高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105974004A(43)申请公布日2016.09.28(21)申请号201610263370.3(22)申请日2016.04.26(71)申请人广西壮族自治区梧州食品药品检验所地址543000广西壮族自治区梧州市西环路中段198号(72)发明人陈学松陈江涛梁慧敏李亚李澄林冬(74)专利代理机构广州市越秀区海心联合专利代理事务所(普通合伙)44295代理人黄为蔡国(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)权利要求书1页说明书2页(54)发明名称高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法(57)摘要本发明提供了一种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法，旨在提供一种操作简单，节约能耗的测定桔梗中桔梗皂苷的方法，其技术方案是：取桔梗粉碎，过筛，用石油醚将桔梗皂苷超声处理5min，离心取下层沉淀，干燥，得粗粉；在微波反应器中，向粗粉加入溴化1-十六烷基-3-甲基咪唑，沉淀质量2倍的丙醇，在65℃，处理12min得到提取液；将提取液浓缩后得到浓缩液，向浓缩液中加入大孔树脂混合并搅拌均匀，干燥后上AB-8树脂，水洗至无色，再以甲醇溶液淋洗，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩并干燥后即得产物；称取的干粉1g，加入体积比20：80的乙腈∶0.5％磷酸，摇匀，放置，经膜过滤，得试样溶液，注样入高效液相色谱仪，测定；属于化学提取技术领域。CN105974004ACN105974004A权利要求书1/1页1.一种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法，其特征在于，依次包括下述步骤；1)取桔梗粉碎，过筛，按质量比1:10的比例用石油醚将桔梗皂苷超声处理5min，离心取下层沉淀，干燥，得粗粉；2)在微波反应器中，取步骤1)得到的粗粉加入溴化1-十六烷基-3-甲基咪唑，沉淀质量2倍的丙醇，在65℃，处理12min得到提取液；3)将提取液浓缩后得到浓缩液，向浓缩液中加入大孔树脂混合并搅拌均匀，干燥后上AB-8树脂，水洗至无色，再以甲醇溶液淋洗，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩并干燥后即得产物；4)称取步骤3)的干粉1g，加入体积比20：80的乙腈∶0.5％磷酸，摇匀，放置，经膜过滤，得试样溶液，注样入高效液相色谱仪，测定；所述的高效液相色谱法的参数如下：色谱柱：InertsilODS-SP液相色谱柱，5μm4.6×250mm；柱温：30℃；流速：1mL/min、流动相：乙腈-0.2％磷酸，检测波长：323nm。2.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法，其特征在于，所述的溴化1-十六烷基-3-甲基咪唑和粗粉的质量比为1：99。3.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法，其特征在于，所述的滤膜为0.45um滤膜过滤。2CN105974004A说明书1/2页高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法技术领域[0001]本发明提供一种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法；属于化学检测技术领域。背景技术[0002]桔梗，别名包袱花、铃铛花、僧帽花，是多年生草本植物，茎高20～120厘米，通常无毛，偶密被短毛，不分枝，极少上部分枝。叶全部轮生，部分轮生至全部互生，无柄或有极短的柄，叶片卵形，卵状椭圆形至披针形，叶子卵形或卵状披针形，花暗蓝色或暗紫白色，可作观赏花卉；其根可入药，有止咳祛痰、宣肺、排脓等作用，中医常用药。在中国东北地区常被腌制为咸菜，在朝鲜半岛被用来制作泡菜，当地民谣《桔梗谣》所描写的就是这种植物。[0003]桔梗干燥根经清洗、干燥、粉碎、装罐、70％乙醇为溶剂，加热回流提取三次，每次2小时，合并三次提取液，回收乙醇至无醇后，浓缩蒸发水至浸膏，喷雾干燥得桔梗提取物粉末，提取得率一般为15％，经粉碎、过筛(100目)，混合，包装得成品。发明内容[0004]针对上述不足，本发明的目的是提供一种操作简单，节约能耗的离子液体提取桔梗中桔梗皂苷的方法。[0005]为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：[0006]一种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法，依次包括下述步骤；[0007]1)取桔梗粉碎，过筛，按质量比1:10的比例用石油醚将桔梗皂苷超声处理5min，离心取下层沉淀，干燥，得粗粉；[0008]2)在微波反应器中，取步骤1)得到的粗粉加入溴化1-十六烷基-3-甲基咪唑，沉淀质量2倍的丙醇，在65℃，处理12min得到提取液；[0009]3)将提取液浓缩后得到浓缩液，向浓缩液中加入大孔树脂混合并搅拌均匀，干燥后上AB-8树脂，水洗至无色，再以甲醇溶液淋洗，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩并干燥后即得产物；[0010]4)称取步骤3)的干粉1g，加入体积比20：80的乙腈∶0.5％磷酸，摇匀，放置，经0.45um滤膜过滤，得试样溶