一种利用走马胎幼芽胚轴快速繁殖其种苗的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN104585040A(43)申请公布日2015.05.06(21)申请号201510065908.5(22)申请日2015.02.07(71)申请人广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所地址541006广西壮族自治区桂林市雁山区雁山街85号(72)发明人唐凤鸾黄宁珍何金祥赵健毛世忠(74)专利代理机构桂林市华杰专利商标事务所有限责任公司45112代理人杨雪梅(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)A01C1/00(2006.01)A01C1/08(2006.01)权利要求书1页说明书6页附图3页(54)发明名称一种利用走马胎幼芽胚轴快速繁殖其种苗的方法(57)摘要本发明公开了一种利用走马胎幼芽胚轴快速繁殖其种苗的方法，包括如下步骤：选取生长饱满的走马胎种子，表面消毒灭菌后经赤霉素处理，接种在萌发培养基上诱导形成幼芽，切取幼芽胚轴接入不定芽诱导培养基形成不定芽，再将不定芽切成带1～2个腋芽的小段接入芽增殖培养基中进行增殖培养，后切取生长健壮、长3～4cm的单芽接入生根培养基中诱导生根，并炼苗移栽。本发明的优点：能够利用小量走马胎材料快速增殖产生大量不定芽，成活率高达82.5%，为走马胎的工厂化育苗提供了一条有效的途。CN104585040ACN104585040A权利要求书1/1页1.一种利用走马胎幼芽胚轴快速繁殖其种苗的方法，其特征在于包括以下步骤:（1）选取生长饱满的走马胎的种子，经表面消毒灭菌后加入浓度为100~150mg/L的赤霉素水溶液，在温度为35±2℃、转速为130~138转/分钟的摇床上浸泡24h，无菌水清洗干净；（2）将处理后的种子接种在萌发培养基中获得幼芽，萌发培养基为：MS+6-BA0.5～1.0mg/L+NAA0.1～0.2mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0g/L、蔗糖30g/L、0.1~0.2%活性炭，pH为5.8；（3）切取幼芽胚轴接入不定芽诱导培养基中获得不定芽，胚轴不定芽诱导培养基为：WPM+6-BA0.1～0.5mg/L+KT0.1～0.5mg/L+NAA0.1～0.2mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0g/L、蔗糖30g/L，pH为5.8；（4）将不定芽切成带1～2个腋芽的小段，接入芽增殖培养基中进行继代增殖培养，芽增殖培养基为：WPM+6-BA0.1～0.5mg/L+ZT0.01～0.05mg/L+NAA0.01～0.1mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0g/L、蔗糖30g/L，pH为5.8；（5）切取生长健壮、长3～4cm的单芽接入生根培养基中诱导生根，生根培养基为：WPM+NAA0.1～1.0mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0g/L、蔗糖30g/L、0.1~0.2%活性炭，pH为5.8；（6）将生根试管苗在湿度为70～80%的室内散射光下炼苗10天后，洗净培养基移栽于经甲基托布津消毒的树皮︰火烧土︰园土为1︰2︰2的混合基质中，成活率为66.7～82.5%。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）中所述赤霉素水溶液的浓度为100~120mg/L，赤霉素水溶液与走马胎种子的体积比为5︰1。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）中所述萌发培养条件为温度28±2℃的暗培养。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）、（4）、（5）中所述培养条件为光照强度800～1200lux，光照时间10±1h/d，温度28±2℃。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述萌发培养基为：MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0g/L、蔗糖30g/L、0.1~0.2%活性炭，pH为5.8。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（3）所述胚轴不定芽诱导培养基为：WPM+6-BA0.5mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.2mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0g/L、蔗糖30g/L，pH为5.8。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（4）所述芽增殖培养基为：WPM+6-BA0.2mg/L+ZT0.02mg/L+NAA0.05mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0g/L、蔗糖30g/L，pH为5.8。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（5）所述生根培养基为：WPM+NAA0.5mg/L，同时添加琼脂粉4.5~6.0g/L、蔗糖30g/L、0.1~0.2%活性炭，pH为5.8。2CN104585040A说明书1/6页一种利用走马胎幼芽胚轴快速繁殖其种苗的方法技术领域[0001]本发明属于植物生物技术领域，具体涉及一种利用走马胎幼芽胚轴快速繁殖其种苗的方法。背景技术[0002]走马胎(Ardis