利用叶柄获得胭脂花体细胞再生植株的方法及其培养基.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102715083A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102715083A(43)申请公布日2012.10.10(21)申请号201210185487.6(22)申请日2012.06.06(71)申请人中央民族大学地址100081北京市海淀区中关村南大街27号(72)发明人王俊丽宋韵霏刘坤王前毕凯丽张璐李建飞(74)专利代理机构北京纪凯知识产权代理有限公司11245代理人关畅任凤华(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书权利要求书1页1页说明书说明书66页页附图附图22页(54)发明名称利用叶柄获得胭脂花体细胞再生植株的方法及其培养基(57)摘要本发明公开了一种利用叶柄获得胭脂花体细胞再生植株的方法及其培养基。将胭脂花（Primulamaximowiczii）叶柄外植体在含不同浓度植物生长调节剂2,4-D（1.0-2.0mg/L）和TDZ（1.0-4.0mg/L）组合的MS培养基中进行诱导的不定芽诱导率在19.0%—52.4%之间，明显高于含不同单一的植物生长调节剂2，4-D（1.0-4.0mg/L）或TDZ（1.0-4.0mg/L）的MS培养基的不定芽诱导率2.4%—19.0%。在含2,4-D4.0mg/L和6-BA2.0mg/L的MS培养基中进行不定芽扩繁培养，扩增系数可达9.2。本发明以胭脂花叶柄为外植体，建立了完整稳定的胭脂花体细胞再生体系，对有效保护和利用野生胭脂花资源具有重要价值。CN1027583ACN102715083A权利要求书1/1页1.用于获得胭脂花（Primulamaximowiczii)体细胞再生植株的成套培养基，含有独立包装的培养基A；所述培养基A为由MS培养基、2,4-二氯苯氧乙酸和噻苯隆制成的固体培养基；所述2,4-二氯苯氧乙酸在所述培养基A中的含量为1.0mg/L—2.0mg/L；所述噻苯隆在所述培养基A中的含量为1.0mg/L—4.0mg/L。2.根据权利要求1所述的成套培养基，其特征在于：所述2,4-二氯苯氧乙酸在所述培养基A中的含量为1.0mg/L或2.0mg/L。3.根据权利要求1或2所述的成套培养基，其特征在于：所述噻苯隆在所述培养基A中的含量为1.0mg/L、2.0mg/L或4.0mg/L。4.根据权利要求1-3中任一所述的成套培养基，其特征在于：所述成套培养基中含有独立包装的培养基B；所述培养基B为由MS培养基、2,4-二氯苯氧乙酸和6-苄氨基腺嘌呤制成的固体培养基；所述2,4-二氯苯氧乙酸在所述培养基B中的含量为4.0mg/L，所述6-苄氨基腺嘌呤在所述培养基B中的含量为2.0mg/L。5.获得胭脂花（Primulamaximowiczii）体细胞再生植株的方法，包括将所述胭脂花的叶柄用权利要求1-3中任一所述的培养基A培养获得所述胭脂花不定芽，最后获得所述胭脂花的再生植株。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述胭脂花的叶柄取自株高为2-3cm的所述胭脂花实生苗。7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于：所述方法包括将所述胭脂花不定芽用权利要求4所述的培养基B进行扩繁培养的步骤。8.根据权利要求5-7中任一所述的方法，其特征在于：所述方法包括将所述胭脂花不定芽用不含植物生长调节剂的MS培养基进行生根培养的步骤。9.根据权利要求5-8中任一所述的方法，其特征在于：所述培养的光照和温度条件如下：每天24小时中光照16小时，光照强度为1500-2000Lux，其余时间为黑暗，温度为25℃。2CN102715083A说明书1/6页利用叶柄获得胭脂花体细胞再生植株的方法及其培养基技术领域[0001]本发明涉及一种利用叶柄获得胭脂花体细胞再生植株的方法及其培养基。背景技术[0002]胭脂花（Primulamaximowiczii），别名段报春，蒙名为套日格-哈布日西勒-其其格，属报春花科（Primulaceae）报春花属（Primula），为一种早春开花的多年生草本野生花卉。主要分布于我国东北、华北至西北的亚高山草甸及较高山林地下、林缘和潮湿腐殖质丰富的地方，其观赏价值高，是一种很有园林开发价值的野生花卉。胭脂花还是一种野生的蒙药药用植物，据《新华本草纲要》记载，全草可以入药，有止痛、祛风的功能，可用于治疗癫痫头痛。由于胭脂花分布海拔较高，入药需求量较大，近年来已日益匮乏。[0003]目前，有关胭脂花的研究工作主要集中在种子萌发条件、不同条件对胭脂花生长发育的影响、染色体核型观察及化学成分等，有关胭脂花的离体培养研究很少。发明内容[0004]本发明的一个目的是提供一种用于获得胭脂花（Primulamaximowiczii)体细胞再生植株的成套培养基，含有独立包装的培养基A；所述培养基A为由MS培养基、