一种黄独愈伤快速繁殖方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN104542308A(43)申请公布日2015.04.29(21)申请号201510056427.8(22)申请日2015.02.03(71)申请人广西壮族自治区药用植物园地址530023广西壮族自治区南宁市长岗路189号(72)发明人李刚王晓峰缪剑华樊兰兰韦坤华(74)专利代理机构北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙)11369代理人靳浩(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页说明书6页(54)发明名称一种黄独愈伤快速繁殖方法(57)摘要本发明提供一种黄独愈伤成苗快速繁殖方法，包括：使用愈伤诱导培养基进行黄独愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；使用MS繁殖培养基对所得的愈伤组织进行愈伤组织分化培养，得到丛生芽；使用MS壮苗培养基中对所得的丛生芽进行丛生芽壮苗培养，得到健壮植株；使用MS生根培养基对所得的健壮植株进行植株生根培养最终得到完整植株，实现黄独幼苗的炼苗和移栽。本发明提高了愈伤组织分化速度，提高了丛生芽的生长速度，提高了生根率。本发明所述的快速繁殖方法，得到的单芽增殖系数达到30-50倍，获得的组培苗生根率在95％以上，每株平均带5-8个根，根长为3-5厘米，移栽沙床成活率在98％以上。CN104542308ACN104542308A权利要求书1/1页1.一种黄独愈伤成苗快速繁殖方法，其特征在于：使用愈伤诱导培养基进行黄独愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；使用MS繁殖培养基对所得的愈伤组织进行愈伤组织分化培养，得到丛生芽；使用MS壮苗培养基中对所得的丛生芽进行丛生芽壮苗培养，得到健壮植株；使用MS生根培养基对所得的健壮植株进行植株生根培养最终得到完整植株，实现黄独幼苗的炼苗和移栽；其中，所述愈伤诱导培养基中含有：4-6g/L的牛肉浸膏、1.0-2.0mg/L的TDZ、0.5-1.0mg/L的NAA、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂；MS繁殖培养基中含有：4-6g/L的牛肉浸膏、0.1-0.4mg/L的KT、1.0-2.0mg/L的6-BA、0.2-1.0mg/L的IBA、1-5g/L的GA3、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂；MS壮苗培养基中含有：4-6g/L的牛肉浸膏、0.5-1.5mg/L的6-BA、0.1-0.4mg/L的KT、0.2-0.6mg/L的IAA、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂；MS生根培养基中含：4-6g/L的牛肉浸膏、1.0-2.0mg/L的NAA、0.5-1.0mg/L的IBA、15-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂。2.如权利要求1所述的黄独愈伤成苗快速繁殖方法，其特征在于，所述愈伤组织培养的方法为：将无菌试管苗剪切成段接种到愈伤诱导培养基中，在培养温度为23-26℃，光照强度1400-2000lux，光照时间为10-12小时/天的条件下培养24-25天得到愈伤组织。3.如权利要求1所述的黄独愈伤成苗快速繁殖方法，其特征在于，愈伤组织分化培养方法为：将所得的愈伤组织接种到MS繁殖培养基中，在培养温度为23-26℃，光照强度1400-2000lux，光照时间为10-12小时/天的条件下培养29-30天，至侧芽分化后获得丛生芽。4.如权利要求1所述的黄独愈伤成苗快速繁殖方法，其特征在于，所述丛生芽壮苗培养方法为：将所得的丛生芽置于MS壮苗培养基中，在培养温度23-26℃，光照强度1400-2000lux，光照时间为10-12小时/天的条件下培养19-20天得到健壮植株。5.如权利要求1所述的黄独愈伤成苗快速繁殖方法，其特征在于，所述植株生根培养步骤包括：将所得的健壮植株置于MS生根培养基中，在培养温度23-26℃，光照强度1400-2000lux，光照时间为10-12小时/天的条件下培养39-40天得到带根的完整植株。6.如权利要求1或5所述的黄独愈伤成苗快速繁殖方法，其特征在于，所述炼苗和移栽包括以下步骤：步骤一、将所得的完整植株，在温度为22-25℃条件下，使用水炼苗2-4天，表面角质形成后取出，得到苗株；步骤二、将所得苗株移栽到通风良好且光照强度为500-2000lux的沙土壤中，在沙土壤中培养30-50天后得到小树；步骤三、将所得小树移栽大田，移栽后一个星期内，每天喷雾3-5次，每次10min；一星期后每天喷雾1-2次，每次10min；移栽时的温度条件为20-28℃，相对湿度75-80％，遮阳率为65-75％，最后得到移栽种苗。7.如权利要求1所述的黄独愈伤成苗快速繁殖方法，其特征在于，所述各培养基的初始pH均为5-6。2CN104542308A说明书1/6页一种黄独愈伤快速繁殖方法技术领域[0001]本发明涉及植物