧化药物和/或食品中的应用。2CN108034683A说明书1/5页一种雄蜂蛹小分子抗氧化肽的制备方法及其雄蜂蛹小分子抗氧化肽的应用技术领域[0001]本发明涉及功能性食品技术领域，尤其涉及一种雄蜂蛹小分子抗氧化肽的制备方法及其雄蜂蛹小分子抗氧化肽的应用。背景技术[0002]雄蜂蛹是指蜂王在雄蜂房产的未受精卵，经工蜂孵化、发育、羽化的蛹体，其一般是指雄性蜜蜂发育到22～23日龄时的个体，此时的蛹已成熟，但尚未羽化，含有极其丰富的营养物质，是蜂王浆生产过程中的废弃物。我国蜂群每年可产生4000t以上的干雄蜂蛹。但长期以来，国内生产的蜂蛹制品主要为蜂蛹蛋白粉，只进行简单的加工，或将直接作为原料出口，产品的技术含量